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《福建农林大学》 2004年
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转基因农产品检测基因芯片研制

徐景升  
【摘要】:随着转基因技术的发展和应用,转基因作物的种类和数目越来越多,种植面积逐年增加。转基因生物安全问题引起了广泛的争论,各国政府纷纷制定相关政策法规,加强对转基因农产品的安全管理,开展转基因生物检测技术的研究。目前,转基因农产品检测技术主要以PCR技术为基础,检测外源基因序列。PCR技术简单方便,灵敏度高,但无法实现转基因农产品高通量检测。基因芯片技术的发展为转基因农产品高通量检测提供了技术平台。 本研究利用基因芯片技术,开展了有关转基因农产品检测芯片的研制工作,主要结果如下: 1.改良了传统的CTAB方法,成功地从供试大豆种子及豆粕中提取出了高质量的DNA。建立了转基因大豆单基因PCR检测和MPCR检测体系,其中MPCR检测体系的建立提高了转基因大豆的检测效率。 2.自制聚赖氨酸片基,并与进口片基进行打印测试比较,结果表明,自制片基与进口片基质量相同,完全满足制作基因芯片的要求。自制片基使片基制作成本降到原来的1/5,大大节省了实验开支。 3.利用自制的片基制作基因芯片,同时优化了基因芯片的制作参数,确定了最佳点样液种类和上样体积;深入研究了激光对荧光染料的漂白作用,量化了激光对荧光染料的漂白效应;比较了不同PMT值下荧光增益与信噪比之间的关系。 4.收集了商业化转基因作物常用转基因元件的序列信息,确定了这些元件的保守区段。然后通过各种渠道收集含有这些转基因元件的克隆载体或表达载体,并设计了相应PCR引物扩增保守区段,将其制备为探针。用机械手将这些探针点到聚赖氨酸包被的载玻片上,制备了转基因检测芯片。 5.利用本研究制作的转基因农产品检测芯片,成功地从转基因大豆中检测出外源基因序列。结果表明,基因芯片不仅能够进行高通量的检测,而且检测效率 大大高于MPCR。同时,由于基因芯片建立在分子杂交基础上,检测结果可信度 大大提高。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S188

【引证文献】
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1 王恒波;陈平华;郭晋隆;陈如凯;许莉萍;;转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测[J];基因组学与应用生物学;2010年06期
2 王恒波;陈平华;陈如凯;郭晋隆;;转基因大豆Roundup Ready的高通量PCR检测[J];江西农业大学学报;2008年04期
3 李伟丰;杨朗;黄鹂;;应用复合PCR检测水稻种子的转基因成分[J];种子;2007年01期
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1 邓祖湖;甘蔗与斑茅杂交的染色体遗传及育性相关基因的筛选[D];福建农林大学;2010年
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1 李哲权;多重聚合酶链反应法在慢性感染性结膜炎诊断中的应用[D];延边大学;2012年
【参考文献】
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1 李瑶,陈菊祥,裘敏燕,应康,陈沁,符薇,王品,沈娴,谢毅,毛裕民;基因芯片的制备研究[J];第二军医大学学报;2000年09期
2 卢天成,王兴智;植物转基因产品检测方法的评价[J];分子植物育种;2003年03期
3 祝骥,马文丽,李凌,姚汝华,郑文岭;基因芯片制作中玻璃介质表面处理对DNA固定率的影响[J];华南理工大学学报(自然科学版);2002年03期
4 程霞;转基因作物是否有食物安全条例[J];世界农药;2002年05期
5 李宏伟;美国转基因作物品种及其商业化应用[J];全球科技经济瞭望;2003年06期
6 盖树鹏,孟祥栋;转基因植物的筛选与检测[J];山东农业大学学报(自然科学版);2000年01期
7 钱秉贞;转基因政策对中国大豆市场的影响[J];山东农业;2002年04期
8 朱滨,景奉香,赵建龙,孙悦,陈继锋,赵新泰,徐元森;用氨基修饰的载玻片制作cDNA微阵列[J];生物化学与生物物理进展;2001年01期
9 李磊;中国的转基因政策对大豆产生新的影响[J];饲料广角;2001年12期
10 黄东东,王庆华,吕振岳,周达民;转基因食品的定量PCR检测方法[J];食品科技;2001年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 马桂莲;张琴;;世界农业生物技术发展概况及我国发展展望[J];安徽农学通报;2007年19期
2 夏珣;闫明旭;李名扬;眭顺照;;Metallothionein克隆载体及表达载体的构建及转化矮牵牛的初步研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年07期
3 刘玉冬;刘艳军;杨静慧;;提高草木犀遗传转化植株再生率技术的研究[J];安徽农业科学;2009年15期
4 徐颖;;转基因大米的安全性与核酸检测技术的进展[J];安徽农业科学;2009年33期
5 徐春波;王勇;赵海霞;米福贵;;苜蓿植株再生和农杆菌遗传转化条件的研究[J];安徽农业科学;2012年12期
6 曹红丽;生物技术发展引发的生物安全问题研究[J];北京科技大学学报(社会科学版);2005年02期
7 张润锋,陈宏;基因芯片及应用[J];黄牛杂志;2002年03期
8 魏兵强;;无选择标记转基因植物研究进展[J];长江蔬菜;2009年10期
9 吴成铁,陈敏,李长敏,唐立;生物芯片及其片基的研究发展[J];材料导报;2002年07期
10 吴成铁,陈敏,李长敏,唐立;用多聚-L-赖氨酸活化生物芯片玻璃片基的研究[J];材料导报;2003年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李雨;;放射生物学领域的基因芯片技术研究[A];第6届辐射研究与辐射工艺学术年会论文集[C];2004年
2 陈德欣;;食品污染对人体健康的影响及其控制措施[A];食品安全的理论与实践——福建省科协第四届学术年会“食品安全与农民增收”分会场暨福建省农学会第五届青年学术年会论文集[C];2004年
3 林卫东;;浅谈转基因生物的环境风险及其防范对策[A];生态安全与可持续发展——广西生态学学会2003年学术年会论文集[C];2003年
4 刘凯;赖家业;兰健;招礼军;;转基因植物的生态安全性[A];生态安全与可持续发展——广西生态学学会2003年学术年会论文集[C];2003年
5 葛永怡;章桂明;刘作易;;基因芯片技术在微生物检测中的应用[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
6 赵丽萍;高其康;陈亮;王新超;姚明哲;;茶树基因芯片的研制和初步应用[A];第四届海峡两岸茶业学术研讨会论文集[C];2006年
7 徐春波;王勇;赵海霞;李兴酉;;农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化体系的研究[A];中国草学会青年工作委员会学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
8 回文广;赵廷昌;孙福在;张卉;王建荣;高孝强;田丽;;实时荧光定量PCR原理及其应用[A];中国植物病理学会第六届青年学术研讨会论文集——植物病理学研究进展(第五卷)[C];2003年
9 刘国艳;;当代社会的食品安全体系现状及建设构想[A];2003全国家畜内科学学术研讨会论文专辑[C];2003年
10 马克平;米湘成;魏伟;卢志军;;生物多样性研究中的几个热点问题[A];中国生物多样性保护与研究进展——第五届全国生物多样性保护与持续利用研讨会论文集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张琛;基因芯片数据处理与分析方法研究[D];吉林大学;2011年
2 刘雪凤;知识产权全球治理视角下NGO功能研究[D];华中科技大学;2011年
3 王金萍;跨国资本进入背景下中国粮食安全问题研究[D];辽宁大学;2011年
4 张玉;农杆菌介导菊苣遗传转化体系的建立及富硫氨基酸基因的导入和表达定位[D];四川农业大学;2010年
5 李子兴;拟南芥ROP11GTPase通过和ROPGEF1/4相互作用负调控ABA信号转导[D];清华大学;2010年
6 文颖强;中国野生华东葡萄基因VpALDH2a功能分析与植物侵入后非寄主抗性研究[D];西北农林科技大学;2011年
7 刘曼莉;猪链球菌2型感染宿主后宿主表达谱的分析研究[D];华中农业大学;2011年
8 张磊;转hrfl基因水稻耐旱性及其转录谱分析[D];南京农业大学;2011年
9 缪卫国;转hpa1_(Xoo)基因棉花抗病虫防卫反应与全基因组转录谱分析及棉花角斑病菌hpa_(Xm)基因的功能[D];南京农业大学;2009年
10 赵宇翔;中国林业生物安全风险评价与管理对策研究[D];北京林业大学;2012年
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1 刘莹;根癌农杆菌介导的rolB基因转化烟草的研究[D];中南林业科技大学;2010年
2 孙壮;转ICE1基因水稻耐低温胁迫机理的研究[D];黑龙江八一农垦大学;2011年
3 邢海涛;欧美杨NE-19水分利用效率调控基因PdERECTA的克隆和功能分析[D];北京林业大学;2011年
4 王沙沙;小黑杨FT-like基因的克隆、原核表达及植物超表达、RNAi表达载体的构建[D];东北林业大学;2011年
5 王义鹏;拟南芥胱硫醚-γ-合成酶(D-AtCGS)基因在大肠杆菌中的表达及抗血清制备[D];东北林业大学;2011年
6 杨娜;盐碱胁迫下大豆根和叶的表达谱分析[D];吉林农业大学;2011年
7 李然;BVDV基因E_0在人参发根的转化及活性成分测定[D];吉林农业大学;2011年
8 张云月;携带hrpZpsta基因植物表达载体的构建及转化大豆的研究[D];吉林农业大学;2011年
9 杨菲;RNAi转基因植物基于DNA的快速精确检测方法研究[D];中国农业科学院;2011年
10 李言;橡胶树抗旱、抗寒相关基因克隆及表达分析[D];海南大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高志勇;;应用基因芯片检测水稻基因表达的研究[J];安徽农业科学;2007年10期
2 李飞武;李葱葱;董立明;邢珍娟;张明;;转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测[J];安徽农业科学;2010年13期
3 孙凯;王秀荣;刘丽玲;刘荻萩;王忠华;陈维多;;基因芯片技术及其应用[J];东北农业大学学报;2006年03期
4 李飞武;李葱葱;邢珍娟;刘娜;康岭生;宋新元;邵改革;张明;;第二代抗草甘膦大豆PCR检测方法研究[J];大豆科学;2009年02期
5 余永亮;梁慧珍;王树峰;练云;位艳丽;王庭峰;;中国转基因大豆的研究进展及其产业化[J];大豆科学;2010年01期
6 寸宇智;萝卜可育系和雄性不育系花粉发育的组织化学研究[J];大理师专学报(综合版);1998年02期
7 王福青,王翠兰,宋再华;大白菜雄性不育系88-3花药和花粉发育的细胞形态学观察[J];西北植物学报;2001年03期
8 宋国琦;胡银岗;林凡云;董普辉;何蓓如;;YS型小麦温敏不育系育性转换基因的cDNA-AFLP分析[J];西北植物学报;2006年04期
9 刘华伟,郭蔼光,马立农,邱立;PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用[J];动物医学进展;2004年06期
10 郑德森;;甘蔗12个种和品种的6种同工酶比较[J];福建农学院学报;1987年02期
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1 康俊根;四种类型甘蓝雄性不育系花药败育特征及基因表达谱分析[D];中国农业科学院;2006年
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1 林炜乐;甘蔗斑茅杂交后代染色体遗传分析及品质抗性鉴定[D];福建农林大学;2008年
2 那海燕;利用基因芯片筛选甘蔗育性相关基因[D];福建农林大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王恒波;陈平华;郭晋隆;陈如凯;许莉萍;;转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测[J];基因组学与应用生物学;2010年06期
2 陈贞;芦春斌;杨梦婕;马骏;白卫斌;吴希阳;;棉花中转基因成分多重PCR检测体系的建立[J];中国农业大学学报;2011年03期
3 王恒波;陈平华;陈如凯;;转基因植物及其产品PCR检测引物的筛选研究[J];热带农业科学;2010年11期
4 闻伟刚;盛蕾;张吉红;谭钟;;痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立[J];食品科学;2008年12期
5 魏霜;陈贞;芦春斌;马骏;白卫滨;吴希阳;;多重PCR检测转基因水稻的转基因成分[J];食品科学;2012年12期
6 贺艳;郑文杰;刘烜;赵卫东;;转基因检测技术的研究进展[J];食品研究与开发;2009年03期
7 高玉龙;焦芳婵;徐照丽;李文正;;多重PCR在烟草转基因检测中的应用[J];生物技术通报;2008年02期
8 王渭霞;赖凤香;洪利英;傅强;;应用多重PCR技术快速检测抗虫转基因水稻[J];中国测试;2009年06期
9 王永;兰青阔;赵新;朱珠;程奕;;抗虫转Bt基因水稻外源转基因成分环介导等温扩增技术检测方法的建立及应用[J];天津农业科学;2012年01期
10 林展;;转基因作物种子检测技术研究进展[J];种子;2009年06期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 陈贞;转基因作物的多重PCR检测体系的研究[D];暨南大学;2011年
2 曲秋颖;转基因大豆、玉米、油菜品系鉴定方法[D];中国海洋大学;2011年
3 杨洋;转基因小麦分子生物学鉴定及对大麦黄矮病毒品系抗性的研究[D];西北农林科技大学;2011年
4 茹柿平;检测转基因蛋白Cry 1Ab的电化学免疫生物传感器研究[D];浙江大学;2012年
5 马玉婷;转Xa21基因抗病水稻抗优97特异性检测技术研究[D];中国农业科学院;2008年
6 李哲权;多重聚合酶链反应法在慢性感染性结膜炎诊断中的应用[D];延边大学;2012年
7 周琳华;LAMP法在转基因食品检测中的应用研究[D];南方医科大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 毛慧珠,唐惕,曹湘玲,白永延,郭培福,符文俊;抗虫转基因甘蓝及其后代的研究[J];中国科学C辑:生命科学;1996年04期
2 方荣祥,田颖川,王桂玲,秦晓峰,杨毛周,李太元,许丙寅,莽克强,张振臣,吴青,周汝鸿,王凤龙,赵钢,韩晓东;抗烟草和黄瓜花叶病毒的双价抗病毒工程烟草[J];科学通报;1990年17期
3 黄大年,李敬阳,章善庆,薛锐,杨炜,华志华,谢小波,汪晓玲;用抗除草剂基因快速检测和提高杂交稻纯度的新技术[J];科学通报;1998年01期
4 钱迎倩;生物多样性与生物技术[J];中国科学院院刊;1994年02期
5 夏敬源,崔金杰,马丽华,董双林,崔学芬;转Bt基因抗虫棉在害虫综合治理中的作用研究[J];棉花学报;1999年02期
6 罗云波,生吉萍,申琳;番茄中反义ACC合成酶基因的导入与乙烯生物合成的控制[J];农业生物技术学报;1995年02期
7 甄丽红,夏玻;转基因农产品的研究及前景[J];山东农业;2001年01期
8 马文丽,郑文岭,崔东,宋艳斌,吴清华;利用瓷片材料制备DNA微集芯片[J];生物化学与生物物理学报;2000年03期
9 祝骥,马文丽,姚汝华;DNA芯片技术与基因表达研究[J];生命科学研究;2000年02期
10 金万枚,巩振辉,李桂荣,张桂华;植物遗传转化方法和转基因植株的鉴定[J];陕西农业科学(自然科学版);2000年01期
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1 陶文琴,陈杖榴,曾振灵;基因芯片在抗微生物药学研究中的应用[J];动物医学进展;2003年02期
2 杨林;潘全会;曹巧玲;张桂红;陈苏红;廖明;;猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒基因芯片检测技术的建立与优化[J];中国动物检疫;2007年05期
3 温尚昆;;假单胞杆菌PsJN DNA芯片的制备及检测[J];山东农业大学学报(自然科学版);2008年02期
4 姚忠达,魏利,陈学平,郭家明;基因芯片技术及其在烟草改良中的应用前景[J];安徽农业科学;2002年02期
5 ;猪快速诊断基因芯片[J];中国供销商情;2005年03期
6 缪海珍,朱水芳,张谦,黄文胜,李瑶,姚文国,毛裕民,谢毅;采用基因芯片技术筛查农作物转基因背景[J];复旦学报(自然科学版);2003年04期
7 邹立扣,王红宁;基因芯片技术检测细菌耐药性[J];中国兽医杂志;2003年12期
8 吴宣,杨泽林,岳华,罗薇;基因芯片的应用[J];四川畜牧兽医;2003年06期
9 包文奇,崔迎旭;基因芯片技术在预防兽医学中的应用[J];河南农业科学;2004年10期
10 耿捷,罗卫,林苗,黄运生,刘勇;基因芯片技术检测新城疫病毒[J];黑龙江畜牧兽医;2004年12期
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1 金旻;戚华兵;黄炜;王小凤;陈林;;基因芯片研究结合FGFR3的核心短肽对小鼠前软骨细胞的作用[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
2 刘全海;;基因芯片和新药研制[A];中国药理学会第九届制药工业药理学术会议论文摘要汇编[C];2000年
3 王文勇;黄晓峰;闫庆国;王伯澐;;激光捕获显微切割技术应用研究新进展[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
4 裴军;;用基因芯片寻找差异表达基因[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5 赖沛龙;杜欣;翁建宇;凌伟;吴穗晶;罗成伟;郭荣;陆泽生;;应用基因芯片筛选硬皮病样慢性移植物抗宿主病相关基因的初步研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
6 孙啸;谢建明;陆祖宏;;高密度基因芯片设计和信息分析[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年
7 贾坤;罗长保;鱼海琼;赵吟;谢凯英;林志雄;李守军;;牛分支杆菌与结核分枝杆菌基因芯片检测探针的筛选[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
8 李轶博;于明;;相位保留小波去噪法及其在基因芯片图像中的应用[A];现代通信理论与信号处理进展——2003年通信理论与信号处理年会论文集[C];2003年
9 裴军;;基因芯片在毒理基因组学研究中的应用[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
10 李红丽;杨忠;蔡文琴;Lawrence;李泽桂;;基因芯片筛选维甲酸(RA)诱导神经管缺陷相关基因的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 季明 徐寿松;基因芯片亮相上海[N];新华每日电讯;2002年
2 国家粮食局研究员 丁声俊;对转基因生物的疑虑和安全管理[N];粮油市场报;2002年
3 记者 刘熙;省一院基因芯片诊断技术获卫生部认证[N];云南日报;2010年
4 南方日报记者 陈枫 通讯员 宋忠雷 彭文斌;省二医应急大楼:全省首家“移动医院” 省妇幼番禺新院:有了地贫基因芯片[N];南方日报;2011年
5 南京农业大学 邵涛 教授;转基因饲料安全生产问题及其应对策略[N];中国畜牧兽医报;2006年
6 周向东;基因芯片:神奇的医生[N];中国医药报;2001年
7 林海慧;共建全国最大基因芯片基地[N];证券时报;2000年
8 姚润丰;未来10年中国转基因生物将增长[N];经济参考报;2006年
9 本报记者 黄胜利;转基因生物商业化种植须完善法律体系[N];中国经济时报;2008年
10 记者  曾浩;市场上大豆油近七成是转基因产品[N];南京日报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐景升;转基因农产品检测基因芯片研制[D];福建农林大学;2004年
2 杨林;猪瘟病毒基因芯片诊断技术的研究及应用[D];中国农业大学;2005年
3 刘雪强;乌头碱逆转耐药性人口腔上皮鳞状癌细胞分子机制研究[D];北京中医药大学;2005年
4 周盛年;电刺激大鼠癫痫模型及基因芯片检测谷胱苷肽-巯-转移酶基因的表达[D];山东大学;2004年
5 许明火;表皮参与瘢痕形成的实验和临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
6 王珍祥;增生性瘢痕的基因芯片分析及意义[D];第三军医大学;2002年
7 祁震宇;人脑胶质瘤中二条差异表达基因的研究[D];苏州大学;2003年
8 刘学端;海底及污染环境中微生物群落分子多样性研究[D];湖南农业大学;2003年
9 孙波;基因芯片技术在子痫前期外周血白细胞差异表达基因研究中的初步应用[D];吉林大学;2006年
10 祁小飞;骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究[D];苏州大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡明;人退变椎间盘基因表达谱的研究[D];第二军医大学;2004年
2 王玉鹏;基于基因芯片的基因表达模式分析[D];厦门大学;2007年
3 戴奇刚;鼻咽癌转移相关基因表达谱的研究[D];广西医科大学;2008年
4 朱利娜;酵母基因芯片的制备及其在热休克基因表达谱研究中的应用[D];第一军医大学;2002年
5 江远;基因芯片技术研究莪术不同成分对HSC-T6细胞基因表达的影响[D];湖北中医学院;2004年
6 宋光辉;应用基因芯片研究同型半胱氨酸对ECV-304细胞基因谱表达的影响[D];郑州大学;2004年
7 沈征;2型糖尿病大鼠建模、基因表达谱与细胞凋亡研究[D];浙江大学;2004年
8 林苗;2型糖尿病大鼠肝脏基因表达谱[D];福建医科大学;2004年
9 李秀萍;应用基因芯片检测奶牛乳房炎主要致病菌的研究[D];山东农业大学;2005年
10 赵文瑾;HBV基因分型芯片的构建及临床初步应用[D];中国医科大学;2006年
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