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《福建医科大学》 2017年
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肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在皮肤中的功能研究

向建  
【摘要】:研究目的:本课题旨在通过皮肤组织特异性的小鼠敲除模型,在分子、细胞以及动物水平上深入地研究Pin1调控皮肤干细胞维持、增殖以及分化的功能,从而探索皮肤干细胞维持、激活以及皮肤生长发育的机理,并评估Pin1对皮肤癌的发生发展以及转移的影响。研究方法:1.免疫组织化学和免疫荧光染色观察Pin1在小鼠皮肤以及人皮肤癌组织中的具体定位情况。2.利用皮肤组织Pin1特异性敲除小鼠观察Pin1对小鼠表皮分化发育,毛发生长以及皮肤癌发生发展的影响,原代细胞克隆形成实验观察Pin1对小鼠皮肤干细胞干性的影响。3.免疫染色,Western blot及荧光定量PCR检测Pin1在小鼠不同毛发生长周期和皮肤癌中的表达情况。4.SCC13和A431皮肤癌细胞系敲减Pin1,研究Pin1对皮肤癌细胞增殖、迁移、克隆形成及裸鼠成瘤能力的影响。5.Western blot筛选Pin1调控的相关蛋白,寻找Pin1调控皮肤发育,伤口愈合以及皮肤癌发生发展等的相关蛋白和信号通路。研究结果:1.正常皮肤中,Pin1主要位于皮肤上皮以及毛囊所在区域。皮肤癌中,Pin1主要位于肿瘤干细胞所在区域。2.Pin1敲除不影响小鼠皮肤表皮的分化发育,轻微的影响小鼠的毛发生长和皮肤干细胞干性,但显著的抑制了DMBA/TPA引起的皮肤癌的发生和发展。3.Pin1的表达量在小鼠毛发的生长期升高,在静止期降低,并小鼠随着年龄的增长逐渐降低;相对于正常组织,Pin1在皮肤癌组织中表达上调。4.敲减Pin1后的SCC13细胞在增殖,迁移以及裸鼠成瘤能力等各方面减弱;敲减Pin1显著的抑制A431细胞的裸鼠皮下成瘤能力。5.Cox2可能作为Pin1的下游蛋白来调控皮肤癌的发生与发展。
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R739.5

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