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《福建农林大学》 2011年
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金线莲多糖对小鼠免疫调节作用的研究

许丹妮  
【摘要】:多糖是金线莲重要的有效成分之一,含量丰富,药理活性广泛。目前对金线莲多糖提取方法和免疫增强作用的研究已取得一定进展,但是相关机理研究尚鲜见报道。本研究以福建道地药材金线莲为试验材料,对其进行超微粉碎并过300目筛;用水提醇沉法联合超声波法提取金线莲超微粉多糖,通过单因素试验,确定多糖的最佳提取条件,并对多糖进行初步纯化,用苯酚-硫酸法测定多糖的含量。将不同剂量金线莲多糖给予环磷酰胺致免疫抑制小鼠和健康小鼠,通过测定小鼠免疫器官、免疫细胞、免疫因子等指标考察金线莲多糖对免疫抑制小鼠和健康小鼠的免疫调节作用。 试验结果如下: 1.单因素提取试验结果表明,金线莲多糖合适的提取条件为超声频率80KHz、料液比1:30、温度70℃、时间1h、提取次数2次,以此作为本研究金线莲多糖的提取条件。结果金线莲多糖的平均得率为7.14%。苯酚-硫酸法测得金线莲多糖总含量为87.62%。 2.金线莲多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用 2.1金线莲多糖对免疫抑制小鼠免疫器官的影响金线莲多糖能促进免疫抑制小鼠体重的增长;三个剂量组脾指数和胸腺指数显著高于CY模型组(P0.05),其中小剂量组和大剂量组脾重显著高于CY模型组(P0.05),大剂量组胸腺重显著高于CY模型组(P0.05)。说明金线莲多糖具有促进免疫抑制小鼠免疫器官生长的作用。 2.2金线莲多糖对免疫抑制小鼠免疫细胞的影响 碳廓清试验结果表明金线莲多糖小剂量组和中剂量组吞噬指数显著高于CY模型组(P0.05),说明这两个剂量组能促进免疫抑制小鼠的吞噬功能;MTT法测定小鼠脾淋巴细胞增殖的试验结果显示,金线莲多糖三个剂量组OD值显著高于CY模型组(P0.05),说明金线莲多糖具有促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。 2.3金线莲多糖对免疫抑制小鼠免疫因子的影响 用ELISA试剂盒检测细胞因子含量的结果表明,金线莲多糖三个剂量组TNF-α、IFN-γ含量高于CY模型组且差异极显著(P0.01),中剂量组和大剂量组IL-6含量显著高于CY模型组(P0.05)。说明金线莲多糖中剂量和大剂量能促进免疫抑制小鼠细胞因子的分泌,提高其含量。用比浊法测定免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量和补体C3、C4含量结果表明,金线莲多糖大剂量组IgA含量显著高于CY模型组(P0.05);中剂量组和大剂量组IgM含量显著高于CY模型组(P0.05);中剂量组IgG含量显著高于CY模型组(P0.05)。中剂量组和大剂量组C3含量显著高于CY模型组(P0.05);小剂量组和中剂量组C4含量显著高于CY模型组(P0.05)。说明金线莲多糖对免疫抑制小鼠免疫因子的分泌具有促进作用。 3.金线莲多糖对健康小鼠的免疫调节作用 3.1金线莲多糖对健康小鼠免疫器官的影响 金线莲多糖三个剂量组都能促进健康小鼠体重增长,三个剂量组脾重显著高于空白组(P0.05),小剂量组和大剂量组胸腺重显著高于空白组(P0.05);大剂量组脾指数显著高于空白组(P0.05),中剂量组和大剂量组胸腺指数显著高于空白组(P0.05)。说明金线莲多糖具有促进健康小鼠免疫器官增重和免疫器官指数提高的作用。 3.2金线莲多糖对健康小鼠免疫细胞的影响 碳廓清试验结果表明金线莲多糖中剂量组和大剂量组吞噬指数显著高于空白组(P0.05),说明这两个剂量组能促进健康小鼠巨噬细胞的吞噬功能;MTT法测定脾淋巴细胞增殖的试验结果显示,金线莲多糖三个剂量组OD值与空白组比较无显著差异,说明金线莲多糖对健康小鼠脾淋巴细胞增殖影响不显著。 3.3金线莲多糖对健康小鼠免疫因子的影响 用ELISA试剂盒检测健康小鼠血清细胞因子含量的结果表明,金线莲多糖三个剂量组对IL-6含量的影响不显著,中剂量组和大剂量组TNF-α含量、IFN-γ含量显著高于空白组(P0.05);用比浊法测定健康小鼠血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量和补体C3、C4含量结果表明金线莲多糖三个剂量组IgA、IgM含量与空白组比较无显著差异,大剂量组IgG含量显著高于空白组(P0.05);大剂量组C3含量显著高于空白组(P0.01),中剂量组C4含量显著高于空白组(P0.05)。说明金线莲多糖对健康小鼠部分免疫因子的分泌具有促进作用。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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