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《福建农林大学》 2005年
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苏云金芽孢杆菌WB9的研究

黄志鹏  
【摘要】:本文对土壤中分离的苏云金芽孢杆菌WB9菌株的生理生化特性、小菜蛾和甜菜夜蛾的致病力测定、编码活性因子的基因分析、杀虫蛋白基因的克隆和表达、工业培养基的室内摇瓶优化筛选以及茶尺蠖的室内外防治试验等进行了较为系统深入的研究。 采用醋酸钠法加热处理和抗生素的分离方法,对收集自武夷山自然保护区非耕作区的200个土壤样品进行了分离,得到12株苏云金芽孢杆菌菌株,出菌率为6.0%。对WB9菌株的室内致病力测定结果表明其对小菜蛾具有高致病力、对甜菜夜蛾具有较高的致病力。 以库斯塔克亚种的8010和8311菌株以及鲇泽亚种的No.1菌株为对照,对新分离的WB5、WB7和WB9菌株的12项经典生理生化指标进行了测定。测定结果显示WB9和WB5分别与库斯塔克亚种8010和鲇泽亚种No.1的生理生化反应特性表现相同,仅在个别反应上有强弱差异。由此推测,WB9和WB5可能分属库斯塔克亚种和鲇泽亚种。 采用PCR及PCR-RFLP技术对WB9的ICP、VIP、几丁质酶和肠毒素4种活性因子的编码基因进行了分析。结果表明:该菌株含有编码ICP蛋白的cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和cry1Ga 5个cry1基因型,编码Vip3A蛋白的vip3A基因以及编码3种肠毒素的hblA、bceT和entS基因,不含编码几丁质酶的基因。将vip3A、hblA、bceT和entS基因的PCR产物回收纯化后直接测序,利用在线的Blast软件进行同源性分析,前两个基因片段的核苷酸序列与苏云金芽孢杆菌已公布基因序列的相应片段同源性分别为99%和96-98%,bceT基因片段与蜡质芽孢杆菌已公布基因序列的相应片段同源性为97%,entS基因片段与苏云金芽孢杆菌和蜡质芽孢杆菌已公布基因序列的相应片段同源性为94-99%。 设计可扩增出cry1Ab基因完整的开放阅读框(ORF)的引物对F1和R1,通过PCR技术从WB9中扩增出全长的cry1Ab基因。利用高效克隆PCR产物的专
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S476.1

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 林志伟;张海燕;孙冬梅;秦翠红;南大鹏;;黄绿木霉菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2011年09期
2 张灵玲;张永嵘;汤宝珍;吴昌标;张群林;刘雄恩;;生物农药Bt资源库的初步构建[J];福建农林大学学报(自然科学版);2008年01期
3 沙莉;黄振吉;关雄;;不同氮源对苏云金芽胞杆菌产几丁质酶的影响[J];福建农林大学学报(自然科学版);2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 张永嵘;;微生物资源概述[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 冯亮;透明颤菌血红蛋白基因在苏云金芽胞杆菌中的表达及对其发酵特性的影响[D];华中农业大学;2007年
2 吴丽云;利用啤酒废弃物为原料进行Bt液态发酵的研究[D];福建农林大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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9 袁盛勇;朱文禄;陆进;王传铭;薛春丽;孔琼;;莱氏野村菌MZ060806-XW菌株对棉铃虫幼虫的感染效应[J];安徽农业科学;2010年22期
10 林志伟;张海燕;孙冬梅;秦翠红;南大鹏;;黄绿木霉菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2011年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 闫冰;罗绍彬;闫建平;王惠杰;;苏云金杆菌Tm13-14菌株晶体毒素及毒力特性[A];杀虫微生物[C];1992年
3 管玉霞;陈世夫;李德臣;武秀兰;陈英杰;;B.S2362与BtH_(14)混用灭蚊幼虫的室内和野外试验[A];杀虫微生物[C];1992年
4 王安福;陈少莲;韩佩娥;章剑林;桑金隆;;对苏云金杆菌库斯塔克亚种Bt_4菌株的研究[A];杀虫微生物[C];1992年
5 徐加生;郭朗蕉;;苏云金杆菌悬浮乳剂防治玉米螟施药技术探讨[A];杀虫微生物[C];1992年
6 杨进成;刘坚坚;安正云;朱有勇;李成云;陈向东;卢玉娥;李红彦;甸自存;;小麦蚕豆多样性持续控制病虫害与增产效应分析[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
7 潘洁茹;陈丽仙;黄天培;关雄;;荧光差异显示技术在Bt上的初步应用[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
8 张青文;段灿星;徐静;张正伟;杨青芹;;小麦杀虫荧光假单胞工程菌的杀虫效果[A];新世纪(首届)全国绿色环保农药技术论坛暨产品展示会论文集[C];2002年
9 魏巍;贺淹才;刘爱花;;几丁质酶酶活测定方法的研究进展[A];第三届全国工业催化技术及应用年会论文集[C];2006年
10 朱昌雄;蒋细良;田云龙;郭萍;;生物农药研究的最新进展、问题、建议与展望[A];第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张婕;嗜热真菌热稳定几丁质酶基因的克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 李振东;东祁连山高寒草地优势植物内生细菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 刘东;苏云金芽孢杆菌几丁质酶特性分析及其基因启动子序列的确定[D];南开大学;2010年
4 肖亮;地衣芽孢杆菌MY75几丁质酶特性及表达调控元件的研究[D];南开大学;2010年
5 沙莉;苏云金芽胞杆菌几丁质酶活性研究[D];福建农林大学;2011年
6 张群林;源于地衣的苏云金芽胞杆菌分离及对广州管圆线虫生测和活性因子的研究[D];福建农林大学;2011年
7 陶晶;多功能菌剂的组合效应研究及其抑菌物质的特性和分离[D];石河子大学;2009年
8 吴丹丹;苏云金芽胞杆菌YBT-1520热胁迫下的生理变化及差异蛋白质组研究[D];华中农业大学;2011年
9 杨亚军;棉铃虫Cry1Ac抗性相关钙粘蛋白基因突变的鉴定与检测[D];南京农业大学;2010年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郎晓磊;肠道菌对苏云金芽胞杆菌家蚕杀虫活性的作用[D];华中农业大学;2010年
2 薛妍;肠道菌对苏云金芽胞杆菌棉铃虫杀虫活性的作用[D];华中农业大学;2010年
3 逯晋忠;苏云金芽胞杆菌对云斑天牛的抗性研究[D];华中农业大学;2010年
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6 李红美;抗香蕉枯萎病4号小种的枯草芽胞杆菌R31的发酵条件优化[D];华中农业大学;2010年
7 李红;苏云金芽胞杆菌YBT1520杀虫晶体突变株的蛋白质组学分析[D];华中农业大学;2010年
8 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
9 叶晶晶;桑树中产1-脱氧野尻霉素微生物的研究[D];山东农业大学;2010年
10 刘艳菊;发根农杆菌介导的Bt基因Cry8e转化大豆抗蛴螬研究[D];河南师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张迎明;赵继红;伊三悌;杨君;刘从彬;;利用啤酒废水制备微生物絮凝剂研究[J];安徽农业科学;2008年34期
2 常明;周顺桂;卢娜;倪晋仁;;污泥-废糖蜜联合发酵培养Bt生物杀虫剂[J];北京大学学报(自然科学版);2007年06期
3 李军;任健;王洪臣;甘一萍;周军;张帅;;初沉污泥水解酸化试验研究[J];北京工业大学学报;2008年12期
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 鲁松清;苏云金芽胞杆菌对鳞翅目昆虫广谱高毒基因工程菌的构建[D];华中农业大学;1999年
2 王广君;高效广谱苏云金芽孢杆菌工程菌的构建及杀虫晶体蛋白的研究[D];中国农业科学院;2005年
3 张灵玲;苏云金芽孢杆菌LLP29菌株的分离及其对白纹伊蚊作用机理的研究[D];福建农林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 邵志会;苏云金芽胞杆菌的分批发酵动力学[D];华中农业大学;2004年
2 肖祥飞;生物技术产业的发展[D];湘潭大学;2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
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2 张小娟;张意;郑晓娟;钱桂平;刘红;顾晓军;黄志鹏;关雄;张灵玲;;响应面分析法对苏云金芽胞杆菌LLP29-M19漂浮剂的优化[J];福建农林大学学报(自然科学版);2014年03期
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5 谭超;张乃明;;利用新鲜蓝藻藻泥发酵制备苏云金芽胞杆菌杀虫剂[J];农药学学报;2014年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 郭刚;苏云金芽胞杆菌S-层蛋白形成内涵体的研究[D];华中农业大学;2008年
2 束长龙;苏云金芽胞杆菌资源多样性分析与杀虫基因发掘[D];东北农业大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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5 李凤梅;李平;闫敏;郑爱萍;孙惠青;;苏云金芽孢杆菌的筛选和初步鉴定[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
6 孙晓东;朱辉;唐庆华;覃伟权;;琼海市槟榔园苏云金芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
7 吴燕榕;乐黄莺;冯智龙;刘舟;关雄;;苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)营养期杀虫蛋白(VIPs)的初步研究[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
8 苏俊平;葛东华;郭丽伟;宋萍;王勤英;;对鳞翅目害虫广谱高效的苏云金芽孢杆菌的筛选及鉴定[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
9 郭丽伟;宋萍;王华堂;苏俊平;王勤英;;抗东亚飞蝗的苏云金芽孢杆菌的筛选及分析[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
10 張用梅;劉娥英;袁平;張令要;蔡全信;袁志明;;对夜蛾科害虫及蚊幼虫高毒力苏云金芽孢杆菌的分离及其特性[A];’98海峡两岸害虫生物防治学术研讨会论文摘要[C];1998年
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4 科技部;新疆第一个转基因抗虫棉新品选育成功[N];农资导报;2006年
5 记者 张颖 伊洁;农林大学学生喜获“挑战杯”特等奖[N];福建日报;2005年
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7 本报记者  范建;夺回失去的棉花市场[N];科技日报;2006年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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