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《福建农林大学》 2003年
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枇杷种质离体保存及生理生化研究

刘小军  
【摘要】: 本研究以枇杷(Erilbotrya japonica Lind I.)为材料,进行了枇杷种质资源离体保存及生理生化的研究。主要包括枇杷快繁体系的建立;枇杷小苗常温限制生长保存和低温保存条件下的生理生化研究;枇杷花粉的超低温保存研究;枇杷种胚超低温保存的脱氢酶活性研究几个方面。 1、枇杷快繁体系的研究 试验中建立了茎尖、幼胚两种枇杷快繁体系。在茎尖快繁体系中,用饱和漂白粉溶液前处理和选择适当大小的外植体,可以有效地防止茎段褐变,提高茎尖培养成活率。培养基BA1.0mg/l+NAA0.5mg/l组合可有效地促进茎尖的发育。 在幼胚培养中,培养基MS+6-BA2.0mg/l+IAA0.5mg/L萌芽效果最好,用培养基MS+BA1.0mg/l+NAA0.2mg/l小苗平均株高较高,而且长势好,所以此种培养基为最适宜的丛生芽增殖培养基。 2、枇杷小苗常温限制生长保存和低温保存的生理生化研究 枇杷离体保存所用培养基为MS基本培养基,低温(11±1℃)保存培养基中加入蔗糖2.5%,琼脂0.75%,常温限制生长所加植物生长抑制剂为多效唑(PP_(333))5 mg/L,蔗糖为2.5%和5%两种,琼脂为0.75%,研究蔗糖和温度对枇杷小苗离体保存的影响。 在对枇杷小苗长达六个月的保存过程中,对与植物逆境生理和代谢调控有关的几个生理指标如呼吸速率、叶绿素和蛋白含量以及多酚氧化酶活性和过氧化物酶活性等进行了检测。 结果表明,在保存过程中,枇杷小苗的呼吸速率被抑制,基本上随保存时间延长而降低;叶绿素的含量则是在保存的第三个月达到最高值,而后下降;可溶蛋白的含量是在保存的第四个月达到最高值,而后下降或是呈一直下降趋 势;多酚氧化酶的活性则是呈先升后降趋势,低温对其活性影响较大,而蔗糖 含量影响相对较小;过氧化物酶的活性也是一直呈下降趋势,蔗糖对其活性的 影响较大。 3、批把花粉的超低温保存研究 对经过干燥脱水至不同含水量的批把离体花粉进行了超低温(一196℃)保 存实验。结果表明:超低温保存花粉时,花粉的含水量多寡是成败的关键。对 于批把而言,选择含水量为13%左右的花粉比较合适。花粉在液氮中保存2h、 sh和24h,其发芽率无显著差异。 4、批把种胚超低温保存的脱氢酶活性研究 幼胚用60%玻璃化保护剂PVSZ处理,然后进行液氮保存,经解冻处理后, 进行脱氢酶活性测定。结果表明,含水量是影响批把种子离体胚超低温保存的 重要因素,巧%和20%含水量的脱氢酶活性高,能够较好地保存与维持离体胚 活力。冷冻速度对批把离体胚脱氢酶活性影响甚微,而解冻过程则有显著影响。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S667

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【引证文献】
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4 吴仕超;42份菊科花卉的离体保存及其遗传多样性的RAPD分析[D];福建农林大学;2010年
5 赵密珍;草莓茎尖离体保存研究[D];南京农业大学;2005年
6 汤青林;甘蓝自交不亲和系花粉与柱头离体保存及相互识别效应研究[D];西南农业大学;2002年
7 徐定华;柚类种质资源超低温保存体系研究初探[D];华中农业大学;2005年
8 张玉芹;食用百合种质资源离体保存技术初步研究[D];内蒙古农业大学;2004年
9 董振红;甜叶菊品系“1096”离体培养及其UGT76G1酶基因的克隆[D];东北农业大学;2009年
10 刘长莉;新疆杨离体快繁与保存系统的建立[D];东北林业大学;2004年
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