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《福建农林大学》 2009年
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道地药材短葶山麦冬、雷公藤基于RAPD种源鉴别研究

李风涛  
【摘要】: 药材的真伪鉴别和品质评价是临床应用、成药制备、中药科研不可缺少的前提条件。我国药材品种繁多,由于地域的差异,同名异物、同物异名的混淆品种极多,疗效也各不相同。 短葶山麦冬(Liriope muscari (Decne) Bailey)为百合科山麦冬属植物,主要分布于广西、福建泉州等地。具有养阴润肺,益胃生津的功效,用于肺燥干咳,津伤口渴,肠燥便秘等。 雷公藤(Tripterygium Wilfordii Hook.f)是卫矛科(Celastraceae)雷公藤属木质藤本植物,是雷公藤(Tripterygium)属植物中的一种,主要分布在我国长江流域以南山区和东北长白山区。又称为断肠草、山砒霜、南蛇藤,由于毒性大,民间也有用于杀虫、毒鼠等。上世纪60年代开始雷公藤制剂用于治疗炎症、癌症、慢性肾炎、麻风病、系统性红斑狼疮以及用于其他一些皮肤病等疾病的治疗。 本文对福建省内的短葶山麦冬种群和南方7省市的雷公藤28个种源进行基于RAPD的鉴别研究取得的研究成果如下: 1.利用CTAB法提取到了纯度较高的山麦冬DNA,用改进了的CTAB法提取到了质量较好的雷公藤DNA,并分别研究了它们各自的快速提取方法。 2.分别建立了RAPD分析的技术体系,从96个引物中分别筛选出15(短葶山麦冬)、14(雷公藤)多样性、重复性好的引物,最后得到了多态性较好的PCR产物。 3.通过得到的PCR产物,由两个聚类分析软件(POPGEN32、SPSS13.0)得出以遗传距离0.60为分界点可以聚集出三大类,分别是川麦冬、湖北山麦冬和短葶山麦冬。泉州的短葶山麦冬聚集在一起,而仙游的栽植种和野生的种源有较大的遗传距离,没有明显的聚类在一起。在两个聚类图上的结果非常相似,证明了RAPD在山麦冬种源鉴定上具有非常行之有效的结果。 4.短葶山麦冬之间的遗传距离最大的为仙游栽植种与仙游野生种之间,为0.4532,所以我们对于品种的鉴定可以考虑以0.4532为短葶山麦冬品种鉴定的一个终极遗传距离。 5.从RAPD中15个引物所扩增的118(113个多态性位点)位点,这118位点完全可以将这14个山麦冬种质资源区分开来。将这118位点依次排序,把扩增产物的有无分别记为“1”和“0”,建立起了14个山麦冬种质资源的数字指纹码。 6.从雷公藤的两个聚类分析图(POPGEN32、SPSS13.0)上我们得到,云南、贵州和广西的种源很明显的能够完全聚集在一起。湖南的所有种群都聚集在一起,而江西比较分散,主要和福建、湖南两省交叉较多,而浙江主要和福建的种群聚集在一起。 7.雷公藤28个种源的遗传距离在0.0466和0.5028之间,大部分种源之间的遗传距离在0.3000与0.4500之间,遗传距离在区间0.1000-0.2000的种源很少只占到5%以下,0.5以上的仅有一个,就是云南曲靖和湖南湘潭之间。 8.我们参考了雷公藤各省市内的种源遗传距离,认为进行相关的种源道地性鉴定的遗传距离水平为0.2-0.3比较适合,详细的具体数据,应该和当地的种群内的遗传多样性有关。 9.从RAPD中14个引物所产生164(151个多态性位点)个位点,经软件SPSS13.0和POPGEN32分析,表明没有任何两个雷公藤品种完全重合,因此,这164个位点完全可以将这85个雷公藤种质资源区分开来。将这164个位点依次排序,把扩增产物的有无分别记为“1”和“0”,建立了85个雷公藤种质资源的计算机化数字指纹码。 10.RAPD标记可以对短葶山麦冬和雷公藤进行种源鉴别。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R282.5

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【引证文献】
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【参考文献】
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10 曾聪彦;戴卫波;梅全喜;;细辛脑注射剂致不良反应122例文献分析[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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