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《厦门大学》 2007年
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抗氧化海洋真菌的筛选及3株真菌代谢产物的初步分离

阎雪芬  
【摘要】: 本论文以海洋真菌为材料进行抗氧化活性菌株的筛选及代谢产物的分离。采用化学发光法,借助于羟基自由基生成体系及过氧化氢-鲁米诺发光体系,对81株分离自深海沉积物的海洋真菌和93株红树林内生真菌进行抗氧化活性初筛。在初筛获得的活性菌株的基础上,进行抗氧化活性物质的追踪。采用常压凝胶及中压硅胶柱层析以及薄层层析技术,并结合500MHz核磁及质谱分析技术对3株菌的代谢产物进行分离、鉴定及初步的活性分析,获得了一些有益的结果。 首先开展对海洋活性菌株抗氧化活性的筛选;首次获得了化合物5-羟基-2-(羟甲基)-4H-吡喃-4-酮的晶体结构数据;共解析得到8个化合物的结构,其中3个是新化合物。 从174株真菌中共筛选到7株具较高抗氧化活性的深海真菌和1株红树林内生真菌,活性菌株占供测菌株的4.60%。在7株深海真菌中有3株对OH·和H2O2均表现出了较强的抑制作用。进一步采用化学发光法和DPPH法追踪上述3株深海真菌ZhengRr-1(114#)、WP-D-1(115#)和DY-P-3(134#)发酵产物的水溶性聚糖和有机相中的抗氧化活性物质,发现有机相表现出较好的抗氧化活性,3株菌的IC50分别是:1.92μg/mL、55.55μg/mL和11.23μg/mL(OH·);1.45μg/mL、13.79μg/mL和72.29μg/mL(H2O2);112.45μg/mL、58.87μg/mL和169.39μg/mL(DPPH);而水溶性聚糖也具有不同程度的抗氧化活性。 此外,采用化学发光法和DPPH法在对海洋细菌1202的次级代谢产物的抗氧化活性的研究表明,海洋细菌1202的三种聚糖PI、PII、PIII及石油醚相、正丁醇相和甲醇相均具有一定的抗氧化活性,其中乙酸乙酯相的抗氧化活性最强,其对DPPH、过氧化氢和羟基自由基的IC50分别为35.17μg /m L、0.05μg /mL和1.13μg /mL。 ITS分析结合形态观察鉴定了菌株114、115和SXZ-02,分别为Penicillium sp.、Aspergillus oryzae和Phomopsis sp.。从ZhengRr-1菌株分离鉴定了6个化合物6,9,10-三羟基-5,6,9-三甲基八氢化苯[8]轮烯-1,7,8(9H)三酮、4-甲氧基苯甲酸、2-(4-羟基酚)乙酸、4-羟基苯甲酸甲酯、Z-1-(2,4-二羟基-3,5-二苯甲基)己-4-烯-1-酮、(2E,4E)-1-(2,6-二羟基-3,5-二苯甲基)-己-2,4-二烯-1-酮。从115菌株分离到5-羟基-2-(羟甲基)-4H-吡喃-4-酮,并首次获得了其晶体结构数据。而从SXZ-02菌株中分离得到1个大环内酯类化合物,命名为8-O-acetyl multipolide A。 活性测定表明化合物8-O-acetyl multipolide A具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性(IC50为0.61 g/mL),同时还表现出对结核杆菌的抑制活性(MIC为25 μg/ml)。化合物(2E,4E)-1-(2,6-二羟基-3,5-二苯甲基)-己-2,4-二烯-1-酮对Hela细胞表现出较强的抑制作用,其IC50为2.64μg/mL。 本论文的工作表明,海洋微生物中含有丰富的抗氧化、抗肿瘤等活性物质,是开发抗肿瘤新药及肿瘤辅助性治疗药物的重要资源。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q93

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