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《华侨大学》 2008年
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2-巯基嘧啶修饰的磁性聚合物微球特异性分离免疫球蛋白

蒋国华  
【摘要】: 免疫球蛋白是人体内含量最大的抗体,有着调节细胞因子、激活淋巴细胞活性等作用,在食品加工、临床治疗等领域都有着广泛的应用。目前,对免疫球蛋白的纯化可以通过盐析沉淀技术、色谱技术、膜分离技术、电泳技术等来进行,但这些方法普遍存在着设备复杂,分离效率较低,生物活性易受损失的缺点,导致不易批量化分离,纯化成本偏高,制约了免疫球蛋白的普及和使用。而磁性高分子微球由于其比表面积大、具有磁响应性等特点,成为了一种高效的蛋白分离技术。本课题就是利用在磁性高分子微球上接枝嗜硫基团,实现对人血清中的免疫球蛋白的纯化。探索了一条高效、高纯度分离免疫球蛋白的方法。本实验的研究结果如下: 1.利用化学共沉淀法成功合成了具有顺磁性的Fe3O4磁粒子,并用油酸进行改性,实现磁粒子由亲水性向亲油性的转变,进而将其均匀分散在环己烷中,制成了磁流体,为进一步制备磁球奠定基础。 2.利用细乳液法成功合成了苯乙烯-二乙烯基苯-醋酸乙烯酯三元共聚以及二乙烯基苯-醋酸乙烯酯二元共聚两个体系的磁球,进而通过Michael加成反应在磁球上成功接枝了二乙烯基砜嗜硫基团和2-巯基嘧啶配基。并通过TEM、FTIR、元素分析等表征方式对两个体系的磁球进行了表征和比较,最终确定了以苯乙烯-二乙烯基苯-醋酸乙烯酯三元共聚磁球作为进一步分离免疫球蛋白的基础。 3.利用所合成的嗜硫性磁性高分子微球成功的从人血清中分离出了免疫球蛋白。通过SDS-PAGE、Native-PAGE、HPSEC等手段进行分析,表明分离所得到的免疫球蛋白具有较高的纯度。 4.探讨了在不同的离子种类和浓度、pH值、吸附和解吸附时间、磁球与血清的比例以及解吸附温度条件下,磁球对人血清中免疫球蛋白的分离情况。优化了磁球分离人血清免疫球蛋白的条件:在合适的磁球/血清比例,低pH环境下对免疫球蛋白进行吸附。在30℃时,以高pH、高Cl-浓度的缓冲溶液对其进行解吸附,实现对血清中的免疫球蛋白更高效的分离。
【学位授予单位】:华侨大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:TQ464.7

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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