收藏本站
《厦门大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

文昌鱼应激反应的蛋白质组学及creatine kinase的免疫功能研究

高媛媛  
【摘要】: 由于文昌鱼在进化上的特殊地位,近年来成为众多免疫学家研究的热点。通过研究文昌鱼自身免疫的特点,寻找文昌鱼免疫相关因子,尤其是适应性免疫的分子,进一步揭示适应性免疫如何起源和进化,具有重要的意义。本文以厦门海域文昌鱼为研究材料,运用蛋白质组学、免疫学、分子学生物学等研究方法,对文昌鱼五种应激免疫反应进行研究,筛选和鉴定了多种和文昌鱼免疫相关的蛋白,并对其中最重要的肌酸激酶(creatine kinase,CK)在抵御病原菌感染中的作用进行了深入研究。 在国内外首先采用差异蛋白质组学技术,研究了文昌鱼对盐度、皮肤划伤应激和对细菌感染、免疫攻毒等的体液或肌肉蛋白质组,发现了差异变化蛋白,探讨了其免疫保护特征,旨在初步阐明文昌鱼免疫进化特点。通过比较分析上述文昌鱼免疫反应的试验结果,发现了文昌鱼15个免疫相关因子,其中ribosomalprotein S10,CAVPT,Cathepsin,Intermediate filament protein以及CK在多种免疫反应中表达都发生变化,对进一步确定文昌鱼相关免疫因子具有重要的参考价值。特别重要的是,CK在双向电泳图谱中表现为11种不同形式的蛋白点,位于酸端的CK1的变化最为显著,值得进一步研究。 通过Western blotting检测和酶活力测定,进一步证明割伤后体液中CK的酶活力和蛋白含量都有一个先升高再恢复的动态变化过程,说明CK是一个典型的APP。此外,通过对文昌鱼CK的克隆测序分析和磷酸化分析,探讨了CK在双向电泳图谱中表现形式的多样性的原因,推测这种多样性不是由基因多样性造成,而是由翻译后修饰造成的。 通过pull-down试验证明,文昌鱼体液中的CK蛋白可以和多种细菌结合。纯化的原核表达CK可以使多种菌凝集,进一步证明了这种结合是一种直接的相互作用。通过酶活力测定发现,细菌菌体结合CK后能抑制其酶活力。不同菌对CK结合抑制能力不同,并且这种影响呈剂量效应。Far-western blotting和Co-IP试验证明了大肠杆菌通过OmpA,OmpX,OmpW三个外膜蛋白和CK直接结合。三个蛋白在Ecoli BW25113与突变株△OmpA,△OmpW和△OmpX的含量不同,并且对CK的影响能力也不同:OmpA和OmpW在菌体中含量大,对CK活力的抑制作用比较强,而OmpX的含量相对比较少,并且没有抑制作用。因此,Ecoli BW25113与突变株△OmpA,△OmpW和△OmpX对CK的结合能力和对其活力的抑制作用不同。Far-Western blotting的结果显示,OmpA和OmpW都同时和CK的两个结构域domainC及domainN结合,而OmpX仅和domainC结合,这可能是导致OmpX不能抑制CK酶活力的原因。 RNA干扰试验说明,CK在文昌鱼抵御病原菌侵入方面有重要的作用。不同浓度的副溶血弧菌感染文昌鱼的试验和抑菌试验的结果表明,一定浓度的CK只能抑制一定数量的病原菌的生长,如果菌数目过多则不能达到抑制的目的。因此,我们推测文昌鱼的CK在抵御病原菌入侵的时候,既有识别功能,也具有一定抑菌作用。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q4

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 于华,张春秀;抗原抗体之间的相互反应及其研究方法[J];化工时刊;2004年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱建华,叶棋浓,江泽飞,严景华,宋三泰,黄翠芬;利用GST沉淀技术检测蛋白质间的相互作用[J];癌症;2003年07期
2 李世忠,李岩,李勇,袁琳,于晓丽,张雪松,陈晶;两株抗M和两株抗N单克隆抗体的血型血清学分析[J];中国输血杂志;1995年03期
3 李国庆,伍育源,秦志峰,刘运莲;鱼类遗传多样性研究[J];水产科学;2004年08期
4 邬国民,陈焜慈,罗建仁,林国光,冼炽彬,钟海浪;三种胡子鲶及其杂种F_1的乳酸脱氢酶同功酶的比较研究[J];动物学研究;1990年03期
5 郑淑贞;潘亮君;黄方吕;林慧贞;;斯氏花群海葵多糖Ⅰ和Ⅱ的组成研究[J];广州化学;1991年03期
6 聂崇兴,陈翠娥;湖南省浏阳县卫氏并殖吸虫苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)的初步检测[J];中南大学学报(医学版);1984年01期
7 郭进武,孔天翰,董伟华,肖桂元,杨卓平,周少雄,韩雪飞,陈华艳;Sepharose FF凝胶柱分离参数变化对蝎毒抗癌多肽纯化的影响[J];河南医科大学学报;2000年04期
8 孔天翰,郭进武,肖桂元,杨卓平,周少雄,韩雪飞,陈华艳,董伟华;蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离方法研究[J];河南医科大学学报;2000年04期
9 王磊;宿红艳;冯培勇;张士璀;;文昌鱼与比较基因组学和分子发育生物学[J];海洋湖沼通报;2005年04期
10 王长法,张士璀,王昌留;水生无脊椎动物凝集素研究概述[J];海洋科学;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王晓梅;宋文芹;李秀兰;陈瑞阳;;金鱼四个代表品种基因组DNA的遗传变异研究[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王长法;文昌鱼体液和鱼类血清补体溶血系统比较研究[D];中国海洋大学;2003年
2 王昌留;青岛文昌鱼染色体的核型及带型研究[D];中国海洋大学;2003年
3 宋林霞;利用酵母双杂交系统筛选与G蛋白及CaM相互作用的新蛋白[D];河北师范大学;2003年
4 李渝萍;肌钙蛋白I2作为核受体辅活化子的鉴定[D];第三军医大学;2004年
5 林浴霜;青岛文昌鱼早期发育相关基因AmphiMdp和brp-like的研究[D];山东大学;2005年
6 黄向炜;青岛文昌鱼早期发育相关基因HMGB、Thymosinβ-4、RACK1和文昌鱼系统进化的研究[D];山东大学;2005年
7 王勇军;文昌鱼cathepsin、β-MSP和allantoicase基因的特征、表达和进化研究[D];中国海洋大学;2005年
8 刘利平;玻璃海鞘(Ciona intestinalis)实验养殖、血细胞的分类及其免疫应答研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
9 黄瑾;Jab1降解9-1-1引发DNA损伤修复障碍的机制研究[D];新疆医科大学;2006年
10 李擒龙;Apmcf1基因在肝癌中的表达及其在细胞周期调节中作用机制的研究[D];第四军医大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐小勇;雷公藤有效成份的提取及分离研究——萃取、柱层析[D];浙江大学;2005年
2 朱思超;深圳茜坑水库三种小型鱼类的摄食与排泄及其对水质影响的研究[D];华中农业大学;2003年
3 陈巧林;金属硫蛋白-3(MT-3)相互作用蛋白的分子克隆、鉴定及性质研究[D];扬州大学;2002年
4 夏建军;文昌鱼AmphiANT和AmphiTRAPβ基因的鉴定、表达和进化研究[D];中国海洋大学;2005年
5 马利芳;青岛文昌鱼AmphiSDHD和AmphiS27基因克隆、表达与进化分析[D];中国海洋大学;2005年
6 邵壮超;基于多分类器组合的蛋白质—蛋白质相互作用位点预测研究[D];西北工业大学;2006年
7 田雪文;Wnt信号分子在脂肪代谢中的作用及其蛋白性质研究[D];山东师范大学;2006年
8 李磊;文昌鱼nifU-like基因的鉴定、表达和进化分析[D];中国海洋大学;2006年
9 陈璐;海参肌肉组织全长cDNA文库的构建及初步鉴定[D];中国海洋大学;2006年
10 薛积玉;文昌鱼尿素酶辅助蛋白UreG基因的克隆、特性、进化分析和组织特异性表达的研究[D];中国海洋大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 杨方,严宏;糖尿病性白内障发病机制和药物治疗[J];第四军医大学学报;2004年18期
2 向建国,周进,金宏;斑点叉尾鮰的生物学与生理生化特性研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2004年04期
3 虞鹏程,廖东江,简少卿;虎纹蛙蝌蚪与幼蛙肌肉蛋白质的双向电泳图谱对比分析[J];江西科学;2005年02期
4 谭玉凤;张迎梅;王丙莲;龙静;黄德军;刘江海;;亚硒酸钠染毒对小鼠免疫功能的影响[J];环境与职业医学;2006年01期
5 赵锐,纪建国,郝守进,陈倩,袁洪生,管华诗,茹炳根;正常与重金属铅注射的兔脑蛋白质双向电泳图谱比较与鉴定[J];生物化学与生物物理进展;2001年06期
6 梁萍,方永强,洪桂英,黄展胜,杨孙楷,苏循荣;硒对文昌鱼的毒性效应和生长的影响[J];台湾海峡;1989年02期
7 苏静,王桂忠,刘文杰,王三英,彭宣宪;锯缘青蟹对病原菌感染的急性反应功能蛋白质组[J];厦门大学学报(自然科学版);2005年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 廖东江;棘胸蛙蝌蚪与幼蛙肝脏蛋白质组初步研究[D];南昌大学;2005年
2 熊国勇;棘胸蛙蝌蚪与幼蛙肌肉蛋白质组初步研究[D];南昌大学;2006年
3 刘民;亚硒酸盐对泥鳅毒性作用的研究[D];山东师范大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吕晓迎,黄蕙芬,唐祖明,沈晓峰,张浩康,陈德敏,钟银屏,俞枋,王德育,黄炎,钱卫平,袁春伟;光反射干涉生物传感器对生物医用材料蛋白质吸附研究[J];东南大学学报(自然科学版);2001年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张健;林丹军;骆嘉;;文昌鱼人工催产简报[J];福建师范大学学报(自然科学版);1985年03期
2 方永强,齐襄,梁苹,洪桂英;厦门文昌鱼性腺发育的周年变化[J];海洋学报(中文版);1990年05期
3 蔡燕宁;;“脊索动物门”的教学[J];生物学通报;1985年11期
4 刘福源;;海岛调查在日照沿海首次发现文昌鱼[J];海洋科学进展;1987年03期
5 方永强,齐襄,梁萍,洪桂英;GnRH-A激发文昌鱼性腺发育的初步研究[J];海洋学报(中文版);1990年04期
6 郭仁强;金德祥;;中国厦门的文昌鱼[J];生物学通报;1953年12期
7 曹玉茹;海洋生物系列(四)[J];海洋世界;2005年09期
8 张崇理,殷红,沈卫斌,王红;文昌鱼促性腺素释放素(LH-RH)的纯化鉴定[J];动物学报;1988年03期
9 长流;没有头、眼、鼻、耳的鱼——文昌鱼[J];科学养鱼;1986年02期
10 宋裕昌,许梅青;青岛文昌鱼的繁殖生物学——Ⅰ.卵巢和卵母细胞发育的观察[J];海洋科学;1989年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 谭俊;许强华;;日本文昌鱼transcription factor AP-1基因的克隆和表达[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
2 江守文;许强华;郑英慧;陈良标;;日本文昌鱼雌雄差异microRNA的筛选与鉴定[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
3 王昌留;张士璀;;文昌鱼染色体C和NOR带型的研究[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
4 邵荣光;;抗感染抗体药物的研究进展[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
5 王昌留;张士璀;;文昌鱼染色体核型及G和R带型的研究[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年
6 韩俊峰;王书峰;谢谆怡;吴玉章;;microRNA在免疫系统中的作用[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
7 王勇;郎刚华;张均顺;徐永立;张培军;;文昌鱼同源框基因的研究进展[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
8 陈维;;文昌鱼SOX9基因的克隆与分析[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
9 沙诗宇;侯林;马飞;;文昌鱼不同发育阶段miRNA及靶标的比较分析[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
10 方永强;黄威权;陈蕾;张金山;;促性腺激素释放激素和GnRH mRNA在文昌鱼性腺中的定位及其表达[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 胡立彪;市场免疫机制不可或缺[N];中国质量报;2008年
2 本报记者 沈昀;免疫系统炎症性疾病存认识盲点[N];南方日报;2007年
3 古月;美发现HIV侵犯人体免疫系统的奥秘[N];中国医药报;2006年
4 肖东;增强免疫力小妙方[N];中国中医药报;2008年
5 王楠;海鲜是引起幼童过敏的“大敌”[N];卫生与生活报;2009年
6 通讯员 周晓东 何茹;“免疫系统”的白衣天使[N];西安日报;2010年
7 本报记者 王小龙;他们的研究为我们“设防”[N];科技日报;2011年
8 浙江省审计厅厅长 谢力群;提升审计素质 建设“免疫系统”[N];浙江日报;2009年
9 小新;人类免疫系统“顾此失彼”[N];中国医药报;2007年
10 贾建军;冬季应调理生活方式增强免疫力[N];中国中医药报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高媛媛;文昌鱼应激反应的蛋白质组学及creatine kinase的免疫功能研究[D];厦门大学;2007年
2 王源;肝脏特异性基因在文昌鱼中的鉴定及表达:肝脏和急相反应起源探索[D];中国海洋大学;2011年
3 王光锋;文昌鱼(Branchiostoma belcheri)体内细菌清除机制及免疫致敏作用研究[D];中国海洋大学;2008年
4 金萍;文昌鱼GNBP和LITAF基因进化、功能及免疫相关microRNA比较转录组分析[D];南京师范大学;2012年
5 滕蕾;文昌鱼Legumain基因的克隆、表达和功能研究[D];中国海洋大学;2009年
6 萨仁高娃;文昌鱼含有DUF985和Phd-like-VIAF基序的理论蛋白基因的鉴定、表达和功能分析[D];中国海洋大学;2007年
7 蒋圣娟;青岛文昌鱼TRP14和ycaCR基因的表达和功能鉴定[D];中国海洋大学;2007年
8 胡家会;文昌鱼和玫瑰无须鲃的精子运动及其在污染物急性毒性检测中的应用[D];中国海洋大学;2005年
9 林浴霜;青岛文昌鱼早期发育相关基因AmphiMdp和brp-like的研究[D];山东大学;2005年
10 邢福国;文昌鱼发育相关基因GDF8/11、ACTIVIN和NM23-Bbt2的克隆、表达及分子进化分析[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 时淑娟;雌二醇和孕酮对小鼠免疫器官淋巴细胞的调节[D];天津医科大学;2005年
2 杨建新;基于免疫遗传算法的配电网无功优化研究[D];太原理工大学;2007年
3 童晓玲;基于人工免疫算法的函数优化问题研究[D];武汉理工大学;2006年
4 陈曦;粒子群优化算法的改进及在动态交通分配问题中的应用[D];长沙理工大学;2007年
5 刘红民;基于免疫原理的入侵检测技术在三级网中应用的研究[D];重庆大学;2007年
6 秦海玉;基于免疫原理的入侵检测系统的介绍与研究[D];电子科技大学;2004年
7 高超;基于系统调用的主机安全研究[D];辽宁科技大学;2006年
8 徐磊;基于遗传算法的多目标优化问题的研究与应用[D];中南大学;2007年
9 韩兆红;中草药提取物对团头鲂生长及免疫力的影响[D];苏州大学;2008年
10 国明明;大豆肽的制备及其免疫调节作用的研究[D];江南大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026