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茶树菇多酚提取及其功能学特性的研究

包辰  
【摘要】:茶树菇(Agrocybe aegerita)属担子菌亚门、担子纲、蘑菇菌目、粪锈伞科、田头菇属植物,为福建省特色农产品之一,具有丰富的营养及药用功效。本研究以福建古田县产茶树菇为原料提取多酚,研究溶剂法提取茶树菇多酚的工艺、响应面法优化超临界CO_2流体法萃取茶树菇多酚的工艺、茶树菇多酚的分离纯化、抗氧化活性以及对果蝇寿命的影响,研究成果拓展了茶树菇的深加工途径,为茶树菇功能学领域的研究提供理论依据。 研究溶剂法提取茶树菇多酚的最佳工艺。研究了不同提取温度、乙醇浓度、提取时间、料液比等因素对提取效果的影响,并对提取工艺进行了优化。溶剂法提取茶树菇多酚的最佳工艺参数为:料液比为1:30,乙醇浓度为50%,在80℃的水浴中浸提3小时后,茶树菇多酚提取率达14.96%。研究了超声波辅助溶剂法提取茶树菇多酚的工艺,考察了超声功率、超声频率、超声时间、浸提次数等因素对茶树菇多酚提取效果的影响,并对超声波辅助提取工艺进行优化。超声波辅助溶剂法提取茶树菇多酚的最佳工艺参数为:在超声功率240W、频率80Hz的超声波清洗机中提取2次,每次80min,所得茶树菇多酚提取率为16.82%。超声波辅助提取法较溶剂提取法显著缩短了提取时间,提高了提取率。 研究超临界CO_2流体法萃取茶树菇多酚的最佳工艺,考察了萃取时间、萃取压力、萃取温度及CO_2流量、夹带剂用量等因素对茶树菇多酚萃取率的影响。通过响应面法优化茶树菇多酚萃取的工艺参数并建立回归方程。超临界CO_2流体法萃取茶树菇多酚的最佳工艺条件为:萃取温度为48.49℃,萃取压力为30.62Mpa,萃取时间为131.25min,CO_2流量为14L/h,夹带剂用量为90mL,茶树菇多酚萃取率为17.64%。 通过静态吸附与解吸试验,对茶树菇多酚粗提液进行分离纯化,从5种大孔吸附树脂中筛选出HPD-600树脂作为纯化茶树菇多酚的大孔吸附树脂。分别考察茶树菇多酚pH、茶树菇多酚浓度、多酚上样量、上样速率对大孔吸附树脂吸附效果的影响,以及乙醇浓度和洗脱速度对解吸效果的影响。茶树菇多酚的最佳吸附条件为:上样液pH4.0,上样液浓度3.0,上样量5BV,上样速率3BV/h,茶树菇多酚的最佳洗脱条件为:乙醇浓度60%,洗脱速度5BV/h。经分离纯化后的茶树菇多酚样品中多酚含量为73.6%。 以VC和茶多酚作为对照,研究了茶树菇多酚总抗氧化能力、清除羟自由基能力、抑制超氧阴离子自由基能力和清除DPPH·自由基能力。结果显示:茶树菇多酚对·OH自由基和·O-2自由基具有一定的清除能力,有一定的总抗氧化能力;在试验浓度范围内,茶树菇粗多酚对·OH自由基清除能力与茶多酚相当,对·O-2自由基清除能力以及总抗氧化能力比VC强。 采用野生型黑腹果蝇作为模式动物,研究茶树菇多酚对果蝇寿命的影响,培养基中分别加入0.25mg/mL、1mg/mL、4mg/mL三种不同浓度的茶树菇多酚,观察果蝇在其中的生存情况。结果表明,茶树菇多酚各剂量组雌雄果蝇的半数死亡时间、平均寿命、最高平均寿命均高于对照组,中剂量组雌雄果蝇的半数死亡时间与对照组差异最大,平均寿命、最高平均寿命指标与对照组的差异均达极显著水平。各剂量组雌雄果蝇的寿命均有不同程度的延长,中剂量多酚浓度组对雌雄果蝇寿命的延长率高于低、高剂量组。雌性果蝇对茶树菇多酚的反应比雄性果蝇敏感。


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