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烟草人工种子的研究

郭文义  
【摘要】:本研究以烤烟K326、云85、红大为材料,在国际上首次报道了烟草主栽品种的孢子体体细胞胚胎发生及烟草人工种子的制作。主要的研究结果如下: 一、以叶片为材料,研究了品种(基因型)、激素组合对愈伤组织和不定芽诱导的影响。筛选出了适于诱导体胚的胚性愈伤组织(第三类愈伤组织)。研究结果表明,诱导愈伤组织和叶片分化不定芽的最佳激素组合均为:0.5 mg/LIAA+2.0mg/LKT。 二、以烤烟K326、云85、红大3个品种叶片诱导的愈伤组织为材料,在含不同激素配比的培养基上进行试验,研究其体细胞胚胎的发生能力。结果表明,不同品种之间体胚发生的能力存在较大差异;光照时间也是影响体胚发生的重要因素:不同激素配比诱导体胚发生的频率也不同。K326、红大、云85体胚发生的最高频率分别为8.3%、47.4%和61.1%:最佳激素配比分别为:2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L BA、2.0 mg/LNAA+0.2 mg/L BA和2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L BA。试验中观察到体胚发育的各阶段,体胚能萌发,形成完整植株。 本研究采用TDZ诱导烟草叶片体胚发生,诱导率可高达100%。但TDZ浓度不同时,诱导体胚的数量存在差异,其中,浓度为0.2 mg/L时诱导产生的体胚数量最多。TDZ诱导出的体胚不用经过成熟培养就可在原培养基上直接长成小苗。 此外,以叶肉原生质体诱导体胚发生时,观察到类似于球形胚的结构,但未能直接培养得到体胚。原生质体培养产生的愈伤组织在暗培养的条件下可以诱导出体胚,其最佳培养基为含2.0 mg/L CPA、0.5 mg/LKT、20g/L蔗糖和3a/L AC的MS固体培养基。 福建农林大学硕士学位论文摘要 三、本研究以烟草叶片愈伤组织分化出的胚状体(繁殖体I)、叶片 诱导体胚长成的小芽(繁殖体n)和叶片诱导的不定芽(繁殖体111)为 材料,通过海藻酸钙球法和中空海藻酸钙球法制成人工种子.研究发现, 两种包埋方法制成的人工种子在无菌条件下都具有较高的发芽率;繁殖 体I制成的人工种子无法萌发,繁殖体n、m制成的人工种子在无菌 条件下都具有较高的转株率(分别为80%、82%)。长期低温贮藏不利 人工种子的发芽。 四、为验证再生植株是否保持了母本的优良特性,本研究运用RAPD 分析,检测出3种不同繁殖体得到的植株均能保持亲本的性状,而未发 生变异。


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