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《福建医科大学》 2012年
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shRNA沉默FAK基因抑制胃癌生长及转移的体内实验研究

刘先伟  
【摘要】:目的:研究FAK基因沉默后裸鼠胃癌模型体内肿瘤生长及转移的变化。 方法:培育SGC-7901细胞(空白对照组);转染FAK-shRNA慢病毒载体的SGC-7901细胞(干扰实验组);转染阴性对照shRNA慢病毒载体的SGC-7901细胞(阴性对照组);在G418浓度为600ug/ml的条件下筛选获得稳定转染的细胞株;体外用Western Blot方法检测三组细胞FAK蛋白的表达;将裸鼠随机分为6组,采用三组细胞反复传代,接种到裸鼠体内,各建立人胃癌裸鼠皮下移植模型和原位移植模型,观察裸鼠体内肿瘤生长及转移情况;用RT-PCR,免疫组织化学染色检测瘤体FAK的表达情况。 结果: 1.Western Blot检测,干扰实验组FAK蛋白较阴性对照组、空白对照组明显减少。 2.裸鼠皮下移植肿瘤生长大小:干扰实验组(1.474±0.9840g)与阴性对照组(3.134±0.3299g)、空白对照组(2.687±0.3827)比较,差异有统计学意义(P0.05);阴性对照组和空白对照组比较,差异无统计学意义;裸鼠原位肿瘤模型体内转移情况:干扰实验组肝脏转移1只,无腹腔转移;阴性对照组肝脏转移6只,腹腔转移4只;空白对照组肝脏转移5只,腹腔转移4只;干扰实验组与阴性对照组和空白对照组有显著统计学差异。 3.瘤体RT-qPCR检测,干扰实验组FAK的mRNA明显低于阴性对照组和空白对照组。 结论: 1.FAK-shRNA能明显抑制胃癌SGC-7901中FAK的表达; 2.在裸鼠内体,FAK-shRNA显著降低胃癌裸鼠移植瘤瘤体FAK基因的mRNA转录; 3.FAK基因沉默后能抑制裸鼠体内胃癌的生长及远处转移。
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R735.2

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