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辣椒CaWRKY40和CaWRKY3的互作蛋白的分离及初步鉴定

李霞  
【摘要】:辣椒(Capsicum annuum L.)是一种重要的经济作物,在我国占蔬菜种植面积的第二位,世界范围内也广泛种植。但是在栽培生产中辣椒的产量和品质受到各种生物和非生物逆境的胁迫,造成了严重的影响和经济损失。培育和改良抗逆新品种是解决辣椒病害问题有效途径,而这依赖于辣椒抗逆分子机制的阐明。近年来研究表明,植物体存在多重途径来调节植物的抗逆反应,其中水杨酸介导的系统获得性抗性SAR是研究中的热点,也是辣椒抗逆反应的关键途径。植物抗逆反应的进行需要抗逆基因的表达,而调节抗逆基因表达的转录因子则起到重要的调控作用。本研究以水杨酸抗逆途径中CaWRKY40和CaWRKY3转录因子为起始研究对象,运用先进的酵母双杂交技术筛选并鉴定其互作蛋白,以期探究WRKY转录因子在辣椒抗病反应中的信号通路,为植物的抗逆育种奠定基础。本实验取得的主要研究结果如下: 1.运用SMART和DSN均一化技术构建了水杨酸(SA)处理下的辣椒酵母双杂交全长均一化cDNA文库。该文库滴度达到1.45×10~6,插入片段平均长度1.5-3kb之间,均一化效果良好,符合酵母双杂交的建库要求。 2.运用DUALhunter系统筛选到CaWRKY40和CaWRKY3有效互作蛋白共27个,其中CaWRKY40互作蛋白2个,CaWRKY3互作蛋白25个。CaWRKY40的互作蛋白分别为囊泡相关膜蛋白(vesicle-associated membrane protein, VAMP)和类囊体ADP/ATP载体蛋白(thylakoid ADP/ATPcarrier protein),暂命名为CaVAMP和CaACP,对照拟南芥中VAMP类蛋白的研究,推测CaVAMP很可能参与抗病反应。CaWRKY3的互作蛋白主要分为五类,与叶绿体有关的蛋白、酶类、特定区域包含蛋白、有特殊结构域的蛋白及未命名的推定蛋白,经过比对分析表明大多数互作蛋白均与抗病和低磷胁迫的调控有关,这与CaWRKY3的功能吻合性很高。 综上所述,本研究构建了一个外源SA处理的辣椒酵母双杂交均一化文库,以CaWRKY40和CaWRKY3为诱饵,从中筛选到27个阳性克隆,初步鉴定表明,这些阳性克隆可能以各种方式参与了辣椒响应不同逆境反应的过程。分离鉴定这些阳性克隆为辣椒抗逆信号网络的全面构建和分析奠定了坚实的基础。


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14 吕家龙;辣椒的分类系统品种和杂优利用(上)[J];长江蔬菜;1991年05期
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