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《福建农林大学》 2005年
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龙眼梅、美国黑李、台湾甜桃及油木奈PGIP基因同源克隆

朱春林  
【摘要】:龙眼梅(Prunus mume Sieb et Zucc.‘longyan mei’)、美国黑李(P.salicina Lindl.)、台湾甜桃(P.persica (L.) Batsch.)和油木奈(P.salicina Lindl.var.cordata J.Y.Zhang et al.)都是蔷薇科李属的果树,其果实既可鲜食又可加工成果干、果酱和蜜饯等,但都面临一个问题,即采后的果实极易软化,给贮运和加工带来一定困难。为解决这一问题,本研究拟通过同源克隆分离出具有抗软化、抗病虫害等功能的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因,以构建植物表达载体,为培育抗病、耐贮新品种奠定基础。 本论文分别以龙眼梅、美国黑李、台湾甜桃和油(木奈)基因组DNA和cDNA为模板,根据马哈利樱桃和树莓等PGIP基因序列分别设计两对引物(A引物和B引物),进行PCR扩增,均得到这四种果树的基因组DNA和cDNA的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因,其长度分别如下: 1) 以四种植物的基因组DNA为模板,用引物A作为扩增的引物,均得到1192bp的序列;用引物B作为扩增的引物,除台湾甜桃得到953bp的序列外,其它均得到887bp序列; 2) 以四种植物的cDNA为模板,用引物A作为扩增的引物,均得到1045bp的序列;用引物B作为扩增的引物,也得到806bp的序列。 所得到的核苷酸序列通过Blast分析,发现与马哈利樱桃、山杏、苹果及梨等多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的相似性都较高,达70%-99%。 将所得到的核苷酸序列翻译成蛋白质,发现用引物A作为扩增的引物,进行RT-PCR得到的cDNA序列有一个完整的开放读码框(ORF),包含990个核苷酸,编码330个氨基酸。 通过PGIP DNA和PGIP cDNA序列比较及开放读码框分析,表明PGIP的所有DNA序列都包含2个外显子和1个内含子,且内含子都符合GT-AG的规律。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S662

【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 朱春林;龙眼梅、美国黑李、台湾甜桃及油木奈PGIP基因同源克隆[D];福建农林大学;2005年
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