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《福建农林大学》 2009年
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闽江流域病原性大肠杆菌Ⅰ型整合子检测及抗药性分析

余颖  
【摘要】: 随着抗生素的广泛及不规范使用,细菌的耐药特别是多重耐药问题日趋严重。而获得外源性耐药基因是大多数细菌产生耐药性的原因。具有捕获及表达外来耐药基因能力的整合子-基因盒系统作为新的细菌耐药性传播机制正越来越受关注。基因盒是小的可移动的脱氧核糖核酸DNA分子,携带耐药基因,通常整合到整合子中转录;整合子是保守、可移动的转座子样DNA元件,可以整合耐药基因在细菌之间水平传播,对于细菌间耐药基因的扩散和多重耐药性的产生起重要作用。 本文主要研究了分离自闽江流域的病原性大肠杆菌Ⅰ类整合子的分布情况、其携带耐药基因盒种类和结构情况,以及与耐药性的关系。方法使用整合酶基因扩增法检测Ⅰ类整合子,再扩增部分阳性菌株的基因盒插入区,并结合限制性片段长度多态性分析(RFLP)和DNA测序技术分析整合子可变区基因盒的种类和排列。并依据NCCLS(2003)推荐的纸片扩散法测定了200株大肠杆菌对20种抗生素的耐药性。 在500株大肠埃希菌中检出209株为第Ⅰ类整合酶基因阳性,占41.8%。药敏实验表明,所有供试菌株均有不同程度的耐药性,最少的抗2种抗生素,最高则达到抗16种。Ⅰ型整合子与大肠杆菌的耐药性呈正相关,即整合子阳性菌比整合子阴性菌有更强的耐药性。 耐药基因盒扩增结果显示:37.5% (15/40)整合子阳性菌株可变区扩增阳性,扩增片段大小为0.6~2kb;大小相同的Ⅰ类整合子有相同的酶切图谱,共检出4种不同的可变区。可变区基因盒排列分别为:addA1(编码氨基糖苷类耐药性);dfrA1-aadA1(编码甲氧苄氨嘧啶耐药性和编码氨基糖苷类耐药性);arr-3+dfrA27(编码利福平耐药性和编码甲氧磺胺嘧啶类药物耐药性);tetR(编码四环素耐药性)。插入基因盒以dfrA和aadA基因家族为主。 结论:整合子与大肠杆菌的耐药和多重耐药有关。Ⅰ类整合子广泛存在于闽江河分离的病原性大肠杆菌中,我们应加强对城市和农场污水排放的处理,并减少抗生素在人类、兽医临床和饲料添加剂中的不合理应用。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R450

【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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