小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ_1高表达对游离脂肪酸介导的βTC3细胞损伤的影响

杜云峰

【摘要】： 目的克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ_1(mPPAR γ_1)基因，经胰岛βTC3细胞稳定表达系统表达，并观察mPPARγ_1高表达对游离脂肪酸(FFA)介导的βTC3细胞损伤的影响。方法采用RT-PCR方法从中国昆明小鼠附睾脂肪垫总RNA中扩增出mPPARγ_1cDNA全长基因，克隆入载体pcDNA3.1中，形成重组载体pcDNA3.1／mPPARγ_1，对其进行测序后，在胰岛βTC3细胞中进行稳定表达，用半定量RT-PCR对其表达进行鉴定。之后，采用四唑盐(MTT)比色试验比较野生型βTC3细胞与mPPARγ_1高表达βTC3细胞在长时间暴露于较高水平FFA后的细胞活力。结果克隆出中国昆明小鼠PPARγ_1全长基因，其cDNA序列与Genbank的小鼠PPARγ_1基因序列基本相同，仅编码第421位天冬酰胺的密码子由AAU变成了AAC。经鉴定mPPARγ_1基因有效地在βTC3细胞中获得了表达。野生型βTC3细胞在长时间暴露于较高水平FFA后细胞活力下降，且随FFA水平升高，细胞活力下降越明显。mPPARγ_1高表达βTC3细胞在同样条件下细胞活力无明显改变。结论 PPARγ_1高表达可保护胰岛βTC3细胞免于FFA介导的损伤。

【关键词】：克隆表达 过氧化物酶体增殖体激活受体γ_1基因 胰岛βTC3细胞 游离脂肪酸
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R346
【目录】：

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