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自体骨骼肌卫星细胞移植治疗压力性尿失禁的可行性实验研究

夏清建  
【摘要】: 目的:探讨骨骼肌卫星细胞注射到尿道周作为一种压力性尿失禁治疗方法的潜在可行性,从而为注射疗法治疗压力性尿失禁提供一种新的注射材料。 方法:1)体外分离培养大鼠骨骼肌卫星细胞,免疫组化鉴定骨骼肌卫星细胞并检测其纯度。2)采用活体荧光染料荧光金(Fluoro-Gold)标记骨骼肌卫星细胞,将标记后的细胞注射到大鼠近端尿道周围。3)3-4天后处死大鼠,取注射部位组织冰冻切片,荧光显微镜下观察、免疫组织化学染色,观察细胞存活、分化情况。 结果:原代培养的骨骼肌卫星细胞,经免疫组化鉴定,骨骼肌卫星细胞的纯度达到90%以上。荧光显微镜下100%的细胞胞核被染色标记,呈金黄色,荧光持续存在,细胞存活率约95%。注射部位的组织切片于荧光显微镜下可观察到荧光标记的细胞,行Desmin免疫组化染色呈阳性。 结论:成功建立大鼠骨骼肌卫星细胞原代培养方法。0.01%的FG标记液对骨骼肌卫星细胞的胞核染色效果好,细胞存活率高,适合于细胞自体移植的标记。将标记的骨骼肌卫星细胞注射到近端尿道周,组织切片经荧光显微镜观察及组织化学检测,可见到荧光标记、免疫组化阳性的细胞,说明骨骼肌卫星细胞注射到尿道周后仍有存活并分化,可作为压力性尿失禁的注射治疗的一种新型注射材料。


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