收藏本站
《福建农林大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

金针茹色泽基因的分子标记技术研究

刘维侠  
【摘要】:色泽是金针菇的重要性状之一,受一对等位基因的控制。本研究以FL19(黄色)、8801(白色)及其后代(F_1代、F_2代)菌株和相应单核菌株为材料,通过对金针菇DNA提取方法和RAPD扩增条件的优化,建立了一套适于金针菇RAPD反应的反应体系;在此基础上,通过RAPD分析和BSA法相结合,成功的筛选到一个与金针菇白色基因紧密连锁的RAPD标记S375_(1800),并根据序列分析结果将RAPD分子标记转化为重复性和特异性更好的SCAR分子标记。主要结果如下: 1.DNA提取条件优化 通过正交实验设计,在4个因子(菌丝培养方式、菌丝处理方式、氯化苄浓度、SDS浓度)的3个水平共9个处理方面对氯化苄法提取DNA进行了探讨,所提取的DNA在OD_(260)处的数据结果和电泳结果均显示,处理3(菌丝静止培养,液氮研磨,氯化苄浓度为5ml/g菌丝,SDS浓度为20%)效果明显优于其它8个处理。 2.RAPD扩增条件优化 运用单因素筛选方法,分别对不同的Mg~(2+)浓度、模板DNA浓度、引物浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度以及不同的退火温度进行了筛选,最后得到金针菇PCR扩增的最佳反应体系为:2.5μl Buffer,2mM MgCl_2,50ng DNA,0.2μM Primer,100μM dNTP,1.25U Taq酶,最后用无菌超纯水补至25μl。 3.色泽基因的RAPD标记筛选 根据BSA法的原理,分别从黄、白色菌株中选取5株(单核4株,双核1株),提取菌丝DNA混合组成两个基因池,然后用200个10碱基对的随机引物进行RAPD多态性分析,筛选到一个稳定的多态性标记S375_(1800),通过对FL19、8801及其后代共75株单核菌株和13株双核菌株的验证,证明该标记与白色基因是紧密连锁的。 4.RAPD标记转化为SCAR标记 对上述RAPD标记S375_(1800)片段进行了克隆和两端测序,并根据序列分析结果将上述RAPD分子标记转化为重复性和特异性更好的SCAR分子标记。利用该标记对F_1代单核菌株,以及不同来源的32个双核菌株和其中6株的90个单核菌株分别进行了验证,证明了SCAR标记的可靠性,同时说明用SCAR标记可以快速、准确的鉴别出金针菇颜色的基因型,从而可以有效地指导白色金针菇品种选育,加速育种进程。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S646

手机知网App
【引证文献】
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王秀全;江玉姬;刘维侠;谢宝贵;;利用RAPD标记研究金针菇的亲缘关系[A];首届海峡两岸食(药)用菌学术研讨会论文集[C];2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 张光忠;基于基因组的金针菇遗传连锁图的构建与数量性状位点(QTL)分析[D];福建农林大学;2011年
2 赵光辉;草菇杂交育种研究[D];福建农林大学;2011年
3 陈剑;不同草菇菌株特性研究与分子标记辅助杂交育种[D];福建农林大学;2006年
4 杨成香;金针菇优良菌株的筛选及遗传多样性分析[D];南京农业大学;2007年
5 袁滨;三明地区野生香菇菌种的分离与利用[D];福建农林大学;2010年
6 秦娟;金针菇子实体颜色在单孢及测交后代群体中遗传分化研究[D];南京农业大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 鲍大鹏,王南,陈明杰,谭琦,潘迎捷;采用ARDRA和RAPD对柳松菇(Agrocybe aegerita)菌株遗传多样性的分析[J];上海农业学报;2001年01期
2 陈劲枫,娄群峰,余纪柱,庄飞云;黄瓜性别基因连锁的分子标记筛选[J];上海农业学报;2003年04期
3 李传友,郑洪刚,翁曼丽,贾建航,牟同敏,HenryT.Nguyen,王斌;光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析[J];生物工程学报;2000年01期
4 陆开宏,石志猛,王扬才;枝角类RAPD条件优化和遗传多样性分析[J];上海水产大学学报;2003年04期
5 张引芳,法朗西斯·莫林娜;RFLP在鳞翅目蛹虫草菌鉴别中的应用[J];食用菌学报;1994年02期
6 詹才新,朱兰宝,杨新美;RAPD技术在金针菇杂交育种中的应用[J];食用菌学报;1995年01期
7 罗信昌,李英波,施庆利;分子生物学技术在菇类研究中的应用[J];食用菌学报;1995年04期
8 张引芳,陈春涛;香菇菌种不同组织分离物的DNA差异性研究[J];食用菌学报;1996年03期
9 詹才新,朱兰宝,杨新美;利用RAPD技术评估金针菇种质资源[J];食用菌学报;1997年01期
10 贾建航,刘振岳,泰丽芳,刘国振,张伟,李莉云,李小兵;香菇DNA导入平菇原生质体及转化子鉴定研究[J];食用菌学报;1997年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王欲晓;庄文昌;王靖;;一株微生物采油菌的16S rDNA鉴定和绿色荧光蛋白分子标记[J];徐州工程学院学报(自然科学版);2011年04期
2 崔刘福;杨文浩;宋海澄;舒荣;韩依轩;刘燕鹰;陆艳萍;于萍;;肽酰基精氨酸脱亚氨酶4基因多态性与汉族人群类风湿关节炎的相关性[J];中华临床免疫和变态反应杂志;2007年02期
3 韦金兰;;对保护青海冬虫夏草资源的思考[J];攀登;2011年05期
4 刘风珍,万勇善,王洪刚;培养基附加不同浓度NaCl对花生离体培养的影响[J];花生学报;2003年04期
5 刘风珍,万勇善;培养基不同浓度NaCl对花生离体培养的影响[J];花生学报;2003年S1期
6 张洪涛;单雷;全先庆;毕玉平;杨家森;王秀丽;;花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析[J];花生学报;2006年01期
7 梁雪莲;郑奕雄;庄东红;黄德强;;花生CpTI基因转化—花粉介导法[J];花生学报;2006年04期
8 禹山林;迟晓元;杨庆利;潘丽娟;和亚男;陈明娜;杨珍;;花生幼苗全长cDNA文库的构建[J];花生学报;2010年02期
9 王红亮;;小鼠LEAP-2基因的克隆及其真核表达质粒的构建[J];新乡学院学报(自然科学版);2010年02期
10 王磊;宿红艳;吕少磊;;八个灵芝属菌株的分子标记与亲缘关系鉴定[J];新乡学院学报(自然科学版);2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 李春如;;近十年虫草无性型研究进展[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第五卷)[C];2003年
3 徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
4 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
5 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
6 方严;吴倩;;铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA基因分型研究[A];重庆市预防医学会2005年学术交流会论文集[C];2005年
7 王强;张茂君;;分子标记及其在苹果属植物研究上的应用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8 张仁和;薛吉全;毛建昌;马国胜;杨引福;;DNA分子标记与玉米种质研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
9 陈永久;杨大荣;杨跃雄;张亚平;;青藏高原七个地区冬虫夏草的分子进化研究[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
10 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 韩英鹏;多环境、多遗传背景下不同发育时期大豆籽粒重的QTL分析[D];哈尔滨师范大学;2010年
2 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
3 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
4 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
5 刘名;太平洋鲱和大头鳕的群体遗传学研究[D];中国海洋大学;2010年
6 李蓉;一种新型虫草生物学及其活性物质的研究[D];中国海洋大学;2009年
7 张立楠;鲢遗传连锁图谱的构建及精子竞争对性别间重组率差异的影响[D];中国海洋大学;2010年
8 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
9 林荔辉;应用分子和常规技术通过籼粳交选育亲籼型水稻雄性不育系[D];福建农林大学;2010年
10 李培英;新疆草坪用野生偃麦草种质资源评价[D];新疆农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘敏;基于SSR、ISSR和RAPD对大豆疫霉菌的遗传多样性研究[D];华中农业大学;2010年
2 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
3 李良;湖北省油茶优良单株遗传多样性及品质初步分析[D];华中农业大学;2010年
4 林兵;甘蓝型油菜A8连锁群种子含油量QTL簇解析及连锁累赘分析[D];华中农业大学;2010年
5 刘健;甘蓝型油菜C2连锁群种子含油量QTL簇及品质性状的分析[D];华中农业大学;2010年
6 郭一鸣;全球白菜型油菜遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
7 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
8 石伟平;二倍体马铃薯遗传群体构建和抗低温糖化分析[D];华中农业大学;2010年
9 董巍;分子标记辅助选择改良光温敏核不育系的稻瘟病抗性和稻瘟病抗性基因的初步定位[D];华中农业大学;2010年
10 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李清华;黄金堂;陈海玲;;应用灰色关联分析评价南方区春花生新品种[J];花生学报;2006年04期
2 刘琳,毛凯,干友民,张新全,杨春华;分子标记技术在植物遗传育种中的应用[J];四川草原;2003年04期
3 袁昭岚,沈颂东,黄鹤忠,许璞;SSR和ISSR分子标记技术及其在遗传多态性方面的应用[J];水产养殖;2005年02期
4 韦文添,林显秋;草菇栽培中生长异常的原因及预防措施[J];蔬菜;2003年12期
5 王富民;宫秀荣;高君辉;刘日新;;草菇保鲜技术及有关生理变化[J];上海农业学报;1992年03期
6 吴希哲,高向东;金针菇提取物的保肝及抗肿瘤作用[J];中国生化药物杂志;2002年04期
7 张健;姚文兵;谢晨;高向东;;富锗金针菇多糖肝保护有效成分的研究[J];中国生化药物杂志;2007年06期
8 朱婉华;李兆兰;刘崇汉;;酯酶同工酶应用于真菌分类的研究[J];食用菌;1986年02期
9 李惠君;;金针菇菌株的同工酶测定[J];食用菌;1986年03期
10 郭美英;金针菇杂交优良菌株的初步研究[J];食用菌;1988年03期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 姚芳杰;金顶侧耳基因连锁图谱与双—单交配机制解析及高温型菌株选育研究[D];吉林农业大学;2002年
2 李安政;香菇交配型因子次级重组体及与交配型因子连锁的分子标记的鉴定[D];华中农业大学;2006年
3 郑亚凤;高多糖的姬松茸和灰树花品种及其生物活性的研究[D];福建农林大学;2008年
4 傅俊生;草菇遗传规律研究[D];福建农林大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄晨阳;同工酶和RAPD标记在金针菇菌株鉴定和遗传多样性研究中的应用[D];福建农林大学;2002年
2 罗联忠;草菇开伞基因克隆及反义表达载体构建[D];福建农林大学;2004年
3 季哲;黄伞的交配及发育相关基因的研究[D];南京农业大学;2004年
4 陈剑;不同草菇菌株特性研究与分子标记辅助杂交育种[D];福建农林大学;2006年
5 卢启泉;四类平菇种质资源的分子标记分析[D];福建农林大学;2007年
6 高巍;金针菇SCAR标记遗传连锁图的构建[D];福建农林大学;2007年
7 傅俊生;草菇杂交育种研究及其分子遗传标记的建立[D];福建农林大学;2007年
8 姚太梅;平菇单孢杂交及后代筛选[D];河北农业大学;2008年
9 李刚;草菇分子标记辅助育种研究[D];福建农林大学;2008年
10 张硕;猴头菌单孢杂交及后代筛选[D];河北农业大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 刘靖宇;江玉姬;谢宝贵;陈炳智;廖伟;邓优锦;刘朋虎;;应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析草菇同核和异核菌丝蛋白质组[J];食用菌学报;2012年01期
2 刘靖宇;江玉姬;谢宝贵;陈炳智;廖伟;邓优锦;;iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术在草菇不同生长发育时期蛋白质组分析中的应用[J];微生物学通报;2012年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘靖宇;草菇不同生长发育时期的比较蛋白质组学分析[D];福建农林大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 林瑞虾;草菇~(60)Co诱变育种研究[D];福建农林大学;2011年
2 赵光辉;草菇杂交育种研究[D];福建农林大学;2011年
3 刘盛荣;杏鲍茹的遗传特性及种间杂交研究[D];福建农林大学;2008年
4 王晓霞;茯苓单孢菌株主要生物学特性的初步研究[D];华中农业大学;2012年
5 陈志娥;斑玉蕈SCAR标记遗传连锁图的构建[D];福建农林大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曾凡亚,汤海妹,张义正;凤尾菇线粒体DNA片段的克隆与同源性分析[J];四川大学学报(自然科学版);1996年04期
2 夏德全,曹萤,吴婷婷,王涛;用RAPD分析对罗非鱼遗传变异的研究及其对杂种优势的应用[J];水产学报;1999年01期
3 孔祥君;黄小东;宋德瑜;陆蕙芳;朱玉民;蒋永良;赵仁福;蔡美英;沈栋柱;杨春全;;双孢蘑菇繁育方式和移植次数与产量的关系[J];上海农业学报;1993年02期
4 李树林;周志疆;周熙荣;;甘蓝型油菜隐性核不育系S45AB的遗传[J];上海农业学报;1993年04期
5 陈云鹏,曹家树,缪颖;芸薹种(Brassica campestris,2n=20)蔬菜遗传多样性的RAPD初步分析[J];上海农学院学报;1999年02期
6 燕克勤,朱宝成,赵会良,李庆余,王谦;电击法介导的紫孢侧耳原生质体转化[J];生物工程学报;1996年01期
7 何强泰;;食用菌的细胞融合[J];食用菌;1986年03期
8 肖在勤;凤尾菇和侧五种间原生质体融合[J];食用菌;1990年02期
9 周丽斌;金针菇品种间酯酶同工酶的研究[J];食用菌;1990年02期
10 杨国良,杨秀琴,杨晓仙,李育岳,汪麟;毛木耳与黑木耳原生质体融合育种研究[J];食用菌;1990年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 杨大荣;舒畅;李朝达;沈发荣;杨跃雄;;四种蝠蛾昆虫和寄生菌的比较研究[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第二卷)[C];1991年
2 许瑞祥;;灵芝制品介绍及台湾研究现况[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 郑翠明;大豆对SMV3号株系的抗性遗传及分子标记研究[D];中国农业科学院;2000年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026