收藏本站
《厦门大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大黄鱼免疫应答的功能蛋白质组学研究

余素红  
【摘要】: 大黄鱼(Pseudosciana crocea)是我国特有的经济鱼种,但随着养殖规模的扩大及养殖环境的恶化,病害问题日益严重,已成为制约大黄鱼养殖业持续稳定发展的主要因素。因此,开展大黄鱼免疫的分子基础研究,揭示其免疫反应规律及免疫的分子机制,不仅可以深化对以鱼类为代表的低等脊椎动物免疫系统的认识,也为大黄鱼病害防治提供重要的理论依据。 本文首先采用双向电泳分析了Poly(I:C)诱导不同时段大黄鱼脾脏组织差异表达的蛋白,结合PMF和MALDI-TOF-TOF质谱技术共鉴定了38个差异点,其中28个差异点表达上调,10个表达下调,且表达变化多集中于诱导后12h-24h之间。为了了解各差异点间的相互关系以及它们在抗病机制中的作用,通过应用Cytoscape软件构建了差异蛋白互作网络图,发现其中有许多差异点如PPRAγ、AnnexinⅣ、ROCK1等同时参与了免疫调节与凋亡调节,尤其是AnnexinⅣ表现出多功能的特性。为了研究大黄鱼AnnexinⅣ的功能,采用重组AnnexinⅣ注射大黄鱼,结果发现AnnexinⅣ的活体过表达能明显提高Caspase 3的酶活力,并促进脾脏细胞的凋亡。同时,它能抑制趋化因子CXC、CC的表达和上调抑炎因子IL-10的表达,表明了大黄鱼AnnexinⅣ具有促进细胞凋亡和调节炎性反应的功能。在PolyI:C诱导后12h,AnnnxinⅣ的上调可能在一定程度上促进了脾脏细胞凋亡并抑制了炎性反应,而诱导后48h,凋亡抑制因子PRDX I、AIP的表达上调则有利于凋亡的抑制,从而调节PolyI:C诱导的免疫反应及维持免疫平衡。 通过比较对照组和三联疫苗注射组的双向电泳图谱,找到了24个差异点,其中21个表达上调,3个表达下调。质谱分析鉴定发现其中有许多与免疫应答及炎症调节相关,尤其抗氧化蛋白酶家族成员如PRDXⅠ、PRDXⅡ、PRDXⅣ在三联疫苗诱导前后表达量都发生了改变,提示该家族可能在三联疫苗诱导免疫反应中发挥重要的作用。研究表明,人PRDXⅣ能通过调节IκB的磷酸化来激活核因子NF-κB,但对其功能尚不清楚。为此,本文对大黄鱼PRDXⅣ的分子特征及功能进行了研究:体外实验表明重组的大黄鱼PRDXⅣ具有明显的抗氧化活性;免疫电镜分析发现PRDXⅣ主要分布于脾脏细胞内质网和过氧化物酶体中,并且三联疫苗的免疫刺激促进了PRDXⅣ在内质网上的合成;针对PRDXⅣ的siRNA干扰可上调脾组织TNF-α2、CC趋化因子的表达水平,下调抑炎因子IL-10的表达,同时核因子NF-κB(p65)的表达水平也明显上升;PRDXⅣ的过表达则抑制了TNF-α2、CC趋化因子的表达,上调了IL-10的表达,核因子NF-κB(p65)的表达也受到明显的抑制,说明了大黄鱼PRDXⅣ具有抑制炎性反应的功能。以三种混合活菌感染大黄鱼,发现干扰组脾脏组织TNF-α2、CC及NF-κB(p65)的表达上调更加显著,抑炎因子IL-10的表达明显低于对照组,同时干扰组大黄鱼的死亡率(94%)明显高于过表达组(42%)和对照组(72%、78%),这些结果表明了大黄鱼PRDXⅣ可能通过抑制NF-κB表达发挥其抗炎作用,从而保护大黄鱼抵抗细菌的感染。本文研究结果揭示了一条鱼类抗细菌感染的新途径。 此外,还分析了差异表达蛋白NCCRP-1和β_2-microglobulin mRNA的组织分布及不同诱导条件下的表达调控方式,这些将有助于对大黄鱼免疫反应规律的全面认识。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S917.4

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 钱云霞,王国良,邵健忠;海水养殖鱼类细菌性疾病研究概况[J];海洋湖沼通报;2001年02期
2 鄢庆枇,王军,苏永全,皮灵宝,刘成荣;大黄鱼病原菌──溶藻弧菌的ELISA快速检测研究[J];海洋科学;2001年09期
3 林克冰,周宸,刘家富,周胜利,曾志南,陈木;海水网箱养殖大黄鱼病原菌研究[J];海洋科学;1999年04期
4 黄琪琰;中国水产动物疾病学研究进展[J];水产学报;1996年01期
5 潘连德,陈辉;药物防治的临床药理学与水产药物学问题[J];水产科技情报;1998年04期
6 林克冰,周宸,刘家富,周胜利,何丽斌,曾志南,陈木;海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的病原菌[J];台湾海峡;1999年03期
7 何贤辉,徐丽慧,刘毅,曾耀英;人β_2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达[J];生物工程学报;2004年01期
8 张彩兰,刘家富,李雅璀,陈植;福建省大黄鱼养殖现状分析与对策[J];上海水产大学学报;2002年01期
9 张宏一;蛋白质组学研究技术及其进展[J];生物技术通报;2005年04期
10 张永安,孙宝剑,聂品;鱼类免疫组织和细胞的研究概况[J];水生生物学报;2000年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 舒妙安,马有智;黄鳝烂尾病病原的研究[J];中国兽医学报;2000年05期
2 黄啸;;生物信息学在蛋白质组学上的应用[J];安徽农业科学;2006年23期
3 毛芝娟,刘国勇,陈昌福;大黄鱼溃疡病致病菌的初步分离与鉴定[J];安徽农业大学学报;2002年02期
4 郭琼林;中华鳖胸腺显微和亚显微结构及其在进化上的意义[J];动物学报;1999年02期
5 郭琼林,贾伟章;中华鳖造血和免疫器官的个体发育[J];动物学报;2003年02期
6 吴金英,林浩然;斜带石斑鱼淋巴器官个体发育的组织学[J];动物学报;2003年06期
7 田敬云,谢海侠,姚卫建,聂品;鳜鱼头肾的组织发生及成鱼头肾B淋巴细胞的分布[J];动物学报;2005年03期
8 许瑞吉,王国洪,张中书,施益群,赵技文;儿童肾脏病患者血清白介素-2、白介素-6和胰岛素样生长因子-Ⅱ检测及其临床意义[J];标记免疫分析与临床;2003年04期
9 陈光荣,肖克宇,邓时铭;鱼用疫苗基因工程技术及其商品化初探[J];北京水产;2003年03期
10 孙琳;吴秀丽;王燕媚;于永利;王丽颖;;重组鼠源性肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达[J];吉林大学学报(医学版);2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 KAN Guangfeng MIAO jinlai DING Yu LI Guangyou Marine life college, Ocean University of China, Qingdao 266003, China Key laboratory of marine bio - active substances, SOA. , Qingdao 266061, China;Foundation of protein preparation method and 2-DE analyses of anti-radiation proteins in Antarctic ice microalga Chlamydomonas sp.[A];中国海洋学会海洋生物工程2005年学术年会论文集[C];2005年
2 阚光锋;史翠娟;丁燏;;双向电泳技术在海洋藻类研究中的应用[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
3 唐海蓉;银梅;陈仕均;;鱼类免疫组织和细胞的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
4 刘光亮;童铁钢;孟庆文;吴东来;;鸡β2微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与纯化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
5 肖一红;刘光亮;童铁钢;王群;孟庆文;吴东来;;猪β2-微球蛋白基因在大肠埃希氏菌中的表达与纯化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 范有明;低压缺氧晚期预适应对小鼠海马保护作用及其机制研究[D];第三军医大学;2003年
2 谢海侠;柱状黄杆菌毒力相关因子的研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2005年
3 付建芳;溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗的研究[D];第四军医大学;2005年
4 张振冬;鳗弧菌及其致病因子的检测及减毒突变株和灭活疫苗的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
5 陈伟;荔枝(Litchi chinensis Sonn.)胚胎发育的生理生化基础[D];福建农林大学;2000年
6 黄耀江;IL-6相关新基因的克隆鉴定、表达纯化及结构功能预测[D];大连理工大学;2001年
7 颜宏利;一个新的膜联蛋白亚家族—AnxB1的鉴定及其抗凝血功能的研究[D];第二军医大学;2002年
8 刘云;牙鲆免疫系统形态结构、发育和感染病理反应的研究[D];中国海洋大学;2003年
9 张玲;牙鲆(Paralichthys olivaceus)免疫促进机理初探[D];中国海洋大学;2003年
10 陈师勇;鳗弧菌主要致病因子的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 习彩霞;草鱼血清对嗜水气单胞菌天然抗性成分的研究[D];南京农业大学;2000年
2 陈开健;重组人-α干扰素基因(Hu-IFN-α)在草鱼体内的整合与表达[D];湖南农业大学;2003年
3 赵平;大鼠急性胰腺炎动物模型的建立和相关性肺损伤发生机制的初步研究[D];第三军医大学;2001年
4 谢凤;丰产鲫败血症病原菌豚鼠气单胞菌CSS-4-2的快速检测和免疫效果研究[D];华南师范大学;2002年
5 庞启华;丰产鲫豚鼠气单胞菌败血症的病理学研究[D];华南师范大学;2002年
6 岳兴建;南方鲇头肾和肾的结构与发育研究[D];西南师范大学;2002年
7 黄素文;七种常见养殖鱼α_2巨球蛋白的比较[D];南京农业大学;2002年
8 朱叶飞;小鼠精子发生相关蛋白质的初步分析[D];南京医科大学;2003年
9 杨敬辉;BARODON对中华鳖免疫功能的影响[D];河北农业大学;2003年
10 齐继光;六种水产养殖动物病原菌免疫原性的比较研究[D];中国海洋大学;2002年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 何爱华,林奕坚,郭永建,郑永和,林大鹏;大黄鱼幼鱼虹彩病毒感染的电镜研究[J];福建水产;1999年03期
2 郭闯,王永坤;嗜水气单胞菌研究进展[J];水产科学;2003年06期
3 杨方,严宏;糖尿病性白内障发病机制和药物治疗[J];第四军医大学学报;2004年18期
4 向建国,周进,金宏;斑点叉尾鮰的生物学与生理生化特性研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2004年04期
5 虞鹏程,廖东江,简少卿;虎纹蛙蝌蚪与幼蛙肌肉蛋白质的双向电泳图谱对比分析[J];江西科学;2005年02期
6 谭玉凤;张迎梅;王丙莲;龙静;黄德军;刘江海;;亚硒酸钠染毒对小鼠免疫功能的影响[J];环境与职业医学;2006年01期
7 唐玫,马广智,徐军;鱼类免疫学研究进展[J];免疫学杂志;2002年S1期
8 黄琪琰;中国水产动物疾病学研究进展[J];水产学报;1996年01期
9 赵桐茂;T细胞受体多样性及其生物学意义[J];上海免疫学杂志;1997年01期
10 赵锐,纪建国,郝守进,陈倩,袁洪生,管华诗,茹炳根;正常与重金属铅注射的兔脑蛋白质双向电泳图谱比较与鉴定[J];生物化学与生物物理进展;2001年06期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 吴文林;对虾Rab GTPase在抗病毒免疫中的作用以及对虾白斑综合症病毒(WSSV)膜蛋白与对虾蛋白的互作研究[D];厦门大学;2006年
2 高媛媛;文昌鱼应激反应的蛋白质组学及creatine kinase的免疫功能研究[D];厦门大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 韩芳;对虾白斑综合症病毒(WSSV)wsv477基因的功能、IRES鉴定以及对虾RanGTPase在抗病毒免疫中的作用[D];国家海洋局第三海洋研究所;2006年
2 廖东江;棘胸蛙蝌蚪与幼蛙肝脏蛋白质组初步研究[D];南昌大学;2005年
3 熊国勇;棘胸蛙蝌蚪与幼蛙肌肉蛋白质组初步研究[D];南昌大学;2006年
4 刘民;亚硒酸盐对泥鳅毒性作用的研究[D];山东师范大学;2007年
5 谢芳靖;大黄鱼抗病功能基因的克隆与分析[D];集美大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈燕燊;草鱼出血病病原的研究[J];水生生物学报;1978年03期
2 王炜,陈延,柯丽华,蔡宜权;草鱼出血病病毒武汉南湖株的精细结构与基因组及多肽的研究[J];病毒学报;1990年01期
3 邵健忠,项黎新,李亚南,毛树坚;从草鱼细胞分离到一种抗出血病病毒蛋白因子的研究[J];病毒学报;1993年04期
4 王耕南;沪宁一带四种鲺以及中华鲺生活史的初步研究[J];动物学报;1958年03期
5 万志远;对池塘魚苗气泡病的初步研究[J];动物学杂志;1960年07期
6 米瑞芙;陶炳春;王晓梅;谢宝华;;鲢鱼败血症血液生理指标的变化[J];淡水渔业;1993年04期
7 贺维顺,王蕊芳;蝌蚪(Bufo bufo andrewsi)血红细胞微核和核异常监测水质污染的研究[J];动物学研究;1990年01期
8 林来春,朱联生,谢跃生;八尺门网箱养鱼常见病害的防治试验[J];福建水产;1994年01期
9 罗毅志,杨广智,叶雪平;草鱼出血病病毒株的筛选[J];海洋与湖沼;1993年05期
10 王铁辉,李军,易咏兰,周立冉,刘汉勤,陆仁后,陈宏溪;用逆转录聚合酶链式反应检测草鱼出血病病毒的研究[J];海洋与湖沼;1997年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王潇;杜瑞平;;基因组学和蛋白质组学及其在营养学中的应用[J];畜牧与饲料科学;2009年02期
2 陈伟;游向荣;龙强;李燕;;蛋白质组学研究方法与技术[J];福建果树;2006年04期
3 董婧;应奇才;王慧中;;石斛叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化[J];浙江农业学报;2009年03期
4 薛大伟;钱前;王慧中;;蛋白质组学在水稻逆境胁迫研究中的应用[J];中国稻米;2009年05期
5 赵大伟;范海延;武春飞;杨凯;;植物响应病原菌胁迫的蛋白质组学研究进展[J];广西植物;2009年06期
6 范海延;李楠;苗青;郭海;;植物应答生物胁迫的蛋白质组学研究进展[J];湖北农业科学;2009年12期
7 郑诚乐;钟凤林;潘东明;刘小芝;;锥栗果实双向电泳体系的建立[J];福建农林大学学报(自然科学版);2010年05期
8 王金辉;李轶女;刘惠芬;张志芳;沈桂芳;;叶绿体蛋白质组学研究进展[J];生物技术通报;2011年02期
9 丁承强;马丹;王绍华;丁艳锋;;水稻蛋白质组双向电泳优化流程及方法[J];植物学报;2011年01期
10 邱宁;马美湖;;鸡蛋蛋白质组学研究现状与展望[J];中国家禽;2011年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈华;唐福林;姚志建;;运用蛋白质组学技术对Sa抗原的研究[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
2 张养军;应万涛;刘科辉;蔡耘;朱云平;贺福初;钱小红;;用于蛋白质组学技术评价的标准蛋白质试验设计与样本制备[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年
3 何春涤;朱红;周海涛;陈洪铎;;蛋白质组学主要技术及其在皮肤科学研究中的应用——HaCaT细胞和人皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1细胞蛋白质组的差异蛋白的研究[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
4 张雷;王珺;林标扬;严世贵;杨国敬;;成人非创伤性股骨头缺血性坏死的高通量蛋白质组学研究[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年
5 李学任;魏路清;;蛋白质组学技术在肺部疾病应用及进展[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年
6 吴志勇;;自由流电泳(FFE)及其在蛋白质组学研究中的应用(综述)[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(下册)[C];2006年
7 ;美国应用生物系统公司与北京蛋白质组研究中心蛋白质组合作实验室成立[A];第三届科学仪器前沿技术及应用学术研讨会论文集(三)[C];2006年
8 汪世华;胡开辉;;蛋白质组学的应用与发展趋势[A];福建省科协第五届学术年会提高海峡西岸经济区农业综合生产能力分会场论文集[C];2005年
9 陈彧;崔亚洲;宗美娟;韩金祥;;胰腺癌标志物的蛋白质组学研究[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
10 顾国浩;蒋敏;;肿瘤蛋白质组学的研究方法学比较[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 吴月辉;蛋白质组学在美逐步形成市场[N];新华每日电讯;2001年
2 ;抓紧蛋白质组学的研究[N];中国医药报;2002年
3 黎明;科学新宠——蛋白质组学[N];医药经济报;2001年
4 前线;蛋白质组学产业正逐渐形成[N];中国经营报;2001年
5 麦国荣;蛋白质组学[N];中国医药报;2001年
6 王雪飞 吴志军;首建人类器官蛋白质组“蓝图”[N];健康报;2006年
7 特约记者 郝成涛 记者 于春光;为肿瘤疾病的防治研究开辟新途径[N];解放军报;2009年
8 本报特约记者 吴志军 郝成涛;为科学攀登搭建精神高地[N];解放军报;2010年
9 阳光;中科院大连化物所为蛋白质组学研究提供新方法[N];中国医药报;2007年
10 潘文;提高基础及应用研究水平[N];中国医药报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 余素红;大黄鱼免疫应答的功能蛋白质组学研究[D];厦门大学;2008年
2 刘小丽;重型肝炎血清的蛋白质指纹图谱研究[D];浙江大学;2005年
3 刘军莲;高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候的蛋白质组学研究[D];中国中医科学院;2006年
4 张波;脑梗死后自体神经干细胞原位激活及其蛋白质组学的实验研究[D];中国协和医科大学;2005年
5 缪勇;蛋白质组学技术在细胞生物学研究中的应用[D];中国科学技术大学;2006年
6 丁力;喜树碱诱导SMMC-7721肝癌细胞的蛋白质组学研究[D];第二军医大学;2008年
7 李强;白癜风相关黑素细胞膜抗原的分析及鉴定[D];第四军医大学;2005年
8 冯钜涛;蛋白质组学技术筛选肝癌血清标记物[D];复旦大学;2005年
9 卢玲;脑和冠状微血管内皮细胞基因与蛋白表达的差异及decorin在脑缺血再灌注损伤中的作用研究[D];第二军医大学;2006年
10 宫萍;6-OHDA诱导大鼠帕金森病模型的差异蛋白质组学研究[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高照;大鼠缺血再灌注心肌蛋白的蛋白质组学二维凝胶电泳分析及卡维地洛的干预作用[D];重庆医科大学;2005年
2 柳晓东;蛋白质组学在结直肠癌早期诊断中的研究与应用[D];青岛大学;2005年
3 李征宇;顺铂作用卵巢癌细胞的蛋白质组学研究[D];四川大学;2004年
4 韩娟;SELDI技术检测子宫内膜癌患者血清差异蛋白的表达及临床意义[D];青岛大学;2006年
5 刘海霞;检测卵巢癌患者血清中差异表达蛋白的研究[D];青岛大学;2006年
6 张妍;HCMV致婴儿肝炎综合征的血清蛋白标志物研究[D];青岛大学;2006年
7 郑小莉;ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化死亡的蛋白质组学研究[D];泸州医学院;2006年
8 庞小刚;氧化胁迫下拟南芥根的蛋白质组学研究[D];山东师范大学;2006年
9 庞盼姣;2型猪链球菌强毒株与无毒株比较蛋白质组学研究[D];吉林大学;2007年
10 何伟伟;SELDI筛选的肺腺癌血清标志蛋白和传统肿瘤标志物的比较研究[D];上海交通大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026