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《福建农林大学》 2006年
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抗井冈霉素的水稻纹枯病菌生物学与生理学研究

吕伟成  
【摘要】:用室内药剂诱导法筛选抗井冈霉素水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)菌株,系统研究了抗井冈霉素菌株的生物学和生理学特性。 抗药性诱导结果,获得了抗井冈霉素水稻纹枯病菌Jgm~r菌株,井冈霉素对Jgm~r的EC_(50)为11.6766μg/mL(y=1.1394x+3.7839,95%置信限为10.4593~13.0356μg/mL)。与出发菌株(EC_(50)=0.3236μg/mL)相比,Jgm~r对井冈霉素的抗药性增长了36.77倍。 生物学特性试验结果表明,Jgm~r的适合度显著低于Jgm~s。主要表现为菌丝生长速率减慢、生长量减少。但在水琼脂培养基等营养较为贫乏的培养基上生长速率与Jgm~s并没有显著差异;在致病力方面,Jgm~s的发病率为98.0%,Jgm~r的发病率仅为34.0%。Jgm~s病情指数为56.0,Jgm~r的病情指数仅为18.5;经继代培养10代后,Jgm~r的抗药性保持稳定,未出现抗药性丧失的现象。 透射电镜观察表明,在井冈霉素的作用下,Jgm~r的形态学和细胞结构发生了一系列的变化:Jgm~r比Jgm~s更早出现不规则的缢缩或膨大;菌丝体原生质蛋白颗粒增多,细胞器消解等异常现象。但无论是含井冈霉素与不含井冈霉素的培养,Jgm~s与Jgm~r细胞核的数量和形态未发现有差异。 生理学试验结果表明,Jgm~s与Jgm~r的粗代谢物都能引起水稻幼茎细胞内电解质外漏,Jgm~s的粗代谢物引起水稻幼茎细胞膜的损伤率为39.61%,Jgm~r引起的损伤率为15.68%;Jgm~r对低葡萄糖渗透压和高葡萄糖渗透压均表现敏感,而Jgm~s仅对高葡萄糖渗透压表现敏感。Jgm~s与Jgm~r在含井冈霉素的PS液体培养基中培养,结果表明经井冈霉素处理,可引起了两菌株菌丝细胞中可溶性电解质外渗,0~120min内电导率随时间的推移均表现出上升的趋势;纤维素酶活性的试验结果表明,Jgm~s纤维素酶活性单位比Jgm~r高出约12个酶活单位;可溶性蛋白电泳表明,井冈霉素处理前Jgm~r在116KD有清析的条带出现,而Jgm~s在116KD无条带出现;井冈霉素处理后,两菌株在116KD都有条带出现;在27KD处,井冈霉素处理前、后两菌株都有条带出现,但Jgm~r出现的条带比Jgm~s明显。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S435.11

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