收藏本站
《集美大学》 2015年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

孔雀石绿胶体金免疫层析试纸条研制及在水产品中的应用

孙雪珂  
【摘要】:孔雀石绿残留在水产品中和环境中存在时间长,具有毒性高,残留高及潜在的致畸、致癌、致突变等危险性,美国、欧盟对水产品中孔雀石绿的使用都有明确的规定,我国已将孔雀石绿列在禁用兽药名单中,禁止用于全部食品动物中。目前,孔雀石绿的含量一般都是使用仪器进行测定,但这些方法测定流程复杂、耗时长、成本高。试纸条测定具有易操作,费时短,成本低等优点,适于现场检测和筛查。本试验以孔雀石绿为研究对象,利用胶体金免疫层析技术,研制出用于检测孔雀石绿的免疫层析试纸条,并将其用于水产品检测。采用磁力搅拌器加热方法,用柠檬酸三钠还原氯金酸,制备出了不同粒径的胶体金溶液,粒径在26 nm左右的胶体金标记孔雀石绿抗体的显色效果较好,最适p H为0.2 mol/L K2CO3添加量为4μL/m L,抗体加入量为15μg/m L,稳定剂加入量为30μL/m L的10%BSA。选用样品垫GL-b01、金标垫GL0194、吸水垫H5076和Millipore公司135硝酸纤维素膜为试纸条材料,金标抗体稀释4×包被于金标垫上,检测线和质控线上分别用2.5 mg/m L的孔雀石绿-BSA结合物和0.1 mg/m L的羊抗鼠Ig G平行定量喷涂于硝酸纤维素膜上。试纸条对孔雀石绿标准品用目测比色法的检出限为10 ng/m L。试纸条对无色孔雀石绿、氯霉素、甲基蓝、四环素等物质无交叉反应,与结晶紫交叉反应率为66.7%,特异性和稳定性较好。应用试纸条检测水产品阴性样品,假阳性率为0%;阴性样本不同加标量的测定结果与液相色谱-串联质谱仪测定结果符合性较好,回收率为60%~80%,在实际样品测定时,孔雀石绿浓度大于25 ng/g时,试纸条能准确测定;当阴性样本孔雀石绿添加浓度为50 ng/g时,试纸条测定结果假阴性率为0%。该试纸条检测结果稳定、易于识别,可作为初步筛选孔雀石绿在水产品中残留的有效手段,也可以为其它农残兽残快速检测试纸条的研制提供参考。
【学位授予单位】:集美大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:O657;TS254.7

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 王龙生;郭仁舆;;胶体金标记术的原理与应用[J];解剖学通报;1990年02期
2 彭剑淳,刘晓达,丁晓萍,付占江,王全立;可见光光谱法评价胶体金粒径及分布[J];军事医学科学院院刊;2000年03期
3 邱绪建;林洪;王联珠;江洁;王建华;;孔雀石绿及其代谢物无色孔雀石绿在鲫鱼肌肉中的代谢规律[J];中国海洋大学学报(自然科学版);2006年05期
4 孙满义;杨贤庆;岑剑伟;李来好;;水产品中孔雀石绿的研究进展[J];食品工业科技;2009年02期
5 陈捷平,高秀琴,张夏英;双单抗的免疫层析一步法用于早妊诊断的研究[J];生物化学杂志;1996年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 孙秀兰;食品中黄曲霉毒素B_1金标免疫层析检测方法研究[D];江南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 陈发荣;氯霉素胶体金试纸条的研制[D];南昌大学;2011年
2 高鹏;莱克多巴胺胶体金试纸条的研制及生产线设计[D];南昌大学;2011年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姚丽萍;高银祥;祖元刚;;流式细胞术在植物学研究中的应用[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年09期
2 王清,吴振廷,王学林,唐庆峰,金涛,林华峰;免疫胶体金标记技术及其在植物保护上的应用前景[J];安徽农业科学;2005年03期
3 钱科蕾;胡鲲;杨先乐;;Na~+-Ti(SO_4)_2法检测鲫鱼组织中孔雀石绿残留[J];安徽农业科学;2009年12期
4 廉宜君;陈韩英;李炳奇;杨金凤;袁军;;沙枣多糖对免疫抑制小鼠的调节作用[J];安徽农业科学;2009年16期
5 于淑池;沈燕霞;池玥兰;吴霞;;孔雀石绿对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响[J];安徽农业科学;2011年28期
6 杨杰,姜先荣,何晓淮;胶体金——SPA复合物的制备[J];安徽教育学院学报(自然科学版);1999年01期
7 孙大康;李柏青;;电泳迁移率变动分析化学发光法检测T细胞NF-κB活性[J];蚌埠医学院学报;2006年01期
8 王静,王秋波,鲁迎年;免疫印迹技术检测ENA抗体方法的建立及应用[J];青岛大学医学院学报;2002年04期
9 王晓俭;两种不同制备酶标记结合物方法的比较[J];青岛大学医学院学报;2003年01期
10 虞伟,廖建辉,葛存旺,顾宁,武建国;胶体金纳米粒子及其蛋白标记物在电场中的泳动行为研究[J];微纳电子技术;2003年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周正新;;生脉片对IL-1介导体外培养软骨细胞凋亡的影响[A];中医药理论与应用研究——安徽中医药继承与创新博士科技论坛论文集[C];2008年
2 甘居利;李娟;;化学抗生素对鱼类的毒性和残留效应[A];中国南方十六省(市、区)水产学会渔业学术论坛第二十六次学术交流大会论文集(上册)[C];2010年
3 方洪波;;胜利油田三次采油采出液处理技术进展[A];山东石油学会石油天然气注水及水处理技术中心站油田注水及水处理技术研讨会论文集[C];2008年
4 高露姣;蔡友琼;姜朝军;钱蓓蕾;于慧娟;徐捷;;孔雀石绿及其主要代谢产物在欧洲鳗鲡肌肉中的蓄积及消除规律[A];2006年上海市动物学会学术年会论文集[C];2006年
5 曾立波;陈连康;胡小龙;陈亮;王学生;张玉荣;张润生;;氯胺酮胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板的研制[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(下册)[C];2006年
6 樊丽琴;王维民;;水产品中的孔雀石绿的分布及检测[A];2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C];2007年
7 韦广琴;李中安;周常勇;;免疫胶体金技术在植物病理学研究中的应用综述[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
8 王胜乐;王铁成;李元果;于志君;丁洁;许薇薇;忻悦;岳秀芳;王铮;郑学星;杨松涛;黄耕;赵永坤;高玉伟;夏成柱;;水貂犬瘟热动物模型的建立[A];第十届中国实验动物科学年会论文集[C];2012年
9 谢世琦;孟宪荣;栗绍文;王倩;潘秀华;张超;张丽媛;;肠出血性大肠杆菌O157:H7胶体金检测试纸条的研制[A];中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十二届学术研讨会论文集[C];2012年
10 王芳;才子斌;王毅;徐煌;侯立中;颜炜群;;乳腺癌HER-2/neu肽疫苗的实验研究[A];增强自主创新能力 促进吉林经济发展——启明杯·吉林省第四届科学技术学术年会论文集(下册)[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王冰;EB病毒潜伏膜蛋白2A特异性CTL表位筛选及免疫功能研究[D];南京医科大学;2009年
2 张宾;大豆胰蛋白酶抑制剂的制备、理化性质和抗黄曲霉作用[D];中国海洋大学;2010年
3 陈克研;猪血凝性脑脊髓炎免疫层析检测试纸及其灭活疫苗的研制[D];吉林大学;2011年
4 张海华;日粮蛋白质和蛋氨酸水平对水貂生产性能及毛皮发育的影响[D];中国农业科学院;2011年
5 高苇;我国黄瓜棒孢叶斑病的病原学及诊断技术的研究[D];中国农业科学院;2011年
6 管笛;黄曲霉毒素M_1单克隆抗体及检测技术研究[D];中国农业科学院;2011年
7 于成峰;钢厂冷轧废酸再生中氧化铁粉的提纯与应用研究[D];华东理工大学;2011年
8 张丽;传统发酵牦牛奶中益生乳杆菌筛选及其免疫调节功能研究[D];甘肃农业大学;2011年
9 陈静云;沥青路面再生方法的试验研究[D];大连理工大学;2011年
10 孙凤霞;三聚氰胺单克隆抗体制备及其高灵敏快速检测技术研究[D];江南大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 闫娜利;化学发光酶免疫分析法测定磺胺对甲氧嘧啶[D];郑州大学;2010年
2 金晶;牦牛血IgG分离纯化工艺研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 陈珠丽;胶体金免疫层析技术快速检测水中微囊藻毒素-LR的研究[D];浙江大学;2011年
4 沈琦;山苍子精油对鱼类致病性水霉属真菌的抑制研究[D];福建师范大学;2010年
5 张立静;TEM1型β-内酰胺酶免疫胶体金层析检测方法的建立[D];河北农业大学;2011年
6 刘金华;穿膜肽—抗体—蛋白微球偶联物的制备及鉴定[D];广西医科大学;2011年
7 林若芸;重组人端粒酶逆转录酶基因表达载体的构建及检测端粒长度新方法初探[D];广西医科大学;2011年
8 赵杰;纳米银导电浆料的制备及应用研究[D];武汉理工大学;2011年
9 王加印;铜绿假单胞菌制剂作用小鼠胰腺癌移植瘤的实验研究[D];昆明医学院;2011年
10 鲁文广;极限强度训练对大鼠肝脏超微结构及功能的影响[D];北京体育大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张海棠;王自良;王艳荣;李学武;张改平;;莱克多巴胺的毒性及其残留免疫学检测技术研究进展[J];安徽农业科学;2006年18期
2 陶俊钰;电泳技术在药物分析中的应用[J];安徽医药;2005年02期
3 杨振修;胶体金在标记免疫测定中的应用[J];标记免疫分析与临床;1997年02期
4 王声瑜;怎样有效选用含氯消毒剂和孔雀石绿[J];北京水产;1999年03期
5 卢迈新,黄樟翰,肖学铮,吴锐全,谢骏;美洲鳗对几种药物的敏感性研究[J];淡水渔业;2000年05期
6 张漫;罗晓琴;;莱克多巴胺残留检测方法[J];动物保健;2006年09期
7 张长弓,金颜辉,黄印尧,方莹,梁全顺;口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立[J];福建畜牧兽医;2004年01期
8 杨方,陈国南;高效液相色谱法同时检测水产品中氯霉素、甲砜霉素与氟甲砜霉素残留[J];福建分析测试;2005年01期
9 郑晶,黄晓蓉,汤敏英,陈彬,林杰;福建出口水产品氯霉素残留检测情况分析[J];福建水产;2005年01期
10 王敬政,贺吉香,江崇球;芦荟大黄素与血清白蛋白的相互作用[J];分析化学;2001年07期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 王选年;β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的免疫特性及中毒病理学研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
2 谢光洪;黄曲霉毒素B1免疫层析试纸条快速检测方法的研制[D];吉林大学;2008年
3 彭伏虎;禽流感与新城疫胶体金免疫层析快速检测技术及初步应用研究[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 龚朋飞;孔雀石绿单克隆抗体的制备及其检测试剂盒的初步研制[D];湖南农业大学;2005年
2 杜根成;分泌抗氨苄青霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[D];河南农业大学;2005年
3 李平;利用胶体金免疫层析技术快速检测柑橘溃疡病菌[D];西南大学;2006年
4 杨小姣;胶体金免疫层析快速检测氯霉素技术研究[D];西北农林科技大学;2007年
5 倪同浩;链霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[D];扬州大学;2009年
6 王玮;氯霉素残留快速检测胶体金试纸条的研究[D];天津科技大学;2008年
7 杨丽丽;动物源性食品中氯霉素快速检测的ELISA方法研究[D];华中农业大学;2009年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 何田田;薛强;邹明强;张然;段潜;赵佳;韦娜;;三聚氰胺快速检测试纸条评价[J];化学试剂;2012年12期
2 孙京新;仇宏伟;李凤梅;李鹏;甄天元;张效伟;;食品中硝酸盐快速检测试纸条的设计与应用[J];食品科技;2008年07期
3 张学军,赵桂芳,朱文清,程淑华,张艳,陈晓群,王黎民;采用试纸条-反射仪法测定蔬菜可食部位硝酸盐含量[J];宁夏农林科技;2003年05期
4 余宇燕;张淑玲;邹艳辉;邱亚利;;五氯酚免疫层析检测试纸条的研究[J];分析测试学报;2014年07期
5 孙京新;李凤梅;;食品中硝酸盐酶法快速检测试纸条的设计与应用[J];食品科学;2008年12期
6 肖治理;曾文亮;王弘;沈玉栋;孙远明;杨金易;;氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[J];食品与机械;2013年04期
7 张晓丽;颜露;向军俭;邹军辉;唐勇;;呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮单克隆抗体的制备、鉴定与胶体金免疫层析试纸条的研制[J];食品工业科技;2013年13期
8 李怀明;赖卫华;许恒毅;徐波;罗薇;魏华;王水兴;熊勇华;;基于荧光硅球的克伦特罗快速定量免疫层析试纸条的研制[J];分析化学;2011年11期
9 罗晓琴;刘琳;刘文芳;崔彦虎;余厚美;;乳品中β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条研制[J];食品工业科技;2012年03期
10 曾文亮;杨金易;王弘;沈玉栋;罗林;曾道平;徐振林;孙远明;;苯甲酸免疫胶体金快速检测试纸条的研制[J];食品工业科技;2013年16期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘利洪;李敬;姜天华;黄小英;曾传蓉;;HCG试纸条在定量检测血HCG中的过筛作用[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
2 蒲晓允;幕之勇;;快速检测蔬菜变质试纸条的研究[A];第一次全国中西医结合检验医学学术会议暨中国中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会论文汇编[C];2014年
3 李莉;逄大欣;任林柱;张莉影;李占军;欧阳红生;;抗人血白蛋白单克隆抗体的制备及其免疫金标试纸条的研制[A];全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编[C];2006年
4 梁有志;尹丽萍;杭柏林;钱琨;金文杰;秦爱建;;禽白血病抗原快速检测试纸条的研制及其初步应用[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 李雪;武玉东;张健;宫晓群;董春红;常津;;基于量子点标记的荧光免疫层析试纸条的快速检测方法[A];天津市生物医学工程学会第三十四届学术年会论文集[C];2014年
6 李姮;;基于荧光微球标记的腐马菌素B1快速定量检测免疫层析试纸条研究[A];中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议论文集[C];2012年
7 张巧玲;;84消毒液对尿液试纸条分析的影响[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年
8 何素平;赵静;羿国香;刘威;邓艾兴;南铁贵;李召虎;何钟佩;王保民;;Bt毒蛋白免疫金标试纸条的制备与应用[A];中国棉花学会2006年年会暨第七次代表大会论文汇编[C];2006年
9 张成福;张子玉;;PAN试纸条的制取及精斑检测[A];首届中国法医物证学术交流会论文汇编[C];1993年
10 王艳华;张德林;李学瑞;李克生;才学鹏;;检测弓形虫抗体免疫胶体金快速试纸条的研制[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 记者魏公铭;食品安全快速检测技术又添新法[N];中国食品报;2011年
2 记者 叶桂华 通讯员 刘月青;医药城首个省科技计划项目通过验收[N];泰州日报;2009年
3 本报记者 张红梅 通讯员 郑建;“威高集团”多管齐下借智引才[N];威海日报;2006年
4 国家外来动物疫病诊断中心 李林 刘雨田 李金明 陈义平 王志亮;规避疯牛病巨大风险的技术支撑[N];中国畜牧兽医报;2006年
5 ;自行测血糖四注意[N];医药导报;2006年
6 魏云霞;乳制品抗生素残留实现快速检测[N];中国食品安全报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 王元凯;玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及高通量定性、定量检测技术的研究[D];上海交通大学;2014年
2 黄志兵;1、红曲菌两种新的荧光代谢产物的研究 2、脱氧雪腐镰刀菌烯醇胶体金免疫层析试纸条的研制[D];南昌大学;2009年
3 何丽珊;青蒿琥酯与双氢青蒿素试纸条的制备及油菜素内酯基因工程抗体的初步研究[D];中国农业大学;2015年
4 葛晨晨;痕量铜离子检测方法以及检测组蛋白甲基化试纸条的构建[D];中国科学技术大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卢怡竹;尤氏泰勒虫TuIP、Tu88蛋白特性分析及其应用[D];中国农业科学院;2015年
2 郭然;水产品中四环素类药物胶体金免疫层析试纸条的研制[D];集美大学;2015年
3 梅彬;水产品中恩诺沙星胶体金快速检测试纸条的研制[D];集美大学;2015年
4 曹爽;磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条的研制[D];集美大学;2015年
5 孙雪珂;孔雀石绿胶体金免疫层析试纸条研制及在水产品中的应用[D];集美大学;2015年
6 马静;盐酸克伦特罗胶体金免疫层析试纸条制备与应用[D];集美大学;2015年
7 倪同浩;链霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[D];扬州大学;2009年
8 段静;现场检测重金属离子的超高灵敏试纸条研究[D];宁波大学;2012年
9 杨贤;内控核酸试纸条方法的建立及其在乙型肝炎病毒检测中的应用研究[D];南京医科大学;2011年
10 张明;磺胺甲噁唑胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[D];新疆农业大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026