收藏本站
《福建农林大学》 2015年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

水分胁迫对黄曲霉生长和产毒影响的初步研究

郭珍妮  
【摘要】:黄曲霉(Aspergillus flavus)是致癌性黄曲霉毒素(Aflatoxins,AF)最主要的生产者,其生长发育和产毒受到许多环境因素的影响,其中水分活度是最主要的因素之一。本研究首先通过在培养基中添加甘油模拟0.99,0.95,0.93,0.90四种不同的水活度环境对黄曲霉进行培养,对其生长和产毒情况进行观察和测定。结果发现:随着水活度的降低,黄曲霉的生长、产毒、产孢都发生了明显的下降。由于0.99a_w和0.93a_w两个条件下黄曲霉的生长、产毒、产孢差异显著,因此将这两个水活度下的黄曲霉菌进行RNA-seq以了解黄曲霉在不同水活度下的基因表达谱,测序得到了 23,320个非冗余Unigenes,平均长度在1297 bp。与数据库比对后,有19,838个Unigenes很好地匹配到已知的基因序列上,另外与目前已注释的黄曲霉基因组相比,还存在6767个新的Unigenes。基于RPKM计算,鉴定到0.99a_w和0.93a_w之间差异表达的Unigenes有5362个,其中3156个Unigenes发生上调,2206个Unigenes发生下调。这表明黄曲霉表达水平在水分胁迫下发生了广泛的变化。此外测序结果显示有16个黄曲霉毒素合成相关的基因随着水活度的降低而降低,并且有11个生长发育相关的基因在0.99a_w下表达发生上调。以上数据进一步证实了水分通过影响黄曲霉毒素合成基因和生长发育基因的表达来分别对黄曲霉毒素的合成和生长进行调控。与此同时,0.99a_w和0.93a_w两个条件下的黄曲霉菌利用相对和绝对定量同位素标记(isobaric tagging for relative and absolute quantitation(iTRAQ))技术研究蛋白质组变化。结果总共鉴定到3566个蛋白质,其中有837个蛋白在不同水活度下表达差异。这837个蛋白中有403个蛋白在0.99a_w下表达上调,另外434个蛋白在0.93a_w下表达上调。根据GO分析,胞外水解酶的分泌随着水活度的上调而上升,这表明胞外水解酶可能在诱导黄曲霉毒素合成中起到重要的作用。基于COG和KEGG的分类,我们鉴定到一种输出蛋白KapK可能通过改变NirA的定位下调黄曲霉毒素的合成。分析高渗胁迫相关的Hog通路时我们发现两个蛋白Slnl及Glol在0.99a_w下表达上调,这可能是0.99a_w下黄曲霉菌生长更好的原因之一。黄曲霉毒素合成相关蛋白的表达模式与其在0.99a_w中产毒更多的表型一致。真菌的 MAPK(mitogen-activated protein kinases)级联系统是长期进化而来的调控机制,用于细胞感受和应对外界环境刺激。MAPK中的Hog(High osmolarity glycerol)通路以适应高渗胁迫为人们熟知。因为水活度降低也被视为一种高渗胁迫,因此本实验最后对Hog通路中的核心基因afsakA进行了基因敲除。结果发现,δafsakA突变体在NaCl和山梨醇处理的高渗胁迫时表现出了明显的生长减缓,并且在0.99a_w与0.93a_w下也表现出了强烈的生长抑制。此外δafsakA的产毒和产孢与野生型相比也都发生了明显的下降。因此我们认为黄曲霉中的Hog通路同其他真菌中一样,也担任着高渗响应的功能并与黄曲霉毒素的合成关系密切。本研究为进一步研究黄曲霉的高渗响应机制和黄曲霉毒素产生机制作了很好的铺垫。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:Q935

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 肖传英;冯广鹏;魏金涛;郑金玉;;饲料中黄曲霉毒素研究进展[J];畜禽业;2007年05期
2 牛振荣,朱忠学;世界花生黄曲霉毒素污染的研究[J];世界农业;1989年09期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜自琴;张珈榕;胡文元;荣华;刘丽仙;;浅析动物源性食品安全隐患及解决办法[J];黑龙江畜牧兽医;2014年24期
2 杨霞;;我国动物源性食品安全存在的问题浅析[J];轻工科技;2012年09期
3 杨霞;;动物源性食品安全问题及保障体系建立的探讨[J];漯河职业技术学院学报;2012年05期
4 孟艳莉;李秋菊;李超;邓立康;张军民;;我国DDGS常规营养成分和部分安全指标的测定[J];华北农学报;2011年S1期
5 曲秋颖;鲍蕾;石媛嫄;梁成珠;王雄;;黄曲霉毒素的检测技术及预防措施[J];农产品加工(学刊);2011年08期
6 夏炉明;陈琦;孙泉云;;饲料中常见霉菌毒素对养殖业的危害[J];上海畜牧兽医通讯;2010年06期
7 王守经;胡鹏;张奇志;杜方岭;;畜禽饲料黄曲霉毒素的污染及其控制技术[J];农产品加工(学刊);2010年10期
8 庄振宏;郑传琦;汪世华;;黄曲霉培养条件的优化及黄曲霉毒素B1的提取[J];应用与环境生物学报;2010年05期
9 石达友;刘念;郭铭生;李鹏飞;;中药防治动物黄曲霉毒素中毒与机理研究[J];中兽医医药杂志;2010年02期
10 庄振宏;郑传琦;汪世华;;黄曲霉毒素B_1胁迫相关小鼠肝脏线粒体蛋白的初步研究[J];中国农学通报;2010年06期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 冯建蕾;;黄曲霉毒素的危害和防治[J];中国畜牧兽医;2005年12期
2 魏金涛,齐德生;饲料水分活度及其对霉菌生长和产毒的影响[J];饲料工业;2005年19期
3 卿中全,于炎湖;黄曲霉毒素对家禽生产性能和健康的影响[J];中国饲料;2000年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李区;;黄曲霉毒素分析方法进展[J];广西水产科技;2005年03期
2 陈勇;荣道兴;任利民;;黄曲霉毒素对家禽的危害与防控措施[J];阿坝科技;2012年02期
3 邢天一;;液相色谱串联质谱法检测食品中的黄曲霉毒素实践探讨[J];农民致富之友;2017年23期
4 马冠生;;黄曲霉和黄曲霉毒素真那么可怕吗[J];生命与灾害;2017年11期
5 马亚伟;;猪饲料中黄曲霉素毒素危害与检测[J];农技服务;2017年19期
6 ;昆虫催生致命黄曲霉毒素[J];江西饲料;2018年01期
7 曾涛;罗晓燕;胡国媛;黄聪;彭荣飞;;高效液相色谱-质谱联用仪在测定茶叶中黄曲霉毒素的应用[J];预防医学情报杂志;2018年01期
8 王姝;;饲料受黄曲霉毒素污染的危害与防控[J];饲料博览;2018年02期
9 杨瑞琪;;饲料中黄曲霉毒素对家畜的危害及防治[J];中国畜牧兽医文摘;2018年03期
10 耿显春;;禽黄曲霉毒素和肉毒梭菌毒素中毒的诊断及防治[J];饲料博览;2018年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙淑娟;曾于洋;江海洋;;中药中黄曲霉毒素检测方法研究进展[A];中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会会议论文集[C];2017年
2 胡丽莎;谢春芳;姚冬生;刘大岭;;用等温滴定微量热技术对黄曲霉毒素氧化酶动力的研究[A];第八届中国酶工程学术研讨会论文集[C];2011年
3 黎玉凤;张赛;谢春芳;刘大岭;姚冬生;;黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化(Ⅱ)[A];第八届中国酶工程学术研讨会论文集[C];2011年
4 施晓晨;安雅男;申凤鸽;于录;;黄曲霉毒素诱导巨噬细胞自噬机制的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会论文集[C];2015年
5 王文龙;李成成;安立龙;;简述环境中黄曲霉毒素对蛋鸡产业潜在的生态和健康风险[A];中国畜牧兽医学会2014年学术年会论文集[C];2014年
6 孟庆利;;黄曲霉毒素的检测及控制[A];《2010中国猪业进展》论文集[C];2010年
7 翁善钢;Kaori Nishide;;亚太地区的黄曲霉毒素[A];第十二届(2014)中国猪业发展大会论文集[C];2014年
8 陈建民;张雪辉;杨美华;金钺;;中药中黄曲霉毒素检测概况[A];第八届全国中药和天然药物学术研讨会与第五届全国药用植物和植物药学学术研讨会论文集[C];2005年
9 马静;朱惠莲;唐志红;凌文华;;尿粪黄曲霉毒素排泄及生物干预[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
10 贺竹梅;;黄曲霉毒素生物控制技术初步研究[A];第12届生物毒素研究及医药应用学术大会论文集[C];2015年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 马爱平;黄曲霉毒素超标“致命”怎么破?[N];科技日报;2018年
2 国家食品安全风险评估中心副研究员 钟凯;普洱茶中携带黄曲霉会不会产生毒素?[N];中国医药报;2017年
3 食品与营养信息交流中心副主任 钟凯;花生酱含黄曲霉 吃了会怎样[N];健康报;2017年
4 科信食品与营养信息交流中心副主任 中华预防医学会健康传播分会常务委员 钟凯;农家花生油既便宜又放心?[N];保健时报;2017年
5 美国普度大学农业与生物工程系博士 云无心;检测出黄曲霉毒素 普洱茶还能喝吗[N];保健时报;2017年
6 记者 季征;云南农大研究表明普洱茶不含黄曲霉毒素[N];云南日报;2017年
7 本报记者 付丽丽 马波;茶照喝 牙照刷[N];科技日报;2017年
8 本报记者 陈海波;喝普洱茶,真的会致癌吗[N];光明日报;2017年
9 南方日报见习记者 郜小平;普洱茶致癌?谣言![N];南方日报;2017年
10 记者 杨艳萍;普洱茶中不含黄曲霉毒素[N];昆明日报;2017年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郝澍;硒对黄曲霉毒素B_1抑制猪细胞免疫的拮抗作用及其机理研究[D];南京农业大学;2016年
2 史莹华;纳米级硅酸盐结构微粒(NSP)吸附猪饲粮中黄曲霉毒素的研究[D];浙江大学;2005年
3 胡娜;基因芯片技术在黄曲霉毒素生物合成相关基因检测中的应用研究[D];南昌大学;2006年
4 张雪辉;中药中黄曲霉毒素检测方法研究及模式识别在中药领域中的应用[D];中国协和医科大学;2004年
5 申海涛;黄曲霉毒素G_1诱发小鼠肺腺癌的组织发生及其对肺泡Ⅱ型上皮细胞影响的研究[D];河北医科大学;2007年
6 马良;黄曲霉毒素B_1高灵敏度检测技术研究[D];中国农业科学院;2007年
7 谢光洪;黄曲霉毒素B1免疫层析试纸条快速检测方法的研制[D];吉林大学;2008年
8 何婷;黄曲霉毒素纳米抗体研制及其免疫分析技术研究[D];中国农业科学院;2016年
9 刘婕;黄曲霉在不同饲料原料中产生黄曲霉毒素B_1的差异性及其可能机制[D];华中农业大学;2016年
10 王锋;黄曲霉毒素B_1的辐射降解机理及产物结构特性分析[D];中国农业科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 仲红;温度对黄曲霉生长发育和次级代谢的影响[D];福建农林大学;2015年
2 叶柳青;曲古抑囷素A对黄曲霉产毒和生长调控机制的初步研究[D];福建农林大学;2015年
3 田尔诺;黄曲霉毒素B_1降解酶及其降解机制研究[D];湖北工业大学;2018年
4 马海艳;食品药品中痕量真菌毒素检测方法的研究与应用[D];河北医科大学;2018年
5 刘博伟;TNF-α上调CYP2A13对黄曲霉毒素G_1致肺泡上皮细胞损伤的影响[D];河北医科大学;2018年
6 李丽;槲皮素对黄曲霉毒素B_1致BRL-3A细胞毒性的保护作用[D];江南大学;2018年
7 李声明;黄曲霉MAPK通路相关基因功能初步研究[D];福建农林大学;2015年
8 陈璐瑶;花生酱中黄曲霉毒素富集规律及其削减技术研究[D];福建农林大学;2018年
9 郭珍妮;水分胁迫对黄曲霉生长和产毒影响的初步研究[D];福建农林大学;2015年
10 梁振纲;槟榔主要外源性有害物质检测分析[D];海南大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026