茶树内生细菌对茶炭疽病的防病机制研究

【摘要】： 当前茶叶农药残留问题的形势严峻,为缓解此问题本研究根据茶树病害生物防治的研究现状,从茶树体内分离出内生细菌,并筛选出对茶炭疽病等真菌病菌拮抗强的有益内生菌株,并对其防病机理进行研究,以期为茶树病害的生物防治提供理论依据。本试验采用福建主要茶树品种及其有性后代为供试材料,分别探讨了茶树内生细菌的分布规律、有效菌株的筛选及对茶炭疽病防病机制。 1、初步探明了茶树的根、茎、叶中均存在大量的内生细菌及其分布规律:侧根主根嫩茎叶片。器官间内生细菌数量的差异达到显著水平,茶树有性系后代品种器官间内生细菌数量和无性系的变异系数分别为70.80%和31.90%,且品种间的变异系数大于种内;茶树有性系后代的侧根和主根的内生细菌数量多于无性系茶树品种;无性系茶树品种的嫩茎和叶片内生细菌数多于茶树有性系后代。 2、从黄观音、茗科1号、福鼎大毫茶、福鼎大白茶、福安大白茶5个供试品种中分离、纯化出内生细菌菌株共79株,通过平板对峙法最终筛选出对茶炭疽病菌具有一定的拮抗能力、防病效果的茶树内生细菌29株,从黄观音、福鼎大白茶健叶和茗科1号、福安大白茶嫩茎中筛选出5株具有较强拮抗能力的目标菌株。 3、5株目标菌株在室内对茶炭疽病具有明显的抑制效果,平板对峙培养出现明显的抑菌圈,经测定平均抑制率达到60.09%;目标菌株对茶炭疽病菌分生孢子形成的抑制率均为72.23%。 4、通过普通光学显微镜观察的结果表明,目标菌株均可抑制茶炭疽病病菌的菌丝生长,造成菌丝分支增多、顶端和中央膨大破裂、畸变,菌丝呈念珠状或菌丝分支显著增多,且顶端细胞变形膨大聚集成簇。扫描电镜观察结果,受抑制的茶炭疽病病菌的菌丝细胞壁皱缩干瘪,菌丝末端膨大破裂消解,内含物泄漏,细胞原生质大量溢漏,终使细胞崩解和消融,茶炭疽病孢子畸变呈干瘪形状且不萌发。采用凹载玻片培养法,结果表明目标菌株培养液处理茶炭疽病分生孢子,其分生孢子萌发明显受到抑制,初步揭示出茶树内生细菌可能通过分泌多种活性物质以阻碍茶炭疽病菌的菌丝生长和分生孢子形成,并抑制分生孢子的萌发,因此可阻止茶炭疽病菌在茶园的传播,从而降低了该病害的发生程度。