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《福建农林大学》 2007年
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化感水稻根际土壤中抑草功能的微生物的筛选及其特性的研究

林漩  
【摘要】: 化感水稻作为一种具有抑草作用的特殊种质资源,必然会在大田化感水稻根际周围形成相应特殊的微生态环境,是研究筛选抑草功能微生物的重要土壤之一。本文以化感根际土壤为研究对象,通过平板稀释法分离纯化得到不同类型的微生物菌株,再通过迟播共培的筛选模式,筛选到1株具有抑草能力的菌株A1,经初步鉴定该菌株为黑曲霉属(Aspergillius nige)。对其生长最适培养基及最佳发酵条件进行优化,并对其发酵液的成分进行化学分析。试验结果如下: 1、采用稀释平板培养法进行分离,纯化,共筛选到151株不同类型的微生物菌株,以迟播共培的筛选模式,根据Williamson提出的响应指数IR为指标,经过初筛、复筛得到一菌株,其发酵液抑制率IR为100%,发酵液稀释200倍之后抑制率为55.4%。 2、筛选到具有抑草能力的菌株A1进行了菌落形态观察及显微观察,初步鉴定为黑曲霉(Aspergillius niger)。通过对菌株A1的生长条件实验,结果表明,黑曲霉A1菌株的生长温度范围为:25-35℃;孢子萌发和菌丝生长最适的pH为6.5左右。 3、通过单因素和正交实验对黑曲霉A1液体发酵培养基组成及生长条件优化。结果表示该菌株(A1)在PDA培养基上生长良好。碳、氮、磷和硫等元素是该菌菌丝体生长的必需元素,是影响菌丝生长的重要因子。钾和镁对该菌菌丝有极大的促进作用。缺氮和碳元素明显影响该菌菌落的生长。该菌最适有机氮源是酵母粉,最适碳源是玉米粉,最适碳氮比为40∶1。通过正交试验该菌株的最佳的发酵条件温度为32℃,摇床转速为180rmp/min,pH值4.5,酵母粉2%,玉米粉2%,菌丝干重可达到1.9375g/100ml。 4、通过该菌株(A1)发酵液不同提取液化学成分进行初步分析测定,结果表明,发酵液含有多种物质成分——氨基酸、蛋白质及多肽、有机酸、皂苷、鞣质、酚类物质、黄醌及其甙类、强心甙、内酯、香豆素及其甙类、植物甾醇,三萜等成分。进一步通过GC-MS测试,结果表明,从菌株A1发酵液的挥发性气体中含有有机酸、醇类、酯类、酚类、萜类、醛类等多种成分,其中萜类物质和醇类物质含量较高,分别为38.48%和43.36%。并对菌株A1的发酵液的乙醚萃取液进行化学成分测定,结果表明,A1的发酵液中含有酚醌类物质,烷烃类物质,酯类物质,有机酸。其中烷烃类物质占多数,为23.63%。通过HPLC测试,菌株A1的发酵液中含有柠檬酸,草酸,乳酸。实验表明,该菌株代谢产物化学成分种类较多,成分复杂。其中,酚醌类物质2,6-二叔丁基对甲酚(Butylated Hydroxytoluene)、2,6-二叔丁基苯酚(Phenol,2,6,-di-tert-butyl-)和烷烃类物质正十八烷(C_(18)H_(38))、正二十烷(C_(20)H_(42))、正二十一烷(C_(21)H_(44))、正二十三烷(C_(23)H_(48))等成分同目前所报道的具有化感作用的植物土壤根际有机化合物的成分相吻合,是该菌具备抑草能力的化学基础,具有一定的开发和实际应用前景。最后,作者还对发酵液的化学成分和化感物质之间的关系进行了进一步的讨论。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S451

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【参考文献】
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