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《福建农林大学》 2003年
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甘蔗与黑穗病菌互作的基因差异表达研究

杨志霞  
【摘要】: 甘蔗黑穗病(Ustilago scitaminea Syd.)是世界性的甘蔗病害,它在感病品种上所导致的巨大经济损失使得世界许多植蔗国家不得不淘汰一些丰产、高糖但感病的商业品种。因此,甘蔗抗黑穗病育种的研究是当前甘蔗遗传育种和生产实践上急需解决的重大课题。为此,本研究旨在研究不同抗性类型甘蔗受甘蔗黑穗病侵染前后基因表达的差异而为甘蔗抗黑穗病育种提供分子依据。实验中选用高抗品种NCO376和感病品种F134为供试寄主材料;蒸馏水处理植株作对照;以12个3’端锚定引物和8个5’端随机引物构成96个引物组合,运用DDRT-PCR(differential display retrotranscriptation-PCR)技术以达到高效筛选差异基因。结果表明,有20个引物组合能扩增出差异条带,其中扩增效果最好、得到差异带多的随机引物为ARP3、ARP4和ARP11,这些随机引物可以和AP2、AP7、AP8锚定引物组成多个引物组合扩增出差异条带;锚定引物中扩增效果最好的是以CG或GC结尾的AP2、AP7。共筛选出11条差异带,其中,4条是NCO376互作后的表达差异带,说明品种受病菌侵染后,mRNA表达丰度提高;6条是F134与病菌互作后表达的差异带,1条未接种寄主所特有的,暗示有一个基因在感染黑穗病菌后关闭。对回收的11条差异带进行克隆测序,并在Genbank中进行同源性比较,发现抗病品种NCO376接种后表达的(RI1)cDNA片段与玉米、高粱的细胞色素氧化酶的同源性达100%;6个与玉米、小麦mRNA序列有同源性,其余3个未查到同源性,有可能是新基因的部分序列。对接种后抗病品种4条差异片段RI1、RI2、RI3、RI4和感病品种一条差异表达片段SO1进行半定量RT-PCR的初步验证,结果表明,RI1、RI2和RI3差异片段为真实表达的差异片段,而RI4和SO1差异片段呈假阳性。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S435.661

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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【二级参考文献】
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7 肖卫萍 肖卫秋;抓管理重投入增甘蔗单产[N];云南经济日报;2008年
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4 乔曦;基于计算机视觉的甘蔗种茎切割防伤芽系统的研究[D];广西大学;2013年
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7 张跃彬;云南甘蔗农业栽培专家系统研制[D];中国农业大学;2005年
8 韦衍标;崇左市江州区甘蔗生产现状及发展对策[D];广西大学;2007年
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