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《福州大学》 2006年
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新型生物大分子荧光探针的合成及应用研究

吕爱星  
【摘要】: DNA是生物体主要的遗传物质,蛋白质具有重要的生理功能,有关它们的研究是揭示生物奥秘的基础。由于蛋白质和核酸的分子量巨大、结构复杂,人们常采用荧光探针对其进行研究。于是,本论文将重点放在了寻求某些能够对生物样品中DNA和蛋白质含量进行测定的荧光探针,希望在此基础上找到一种好的荧光探针用于对它们的更深层次的研究。 围绕这一目的,本论文主要进行了以下三方面的研究工作:一、自行合成出一种苯并菲罗啉酮衍生物:2-甲基-12H-苯并-1,10-菲罗啉-7-酮(m-BPO)。对其合成条件进行了探索,对产物进行了一系列红外、紫外、元素分析等表征。在PH7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,发现ctDNA对m-BPO有明显的猝灭作用,在1.5~15.0μg/mL范围内,ctDNA的浓度与探针荧光猝灭程度成正比,绘制了该荧光探针定量测定ctDNA的工作曲线据此建立了一种检测DNA的新方法。在此基础上进行了干扰离子实验,并对ctDNA与m-BPO的相互作用方式进行了初步探讨。 二、研究了m-BPO荧光探针与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用,在1.0mmol/LPH7.4的Tris-HCl缓冲溶液中发现牛血清白蛋白对m-BPO的荧光有很强的猝灭作用。在0.05mg/L~0.3mg/L浓度范围内,随着BSA的加入,m-BPO的荧光猝灭强度与BSA的浓度内有良好的线性关,由此建立了用一种测定蛋白质的新方法。三、利用本课题组自行合成了一种镍菲罗啉 Ni(Phen)2PHPIP·(ClO4)2(PHPIP=对羟基苯基咪唑并[f]邻菲罗啉)配合物,在pH=6.0的磷酸盐缓冲溶液中,分别加入一定浓度的去羟肌苷和奈韦拉平,以荧光强度猝灭值ΔF对去羟肌苷和奈韦拉平的浓度拟合工作曲线,均有着良好的线性关系。据此建立了检测这两种抗艾滋病药物的新方法。去羟肌苷的线性范围为3.0×10-7mol/L~8.0×10-5mol/L,检测限为1.0×10-7mol/L,相关系数为0.9951,标准偏差为1.68(n=5);测定奈韦拉平的线性范围为5.0×10-7mol/L~6.0×10-5mol/L,检测限为1.0×10-7mol/L,相关系数为0.9946,标准偏差为2.57(n=5)。用于实际样品的回收率实验,回收率为102%(n=5),效果良好。
【学位授予单位】:福州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q503

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