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《福建医科大学》 2003年
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荧光定量PCR检测WT1 mRNA在白血病的表达与意义

林寿榕  
【摘要】: 目的 建立WT1 mRNA荧光定量PCR方法,应用该PCR方法检测急性白血病和慢性粒细胞白血病患者WT1 mRNA转录水平,探讨WT1基因与急性白血病和慢性粒细胞白血病病程的关系。对部分化疗,异基因骨髓移植后残留白血病(MRD)病例进行WT1 mRNA动态监测,探讨能否作为检测残留白血病可靠方法,为急性白血病和慢性粒细胞白血病临床治疗提供有价值的信息。 方法 建立荧光定量PCR进行特异性、敏感性和重复性试验,用重组质粒绘制WT1标准曲线。应用建立的PCR方法对47例急性白血病(AL)、39例慢性粒细胞白血病(CML)和10例正常健康人的外周血或骨髓标本进行WT1基因的检测。 结果 1、荧光定量PCR循环阈值(C_T)与该模板的起始拷贝数(N_0)的对数存在线性关系,Y=-3.831X+43.54,r=-1.00。高和低值(7.0×10~6Copies/μ1和2.0×10~3Copies/μ1)的绝对值批内和批间CV值分别为8.96%、13.2%和9.54%、18.4%,C_T值的CV值分别为0.58%、1.03%和0.64%、1.13%。灵敏度为1:10~4。 2、检测45例初发急性白血病(AL)中35例WT1 mRNA阳性(阳性率77.8%),其中27例初发急性粒细胞白血病(AML)中有24例阳性(88.9%),18例初发急性淋巴细胞白血病(ALL)中有11例阳性(61.1%)。2例缓解急性白血病均为阴性。39例慢性粒细胞白血病(CML)中慢性期21例有8例阳性(38.1%),加速期和急变期17例均为阳性(100%),1例异基因骨髓移植后WT1 mRNA持续为阴性。 结论 1、我们所建立的WT1基因的荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,是一种在监测缺乏特异性克隆标志白血病的MRD中有希望的工具。 、实验结果显示脚了基因在急性自血病表达率达77.8%。 、‘漫性粒细胞白血病脚7的表达与病程进展相平行,在慢性期砂77表达低, 急变期表达水平增高。高表达可预示急变。
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R733.7

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 李新波,赵小松,田德志,朱依纯,姚泰;一种PCR产物克隆的新方法——T-A克隆法[J];生物化学与生物物理进展;1999年02期
2 段卫明,陈子兴;WT1介导的转录调控通路与白血病[J];中国实验血液学杂志;2002年04期
3 王玲,傅建新,王玮,陈子兴;竞争性RT-PCR定量检测WT1基因表达方法的建立及初步应用[J];中华血液学杂志;2001年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高劲松,马刚,仝明,陈佩毅,王传华,何蕴韶;荧光定量RT-PCR检测mdr-1基因表达[J];癌症;2000年03期
2 施宗高,许良中,药锦娟,杨文涛,朱伟萍;PCR克隆技术构建抑癌基因NOEY2真核表达载体[J];癌症;2001年01期
3 彭培建,赵充,廖海,王富强,张力;鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平的动态变化与临床疗效的关系[J];癌症;2002年08期
4 李多杰;彭开桂;江浩;;鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA荧光定量PCR标准品的构建[J];蚌埠医学院学报;2007年02期
5 梁应霞,鲁成,李关荣,夏庆友,周泽扬,向仲怀;sch蚕胚胎期温敏性的mRNA差异显示研究[J];蚕业科学;2001年04期
6 沈慧玲;WT1基因与白血病靶向治疗[J];国外医学.输血及血液学分册;2003年05期
7 樊卫平;王宏伟;;WT1肽疫苗的研究现状和发展方向[J];国际肿瘤学杂志;2006年04期
8 赵国强,胡军,冷弘,王岚,陈宗德;荧光定量PCR检测B19病毒方法的建立[J];郑州大学学报(医学版);2005年03期
9 李晓云,李洪滨,王京华;WT1基因在白血病中的表达及意义[J];哈尔滨医科大学学报;2005年05期
10 李燕,续薇;微小残留白血病泛基因的分子生物学检测[J];吉林医学;2005年10期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 田卫伟;WT1抗原多表位基因疫苗设计及免疫原性研究[D];山西医科大学;2011年
2 李关荣;家蚕sch系统胚胎期高温致死性的基因表达差异研究[D];西南农业大学;2002年
3 何於娟;苦参碱对K562细胞增殖抑制与诱导分化作用的机制研究[D];重庆医科大学;2002年
4 王道荣;转移相关基因CD44和胃癌关系的研究[D];南京医科大学;2003年
5 邵敬伟;肺炎克氏杆菌甘油脱水酶基因克隆、序列分析及表达载体构建研究[D];沈阳农业大学;2004年
6 樊卫平;WT1肽疫苗体外及小鼠体内抗瘤效应的研究[D];山西医科大学;2006年
7 杨禾;福赛斯坦纳菌在龈下菌斑中的分布及定量分析[D];四川大学;2007年
8 段振玲;上皮性卵巢癌中自噬基因Beclin1的表达及其调控相关信号途径PI3K/PKB的实验研究[D];四川大学;2007年
9 杨涛;下调WT1基因表达对人白血病细胞K562生物学行为及基因表达谱的影响[D];山西医科大学;2008年
10 郭大伟;树突状细胞在肝癌免疫治疗中的应用研究[D];中国医科大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 江晓玲;疟疾荧光定量PCR诊断技术的研究[D];第一军医大学;2000年
2 梁应霞;伴性赤蚁(sch)蚕胚胎期温敏性的DDRT-PCR研究[D];西南农业大学;2001年
3 黄朝晖;三种蚊虫COⅡ基因的克隆与序列分析[D];浙江大学;2001年
4 王波;67kDa层粘连蛋白受体基因表达及基质金属蛋白酶-7与子宫内膜癌关系的研究[D];天津医科大学;2002年
5 邓东红;WT1基因在白血病患者的表达及其临床意义[D];广西医科大学;2003年
6 杨志霞;甘蔗与黑穗病菌互作的基因差异表达研究[D];福建农林大学;2003年
7 段卫明;RbAP46基因转染白血病细胞系的实验研究[D];苏州大学;2003年
8 魏琛;RNA干扰对白血病细胞WT1基因表达及细胞增殖的影响[D];郑州大学;2006年
9 肖信;广西HIV-1实时荧光定量PCR方法的建立及其初步评价[D];广西医科大学;2009年
10 李振华;荧光定量PCR测定鼻咽癌患者血清中游离的EBV-DNA[D];福建医科大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 王玲,傅建新,王玮,陈子兴;竞争性RT-PCR定量检测WT1基因表达方法的建立及初步应用[J];中华血液学杂志;2001年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 Gale RP;杨仁池;;Ph阳性的急性白血病和慢性粒细胞白血病急性期:是两种不同疾病[J];国际输血及血液学杂志;1991年03期
2 林寿榕;陈建森;卓光生;;急性白血病患者Wilms肿瘤基因(WT1)表达及其临床意义[J];山西医科大学学报;2010年03期
3 郁知非;Ph~1阴性的慢性粒细胞白血病和Ph~1阳性的急性白血病的基因分子分析[J];国际输血及血液学杂志;1992年02期
4 杨崇礼;张大龙;李来全;齐淑玲;;白血病前期的研究[J];医学研究杂志;1982年12期
5 郑建功;;中医药治疗白血病进展[J];辽宁中医杂志;1988年09期
6 王国江;朱英男;韩艳玲;史长山;何晓瑞;曹磊;;骨髓坏死8例临床分析[J];中外医疗;2009年08期
7 王沁;张爱华;;血液流变学检测对恶性血液病的临床意义[J];血栓与止血学;2009年04期
8 葛雪如;梁晋全;;慢性粒细胞白血病髓外浸润的特殊临床表现[J];河北医药;1990年06期
9 达日德杰;;换个角度认识“慢粒”[J];家庭医药;2008年03期
10 余锦云;;有特殊表现的急性白血病的误诊原因探讨(附白血病75例误诊分析)[J];实用肿瘤学杂志;1987年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈以文;;5例Ph染色体阳性的白血病骨髓象和染色体分析[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
2 杨沛;谢小红;邓少丽;;bcr/abI融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
3 冯丹;侯科佐;刘云鹏;;急性白血病患者P-gp、GST-Pi的表达及其与预后关系的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
4 朱芸;郝冀洪;刘永春;李彦会;;原发性血小板增多症—慢性粒细胞白血病变[A];第四届全国临床检验学术会议论文汇编[C];2006年
5 尚振川;郭坤元;李江琪;严定安;孙秉中;;p38MAPK在慢性粒细胞白血病发病中的作用[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
6 赵妍敏;吴功强;曾芬芳;黄河;;慢性粒细胞白血病隐匿型费城染色体并发Abl点突变病例报道两例[A];中国科协海峡两岸学术研讨会——2008血液肿瘤论坛会议会编[C];2008年
7 颜维仁;汪江;;中西医结合治疗慢性粒细胞白血病14例[A];第七届全国中西医结合血液病学术会议论文集[C];2004年
8 龚峻梅;杜庆锋;刘晓力;欧阳昭;刘志;张钰;张嵩;刘启发;冯茹;孟凡义;;慢性粒细胞白血病合并真菌感染时的铁代谢变化及其意义[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
9 杨琳;刘金梅;刘晓蕾;葛韦;刘小军;罗建民;;TYK2与SHP-1,SOCS6,SOCS7基因在白血病中的表达及意义[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
10 谭亚敏;黄河;赵妍敏;罗依;施继敏;;供者淋巴细胞输注控制急性白血病移植后残留病灶进展的2例报道[A];第七届全国血液免疫学学术大会暨2008年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 任敏;急性白血病的预防[N];青海日报;2004年
2 陈华;梁爱斌急性白血病的诊治情结[N];科技日报;2007年
3 记者 王彦春 王梅;42个白血病孩子一个妈[N];通辽日报;2008年
4 本报记者 李颖 通讯员 林夕夕;“血癌”已不再难缠[N];科技日报;2006年
5 记者 赵长春;女性孕前感染疱疹能使儿童患急性白血病[N];新华每日电讯;2003年
6 本报记者  郭静 通讯员 陈飒 崔伟历;白血病面面观[N];广东科技报;2006年
7 齐文中;山西医大二院治疗急性白血病又有新贡献[N];山西科技报;2000年
8 张东风;一种白血病用药被暂停使用销售[N];中国中医药报;2007年
9 甘培华 余宽平;慈善受助学子回校感恩[N];镇江日报;2010年
10 荣生;儿童白血病多数可治愈[N];中国妇女报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁婷婷;血清多肽图用于急性白血病诊断及疗效评价的研究[D];吉林大学;2011年
2 薛志科;慢性粒细胞白血病细胞遗传学研究及STI571联合化疗药物对K562细胞作用的研究[D];浙江大学;2006年
3 尚振川;MAPK在慢性粒细胞白血病信号转导中的作用及其作用机理研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 李杰;自体来源的CML DCs治疗慢性粒细胞白血病的基础与临床研究[D];吉林大学;2004年
5 张丽束;艾灸对气虚血瘀型慢性粒细胞白血病骨髓白细胞染色体和细胞免疫调节的影响[D];南京中医药大学;2004年
6 王新荣;DNA启动子区甲基化状态改变在急性白血病微小残留病检测中的临床意义[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
7 王莎;慢性粒细胞白血病的基因治疗研究[D];第四军医大学;2004年
8 黄利华;青蒿琥酯对人急性白血病原代细胞增殖抑制作用及其机制的研究[D];广州中医药大学;2011年
9 许洪志;急性白血病医院感染及其危险因素的研究[D];山东大学;2004年
10 程峰;肝脏缺血再灌注损伤及益生注射液的干预机理研究[D];四川大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 林寿榕;荧光定量PCR检测WT1 mRNA在白血病的表达与意义[D];福建医科大学;2003年
2 陈明;急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究[D];山西医科大学;2011年
3 时昊;c-kit R在急性白血病中的表达及其临床意义研究[D];苏州大学;2001年
4 张晓丽;MTA与MEA方案治疗难治或复发急性白血病的临床研究[D];郑州大学;2010年
5 冯丹;GST-Pi和P-gp在急性白血病中的表达及临床意义[D];中国医科大学;2004年
6 李蕊;人类白细胞抗原-G在急性白血病中的表达及意义[D];南方医科大学;2010年
7 于萍;急性白血病患者MRP1与LRP的表达及临床意义[D];中国医科大学;2004年
8 郑晓丽;COX-2在急性白血病骨髓细胞中的表达及其与Bcl-2的相关性研究[D];郑州大学;2004年
9 周可树;白血病细胞Ki-67抗原表达和化疗后24小时体内细胞凋亡预测急性白血病疗效的研究[D];郑州大学;2002年
10 高峰;急性白血病患者P-糖蛋白表达及功能的检测[D];中国医科大学;2002年
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