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《集美大学》 2011年
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拟穴青蟹过敏原的性质研究

余惠琳  
【摘要】:近年来食物过敏问题越来越受到人们的关注,每年由于过敏食物引起严重过敏反应的人不在少数,甚至危及生命。国内外的研究表明,由蟹类食物引起的过敏发病率逐渐上升,蟹类中含有两种重要过敏原:原肌球蛋白(tropomyosin, TM)和精氨酸激酶(arginine kinase, AK)。目前对于TM的研究较多,但大多集中在提取纯化及免疫学方面的研究;对于AK而言,则更多集中在酶学性质及分子克隆方面的研究。因此,加强对AK和TM的过敏原性质研究显得十分重要。 本研究以拟穴青蟹为原料,首先对其AK和TM分别进行提取纯化,建立AK和TM的ELISA检测技术,并应用于水产品中AK和TM含量的检测。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(western blotting)及酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法研究AK的理化性质及消化稳定性。其次,采用不同加工处理方法对蟹肉进行处理,分析加工处理对蟹肉TM的消化稳定性及致敏性的影响。最后采用体外模拟胃肠液二相消化实验比较AK和TM的消化稳定性,并对AK和TM的三级结构进行预测。 采用硫酸铵盐析、柱层析等方法对AK进行提取纯化,首先对AK的温度、pH稳定性及消化稳定性作了相关研究,结果显示,AK为热不稳定蛋白,在温度达到46℃后,随着温度的升高,AK逐渐形成多聚体,进而凝聚形成沉淀,即发生了蛋白质变性作用。在强酸性缓冲液(pH 1.0 )中孵育1.5 h后可以发现AK产生了部分降解。参照美国药典中模拟胃、肠液消化实验方法,AK经胃蛋白酶消化1 h后原始条带被完全降解,但AK并不容易被肠液中的胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶降解,且肌浆蛋白中其他蛋白的存在会影响AK的模拟胃、肠液消化特性。其次,以纯化所得AK建立了ELISA检测技术,并对八种不同水产品中AK含量进行了检测。结果显示,甲壳类动物如南美白对虾、斑节对虾和虾蛄中AK的相对含量较高,而软体动物及双壳纲动物中AK含量则较低。 采用等电点沉淀、硫酸铵盐析等方法对TM进行提取纯化,并通过不同加工方法(蒸煮、超声波结合蒸煮、高温高压、蟹肉罐头处理、烹饪处理等)处理蟹肉,参照美国药典中模拟胃、肠液消化实验方法,对处理后蟹肉的TM粗蛋白进行消化,分析其消化稳定性及消化产物的致敏性。结果显示,不同加工处理方法对蟹肉中TM的消化稳定性均有一定影响,其中高温高压处理能在较大程度上促进TM在模拟胃、肠液消化过程中的降解,TM及其消化产物的致敏性也有所降低。在蟹肉罐头加工处理过程中,植酸钠的添加能在一定程度上促进TM的降解,使其更容易被胃液及肠液分解。另外,在蟹类食品烹饪过程中添加适量的醋也能促进TM在模拟胃液中的消化分解。总结几种加工方法,高温高压处理在降低TM过敏性方面最为显著。同样以纯化所得TM建立了ELISA检测技术,对水产品中TM含量进行了检测。结果表明,甲壳类动物如南美白对虾、斑节对虾和虾蛄中TM的相对含量较高,而软体动物及双壳纲动物中TM含量则较低。 最后,对蟹肉粗提液进行了体外模拟胃肠液二相消化实验,并对AK和TM的三级结构进行了预测分析。结果显示,在体外模拟胃肠液二相消化实验中,AK比TM容易被胃蛋白酶降解,而TM则对胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶的消化作用不耐受。此外,TM的三级结构比AK简单,主要为超螺旋结构,而AK则有复杂的空间结构,含有α-螺旋、β-折叠和β-转角,AK和TM三级结构的不同可能导致二者理化性质及消化稳定性方面的差异。 总的来说,本研究分析了蟹类AK的理化性质及消化稳定性,首次证实AK为对热、酸均不稳定的过敏原。重点对蟹类TM的加工特性进行了探索,发现高温高压、植酸钠结合罐头处理、加醋烹饪的加工方法能够促进TM的消化降解及其致敏性的降低。采用体外模拟胃肠液二相消化实验对AK和TM的稳定性进行了比较,明确TM是更为稳定的过敏原。这些结果可望为蟹类过敏原性质及脱敏方面的深入研究提供依据。
【学位授予单位】:集美大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S917.4

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 顾可飞;高美须;李春红;李淑荣;潘家荣;;辐照对虾过敏原生化性质的影响[J];核农学报;2007年02期
2 陈宝宏,朱永义;低过敏性大米的开发[J];粮食与饲料工业;2002年12期
3 李欣;陈红兵;;牛奶过敏原表位研究进展[J];食品科学;2006年11期
4 顾可飞;李春红;高美须;潘家荣;;食物过敏原及检测技术的研究进展[J];食品科技;2006年08期
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1 赵晋;生姜姜辣素的提取及其功能性质研究[D];西南大学;2008年
【共引文献】
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1 张骊,向智敏,吴竞芳,毕丽君;超临界CO_2用于蒜酶失活和大蒜脱臭的研究[J];哈尔滨商业大学学报(自然科学版);1996年02期
2 乔旭光,韩雅珊,张振华,王强,赵文恩;影响大蒜精油提取得率的工艺参数研究[J];农业工程学报;2001年03期
3 乔旭光,张振华,韩雅珊,王强,赵文恩;提高大蒜精油提取得率的酶调控技术[J];食品工业科技;2001年03期
4 曹炜,尉亚辉,翟永功;微波加热脱除大蒜臭味研究[J];食品工业科技;1999年04期
5 乔旭光,张振华,韩雅珊,王强,赵文恩;提高大蒜精油提取得率的酶调控技术[J];食品科学;2001年05期
6 陈能煜,伍睿,陈丽,刘戎,赵立勉,王静,田敏卿;大蒜研究进展[J];天然产物研究与开发;2000年02期
7 梁湘朗,史合群;大蒜素及其开发利用现状[J];现代化工;1997年06期
8 秦永德,陈坚,王颢,张月明,周炳华;蒜氨酸+蒜酶抗肿瘤功效的实验研究[J];新疆医科大学学报;2003年02期
9 秦永德,陈坚,王颢,张月明;蒜氨酸+蒜酶诱导人胃腺癌细胞凋亡及其分子机制的研究[J];新疆医科大学学报;2003年04期
10 苟萍,李燕,王荣,陈坚;蒜粉中蒜氨酸酶的分离纯化及性质测定[J];植物生理学通讯;2004年03期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 常军民;蒜氨酸与蒜酶的制备、鉴定及药物动力学研究[D];新疆医科大学;2003年
2 许克勇;大蒜油逆流超临界CO_2萃取及大蒜多糖提取技术研究[D];西北农林科技大学;2005年
3 李瑜;高蒜素大蒜粉的制备及其生物活性功能的研究[D];江南大学;2006年
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1 李蕾;大蒜绿变机理初探[D];中国农业大学;2005年
2 李燕;新疆鲜蒜中蒜氨酸酶的分离纯化及性质[D];新疆大学;2004年
3 陈彬;大蒜活性物质——有机硫化物的提取[D];北京化工大学;2004年
4 傅强;大蒜素初提物对脂代谢三基因突变小鼠血脂代谢及肝脏生理病变的影响[D];浙江大学;2006年
【同被引文献】
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1 陈华,陈昱,王志红,孙昌盛,康天尝,游丁浩;颤藻粗提物对小鼠肝毒性及SOD活性影响研究[J];中国公共卫生;2002年02期
2 喻海琼;刘志刚;张帆;胡川;;刀额新对虾变应原的分离、鉴定与纯化[J];中国公共卫生;2006年10期
3 焦海峰,尤仲杰,竺俊全,王一农;嘉庚蛸对温度、盐度的耐受性试验[J];水产科学;2004年09期
4 陈珊珊;林雄水;翁凌;曹敏杰;;草鱼胰蛋白酶的分离纯化及性质研究[J];集美大学学报(自然科学版);2005年04期
5 陈天;壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究[J];离子交换与吸附;2002年02期
6 周涛,王海洪,魏国乾,朱方升;壳聚糖固定化胰蛋白酶的制备及理化性质研究[J];宁波大学学报(理工版);1999年01期
7 谭乐义,章超桦,薛长湖,林洪;牛磺酸的生物活性及其在海洋生物中的分布[J];湛江海洋大学学报;2000年03期
8 温燕梅,邱彩虹;吸附—交联法固定胰蛋白酶及在澄清啤酒中的应用[J];湛江海洋大学学报;2001年04期
9 张伟伟;雷晓凌;;短蛸不同组织的营养成分分析与评价[J];湛江海洋大学学报;2006年04期
10 杨萍,邓尚贵,吴玉廉;蛋白酶及其作用方式对制取青鳞鱼肉水解蛋白的影响[J];食品与发酵工业;2003年04期
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1 李振兴;虾(Penaeus Vannamei)过敏原免疫活性的研究[D];中国海洋大学;2006年
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1 刘文杰;锯缘青蟹血淋巴和血蓝蛋白免疫活性研究[D];厦门大学;2006年
2 白振宇;牛奶中主要过敏原的消除及检测技术的研究[D];天津商业大学;2007年
3 郭川;PRRS病毒GP5的基因序列分析及其重组蛋白的应用研究[D];厦门大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 付爱华,尹建元,孙莹,段明郁,刘洁宇,张宏桂;黄精和生姜抗皮肤癣菌活性研究[J];白求恩医科大学学报;2001年04期
2 郭英华,张振贤,关秋竹;姜的研究进展[J];长江蔬菜;2005年09期
3 王慧芳,曾林,赵爱珍,付兴伦,贾世玉;生姜对小鼠血清溶菌酶活性的影响[J];动物医学进展;2001年04期
4 刘成伦,李乐,邓新华,钱瑛;用姜渣从姜黄中分离纯化姜黄油[J];重庆大学学报(自然科学版);2004年06期
5 贾建波;生姜和荸荠皮提取物抗菌作用研究[J];广州食品工业科技;1999年01期
6 张建新;李兰芳;;生姜的药理作用[J];河北医药;1993年06期
7 顾可飞;高美须;李春红;李淑荣;潘家荣;;辐照对虾过敏原生化性质的影响[J];核农学报;2007年02期
8 魏福祥,韩菊,王巧玲,王金梅,程彦海,史英辉;姜酚超临界流体萃取-精馏技术[J];精细化工;2004年04期
9 陈宝宏,朱永义;低过敏性大米的开发[J];粮食与饲料工业;2002年12期
10 陈宝宏,朱永义;木瓜蛋白酶分解大米过敏原的研究[J];粮食与饲料工业;2004年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘晓毅;大豆食源性致敏蛋白的识别、去除及脱敏后加工特性研究[D];中国农业大学;2005年
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1 张守发;贾立军;;羊附红细胞体抗原的分析及初步应用[J];河南农业科学;2007年11期
2 齐楷;贾立军;张守发;梁晚枫;丛艳昭;王娜;金超;;犬附红细胞体抗原分析[J];安徽农业科学;2009年04期
3 赵东;马春骥;李敏;陈晓虎;张旭强;王红燕;;绵羊肺炎支原体与猪肺炎支原体交叉抗原研究[J];黑龙江畜牧兽医;2011年15期
4 许健;储岳峰;高鹏程;赵萍;贺英;剡根强;逯忠新;;我国17株绵羊肺炎支原体分子分型及其菌体蛋白免疫印迹[J];微生物学报;2011年10期
5 李淑霞,呼西旦,符子华,易中,王进成,高梁;绵羊进行性肺炎病毒结构蛋白电泳及免疫印迹分析[J];中国兽医科技;1997年05期
6 苟琳,王印;鳖源嗜水气单胞菌M-96株表面抗原分析[J];水产科学;2000年06期
7 姜秀英;朱江;;重组猪生长激素抗体的制备与纯化[J];淮阴师范学院学报(自然科学版);2006年04期
8 马立安;江涛;张忠明;;拟南芥Ran2小GTP结合蛋白抗血清的制备及其FITC荧光标记[J];华中农业大学学报;2007年04期
9 裴艳涛;孙继国;蒋瑞萍;汪翠琴;边艳青;齐志广;赵宝华;;绵羊肺炎支原体标准株Y98与丝状支原体丝标准株PG3、绵羊肺炎支原体分离株HD-1、标准株FH抗原的差异性研究[J];黑龙江畜牧兽医;2009年06期
10 李晶晶;赵德明;徐广贤;周向梅;尹晓敏;;牛分枝杆菌MPB83基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];中国农业大学学报;2006年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 余惠琳;曹敏杰;蔡秋凤;翁武银;苏文金;刘光明;;不同加工处理对蟹类过敏原的影响[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年
2 李霆;陈村龙;王继德;崔生达;崔丹瑜;郭文;;HSF1基因与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
3 何立;蒋明森;赵琴平;蔡国斌;杨孟祥;易新元;曾宪芳;;血吸虫感染新模型小鼠血清IgG与抗原的免疫印迹分析[A];中国动物学会全国第九次寄生虫学学术讨论会论文摘要集[C];2003年
4 刘全国;魏传忠;马贵平;李冰玲;史喜菊;李炎鑫;刘旭辉;;羊瘙痒病金黄地鼠模型的研究[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
5 张焕相;王永潮;梁■祐;;大鼠再生肝及发育不同阶段中肝细胞着丝点蛋白的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
6 孙培明;吴晓东;赵永刚;刘雨田;王志亮;鲍恩东;;肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
7 夏佳音;张耀洲;;一个家蚕新基因的克隆、表达及抗体制备[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
8 陈鹏;贺俊崎;;NHERF-1介导雌激素调节PTEN蛋白表达的研究[A];第十届全国生化与分子药理学术会议论文摘要汇编[C];2007年
9 刘光明;史千玉;蔡秋凤;潘冰青;翁武银;苏文金;曹敏杰;;日本鳗(Anguilla japonica)胶原蛋白和小清蛋白的过敏原性[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年
10 孔英;顾娟;石昕;朱正美;;LeY寡糖抗原分泌水平与小鼠胚胎发育和着床潜能密切相关[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前7条
1 韩志荣;孕妇不宜多吃的食物[N];安徽经济报;2001年
2 张丽红;腹泻病人的护理[N];农村医药报(汉);2005年
3 张余康;精液为何气味浓[N];医药经济报;2002年
4 ;细胞破壁吸收好[N];上海中医药报;2001年
5 青云;葛根素制剂的研究[N];中国医药报;2003年
6 王海蕴;止泻药使用不当反中毒[N];中国消费者报;2002年
7 皙子 编译;酮缩硫醇粒子有望治疗炎症性肠道病[N];医药经济报;2010年
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1 曹乃清;链格孢霉变应原的实验研究[D];中国协和医科大学;2007年
2 孙舒扬;大曲华根霉(Rhizopus chinensis)固态发酵表达酯合成脂肪酶的研究[D];江南大学;2009年
3 王海涛;脊髓缺血/再灌注损伤上调蛋白α-tubulin、NF-M和NF-L鉴定与功能分析[D];吉林大学;2012年
4 张善勇;急性脊髓缺血/再灌注损伤应激相关蛋白鉴定与功能分析[D];吉林大学;2013年
5 朱战鹏;肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导胶质瘤凋亡的研究[D];吉林大学;2007年
6 宋险峰;急性脊髓缺血/再灌注损伤下调蛋白GFAP和SPNA2鉴定与功能分析[D];吉林大学;2013年
7 张盛周;针对c-Met的重组腺病毒介导的siRNA技术在肝癌基因治疗中的实验研究[D];南京师范大学;2005年
8 毛芝娟;副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus主要外膜蛋白的克隆、表达和免疫原性研究[D];浙江大学;2007年
9 应明真;P300/CBP相关因子在肠型胃癌中的表达及功能研究[D];第二军医大学;2010年
10 蒙学莲;小反刍兽疫病毒血凝素蛋白及其受体的研究[D];中国农业科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余惠琳;拟穴青蟹过敏原的性质研究[D];集美大学;2011年
2 李雪莲;超氧化物歧化酶在酿酒酵母中的分泌表达[D];郑州大学;2005年
3 黎柳君;青稞β-1,3-葡聚糖酶的纯化、性质及抗体制备[D];四川大学;2006年
4 杨璞;颞叶癫痫大鼠模型PSD中HSP27的表达[D];中南大学;2009年
5 边尧;嗜群血蜱Hc-23基因的克隆与原核表达研究[D];四川农业大学;2009年
6 张兴虎;嗜肺军团菌抗原组分及γ干扰素抗其感染的研究[D];苏州大学;2005年
7 王欣欣;草鱼免疫球蛋白重链基因的克隆[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2006年
8 李鸿皓;遗传性包涵体肌病非折叠蛋白反应及内质网应激蛋白表达分析[D];山东大学;2008年
9 李军华;柱状黄杆菌嗜热菌蛋白酶基因的鉴定[D];南昌大学;2007年
10 王爱红;去氨微乳清除结肠氨及其智能化结肠定向作用的初步研究[D];大连医科大学;2009年
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