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全反式维甲酸及三氧化二砷诱导肝癌细胞株HepG-2凋亡与胞内钙相关性研究

黄志锋  
【摘要】:目的通过观察不同浓度全反式维甲酸(ATRA)与三氧化二砷(As203)单独或联合作用于人肝癌细胞株HepG-2细胞,检测其体外生长增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化,探讨其诱导肝癌细胞凋亡可能机制。 方法分别及联合应用不同浓度的ATRA、As203处理HepG2细胞,用甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定不同作用时间细胞增长抑制率;流式细胞仪(FCM) Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率的变化;采用荧光探针技术(Fluo-3),应用激光共聚焦显微镜,测定细胞内[Ca2+]i的变化。 结果①ATRA、As203对人肝癌HepG-2细胞增殖有抑制作用,抑制率与药物浓度、作用时间呈正相关,联合用药优于单独用药;②ATRA、As203能够诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡,随药物作用时间的延长、药物浓度的增高,细胞凋亡率逐渐增高,联合组更明显;③作用时间为24h、48h时,细胞内Fluo-3荧光强度与药物浓度、作用时间呈正相关,联合组荧光增强更明显,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01),而作用时间至72h时,荧光强度又恢复至正常水平(P0.05)。 结论①ATRA、As203能够诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡,其诱导凋亡分子机制可能与细胞内钙离子浓度变化有关。②ATRA、As203体外联合应用有协同抗肝癌作用,为动物及临床试验提供依据。


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