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蜂胶的免疫增强作用及其在疫苗中的应用

王茹  
【摘要】: 蜂胶是一种具有免疫增强作用的天然物质。本文研究了不同极性溶剂,不同浓度乙醇,不同温度对蜂胶提取率的影响并制备了蜂胶免疫佐剂。本文选用山东本地ND和EDS-76分离株,将其纯化灭活后作为本试验抗原。将该抗原灭活后以一定比例与蜂胶佐剂按沈志强专有技术(know-how)制备鸡ND-EDS76二联蜂胶灭活疫苗。本文进行了该疫苗攻毒试验,测定了疫苗的最小免疫剂量、保护持续期、保存期。本文还进行了疫苗的免疫效力试验,并设有油佐剂组和空白对照组;该试验中采用血凝和血凝抑制试验以及淋巴细胞转化试验方法,对该疫苗免疫后鸡只的体液免疫和细胞免疫水平进行检测。各试验结果如下: 1.不同极性溶剂提取蜂胶所得蜂胶总黄酮含量不同,随着极性的升高,蜂胶总黄酮含量降低。根据溶剂的价格、食用安全性及回收率等因素,选择乙醇作为提取蜂胶的溶剂。当选择乙醇作为提取蜂胶的溶剂时,随着乙醇浓度的提高,上述有效成分的含量亦升高。温度对蜂胶提取率的影响幅度不如浓度那么显著,说明温度不是影响蜂胶提取率的主要因素。 2.本疫苗的攻毒试验结果显示,疫苗安全系数达到100%,最小免疫剂量为0.3ml/只;一次免疫的保护持续期可长达6个月以上;保存期试验结果显示,本疫苗在4℃~8℃保存1年后,保护率仍为100%,室温保存6个月后,保护率在92%以上。 3.经血凝和血凝抑制试验对该疫苗免疫后鸡只的体液免疫水平的检测发现,相对于油佐剂疫苗,该疫苗免疫后产生抗体时间更早,滴度更高,持续时间更长;同时,经淋巴细胞转化试验结果得知,蜂胶组的细胞免疫水平与油苗组、空白对照相比差异极显著,由此可见,蜂胶疫苗可增加脾淋巴细胞刺激原作用下的增殖能力。


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