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《福建农林大学》 2008年
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枇杷叶多糖分离纯化及生物活性研究

洪雷  
【摘要】: 本文以枇杷叶(loquat leaf)为原料,对枇杷叶多糖的提取、分离纯化、纯度鉴定、生物活性、理化性质、结构分析、生物活性等方面进行了初步的研究,得到如下结论: (1)正交试验结果表明,枇杷叶多糖提取的优化条件为:温度为85℃,固液比1∶60,时间2.5 h;提取三次,醇沉时加入四倍量乙醇。按此优化条件提取,经测定提取枇杷叶多糖中总糖含量为56.7%。 (2)枇杷叶多糖水提取液,经去除淀粉,Sevag法去蛋白质,95%乙醇沉淀,80%乙醇洗涤后,冷冻干燥即得枇杷叶可溶性总多糖。用DEAE-纤维素柱层析,通过蒸馏水和NaCl溶液梯度洗脱,再通过透析、浓缩,冷冻干燥得一个枇杷叶多糖酸性组份.经过Sephadex G-200柱层析,用水洗脱,得一乳白色组分LLPSⅠ。经HPLC鉴定为组分相对单一物质。 (3)体外抗氧化实验表明,枇杷叶总多糖具有较好的抗氧化作用。在总多糖浓度为3.0 mg/mL时,其对羟自由基清除率达69.80%;对超氧阴离子自由基具有一定的清除作用,当浓度达到1.5mg/mL时,清除超氧阴离子自由基率达到58.12%;当多糖浓度为5mg/mL时,对H_2O_2诱导的小鼠红细胞氧化溶血的抑制率可达58.60%;当浓度为5mg/mL时对脂质过氧化作用抑制率达到63.1%。 (4)枇杷叶多糖对分子物质的保护作用结果表明:枇杷叶多糖对DNA链、碱基及DNA脱氧核糖都有一定的保护作用,且枇杷叶多糖的保护作用略高于甘露醇。 (5)枇杷叶多糖对小白鼠免疫功能及抗氧性能结果表明。在小白鼠基础饲料的基础上添加枇杷叶多糖400 mg/kg,600 mg/kg,800 mg/kg。连续饲喂10d,在第11天采血检测小白鼠血清中的免疫指标(IgA、IgG、IgM、补体C3、AKP、ACP),抗氧化指标(MDA、SOD、GSH-PX、T-AOC)。结果:各添加组的免疫指标,抗氧化指标与对照组相比,差异显著(P<0.05),而各添加组间的差异不显著(P>0.05)。这说明了枇杷叶粗多糖可增强小白鼠的免疫性能和抗氧化能力。 (6)通过薄层层析、红外光谱仪、HPIC、气相对LLPSⅠ进行初步分析结果表明:经IR图谱分析显示具有多糖的特征吸收峰,经TLC和GC分析LLPSⅠ单糖组成为甘露糖(mannose)、葡萄糖(glucose)。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S816.7

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