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《集美大学》 2009年
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鳗鲡肠道蛭弧菌的分离及其在预防水产养殖细菌性疾病的应用研究

张志祥  
【摘要】: 无菌采取鳗鲡肠道内容物,以多发性水产动物疾病的病原菌嗜水气单胞菌为宿主,从样品中分离到一株对其它细菌有较强裂解能力的细菌。以模式菌株蛭弧菌109J为参考,经形态学和生化鉴定试验,判断该菌为蛭弧菌,并将此菌命名为Bdm4。蛭弧菌Bdm4为短杆状的革兰氏阴性细菌,其大小约为0.3~0.4μm×1.2~1.5μm;菌体有单根的极生鞭毛。研究蛭弧菌Bdm4的生物学特性发现,其在10℃~35℃均能够生长,最适生长温度为28℃,当温度低于20℃或高于30℃时生长速度明显降低。Bdm4最适合的生长pH范围在7~8之间,当pH低于4基本不生长。Bdm4在NaC1浓度为5%以下的培养基中均能够生长,最适生长盐度在1%左右;当NaCl含量在2%以上时,蛭弧菌的出斑数随着盐的浓度增加而减少。蛭弧菌Bdm4对试验所选取的多种海淡水致病菌均有较强的裂解能力,其中对菌悬液中溶藻弧菌的裂解率可达98%;对所选用的益生菌则不能裂解,但对加热致死的枯草芽孢杆菌均有裂解作用。 用菌浓度为106pfu/mL的蛭弧菌Bdm4菌悬液灌服鲫鱼,进行安全性试验;试验组和对照组鲫鱼均健康存活,证明该菌对鲫鱼安全无毒。通过对鲫鱼浸泡浓度为104pfu/mL的Bdm4或投喂浸泡106pfu/mL Bdm4的饵料,可从鲫鱼的体表、鳃和肠道中检测到大量的蛭弧菌,检出量极显著地高于对照组。再以爱德华氏菌感染试验组鲫鱼,结果显示其体表、鳃和肠道中爱德华氏菌每天的检出量均显著低于对照组的检出量,表明蛭弧菌Bdm4对鱼体有保护作用。用Bdm4投喂黄鳍鲷并检测其肠道主要菌群变化发现,试验组的大肠杆菌和弧菌的检出量较对照组的则有极显著的降低,而乳酸杆菌检出量则相对高于对照组。在加入弧菌的模拟养殖水中投入Bdm4后,水中的总菌数和弧菌数下降速度均明显高于对照组。 拌料投喂鲤鱼和黄鳍鲷Bdm4,再分别用嗜水气单胞菌和溶藻弧菌进行感染,试验组的存活率分别为65%和55%,对照组的存活率都只有35%;通过浸泡的方法预防白对虾的副溶血弧菌病和九孔鲍的消化盲囊肿大病,试验组的存活率分别为45%和67.5%,而对照组存活率分别只有17.5%和40%。蛭弧菌Bdm4对水产动物细菌性疾病有一定的预防作用。用嗜水气单胞菌和副溶血弧菌分别感染鲤鱼和白对虾,发病后用Bdm4治疗,试验组和对照组的存活率均很低,且无明显差异;蛭弧菌Bdm4不能用于治疗水产动物疾病。 本研究结果表明,蛭弧菌Bdm4对常见水产致病菌有较强的裂解能力,且可很好地预防水产动物细菌性疾病的发生,是一株应用前景良好的益生菌。
【学位授予单位】:集美大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S948

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