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《福建医科大学》 2004年
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雷帕霉素产生菌吸水链霉菌ATCC367817菌体25kD蛋白质的纯化 

陈鹏  
【摘要】:FK506结合蛋白(FK506 Binding Proteins,FKBPs)是一类可以和免疫抑制剂FK506和雷帕霉素结合的蛋白质,存在于所有生物细胞内并有多种生物学作用。本研究以雷帕霉素产生菌吸水链霉菌ATCC367817为来源分离纯化一分子量为25kD的FKBP。该吸水链霉菌发酵后,制备其菌体蛋白,然后分别采用DE-52阴离子交换层析和Sephadex G-50凝胶过滤层析等方法纯化该25kD蛋白质,其纯度的检测采用SDS-PAGE的方法进行。将纯化到的25kD蛋白质进行PPIase活性测定并观察加入环孢素、FK506和雷帕霉素后对其活性的影响,测定结果表明该蛋白质具有PPIase活性,该活性能被nM级的雷帕霉素和FK506所抑制而环孢菌素A即使达到μM级仍对其无明显影响,证明该蛋白质为FKBP家族成员。竞争性抑制实验显示雷帕霉素与FK506和该蛋白质的结合存在竞争性,且雷帕霉素与该蛋白质的结合能力比FK506强。本研究为建立新型免疫抑制剂筛选模型提供了方法学基础。
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:TQ464

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