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《福建农林大学》 2006年
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百合乙烯信号转导系统相关基因cDNA的克隆与序列分析

陈静  
【摘要】:乙烯是植物调控自身生长发育、成熟衰老的一种重要激素。研究表明,大多数百合对乙烯是敏感的,乙烯是百合切花衰老机制的启动因子,是百合切花衰败的重要因素之一。本文以新铁炮百合(L.×L.formolongi Hort.)为材料,采用RT-PCR、RACE等分子生物学技术,从百合花瓣中分离得到编码乙烯受体LERS1基因cDNA全长序列和PLETR1基因cDNA保守区序列,得到了LCTR1基因3’端cDNA序列。首次从分子水平研究乙烯信号转导途径与百合切花衰老的关系,为进一步解决切花采后乙烯的精确调控问题开辟了新途径。主要研究结果如下: 1.建立了百合花瓣的总RNA提取和纯化方法,解决了百合花瓣组织器官内多糖、多酚类物质的干扰问题。 2.采用RT-PCR和RACE方法获得了编码百合乙烯受体的cDNA序列,长度为2324bp,包含1个ORF全长1905bp,编码635个氨基酸,推测分子量约为70.8kD。由该序列推定的蛋白质的氨基端序列存在三个跨膜疏水区、羧基端存在的组氨酸激酶区和一个GAF区,但缺少ETR1蛋白的接受域。与拟南芥的五个乙烯受体比较,推定的LERS1蛋白氨基酸序列的激酶区有乙烯受体所具有的5个基序(H,N,G1,F,G2)中的全部基序,分别位于第351~359、460~471、515~523、530~534和547~552氨基酸残基,其保守序列为:H:MNHEMRTPM;N:LMQIILNVGSNA;G1:VKDTGCGIS;F:IFTKF;G2:GSGLGL。其中N盒与拟南芥中ETR1和ERS1有三个氨基酸发生变化。结构预测与功能分析表明,本研究获得的百合乙烯受体编码序列推定的氨基酸序列具有乙烯受体的典型特征,初步分析表明获得的百合cDNA序列包含编码百合乙烯受体LERS1的全长cDNA基因(lers1)。GenBank登入号为DQ408428。 3.采用RT-PCR方法获得了编码百合乙烯受体的cDNA序列,长度为657bp,其中基因编码区序列长度为657bp,推测分子量为24.5KD。由该序列推定的蛋白质的氨基端序列含有乙烯受体类蛋白都拥有的GAF保守区。初步分析表明,获得的百合cDNA序列包含编码百合乙烯受体,PLETR1,的保守区序列(pletr1)。 4.采用RT-PCR和RACE方法获得了编码百合编码CTR1类蛋白的cDNA序列,长度为1104bp,其中基因编码区序列长度为705bp,编码235个氨基酸,398bp的3′端非编码区,预测分子量为26.95kD。由该序列推定的蛋白质的氨基端序列含有9个丝氨酸/苏氨酸激酶区Raf激酶亚域,其中94~101氨基酸残基是高度保守丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶位点。初步分析表明,获得的百合cDNA序列包含编码百合CTR1蛋白,LCTR1,的保守区序列(lctr1)。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S682.29

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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5 郝海婷;蚓果芥植物资源调查鉴定及ETR1序列的进化分析[D];甘肃农业大学;2013年
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9 陈静;百合乙烯信号转导系统相关基因cDNA的克隆与序列分析[D];福建农林大学;2006年
10 张海霞;采后1-MCP和1-MCP+单果包膜处理对早酥梨黄化的控制及部分机理的研究[D];甘肃农业大学;2009年
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