收藏本站
《福建医科大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

红茶和绿茶多酚与猪胰腺α-淀粉酶相互作用的酶催化动力学和荧光猝灭研究

王文君  
【摘要】: 目的:本研究旨在以猪胰腺α-淀粉酶(porcine pancreaticα-amylase, PPA)作为人唾液α-淀粉酶(human salivaryα-amylases, HSA)的蛋白质模型,通过酶的动力学和荧光猝灭实验,从分子水平考察红/绿茶茶多酚(tea polyphenols, TP)抑制PPA催化水解淀粉的效果和特异性,以及对PPA蛋白质内源性荧光的猝灭效果,从而为解释红/绿茶TP对口腔感觉的收敛性作用和酶抑制类型的生理意义奠定理论基础。方法:在不间断540nm波长下,测量PPA催化生成的麦芽糖的吸光度增加值,通过动力曲线的直线段的斜率获得反应速度,由Lineweaver–Burk图求出动力学参数(V_(max)和K_s),统计学分析确定抑制类型。滴加不同浓度的红/绿茶TP溶液,以295nm波长(λ_(ex))检测PPA的荧光强度,通过获得的荧光光谱计算Stern-Volmer猝灭常数(K_(SV))、双分子猝灭常数(k_q)、表观静态猝灭常数(K_(app))、动态猝灭常数(K_D)和静态猝灭常数(K_S)。结果:无抑制剂和红茶抑制剂的最大反应速度(V_(max))之间的差异具有统计学意义(P0.05),无抑制剂和绿茶抑制剂的酶–底物解离常数(Ks)之间的差异具有统计学意义(P0.05)。红茶抑制剂解离常数(K_i)值高于绿茶(P0.05)。同一品牌TP的动、静态猝灭常数(KD与K_S)之间的差异具有统计学意义(P0.05);双分子猝灭常数(k_q)大于双分子扩散限制性猝灭常数值(1×10~(10)M~(-1)s~(-1)),伴随红/绿茶TP溶液浓度增加,荧光发射波长(λ_(em))发生红移。红/绿茶多酚与PPA在Trp59上存在一个结合位点(n = 1)。红/绿茶猝灭剂对PPA荧光猝灭的距离作用的K存在统计学意义(P0.05),红茶的表观猝灭常数大于绿茶(P0.05)。结论:红茶TP对PPA的抑制为非竞争性抑制型,绿茶TP对PPA的抑制为竞争性抑制型。红茶抑制剂既能与自由酶的活化中心位点结合,也能与酶-底物上的位点结合,而绿茶抑制剂仅能与活化中心位点结合。红/绿茶对PPA的荧光猝灭同时存在三种机制,除了动态和静态猝灭外,还存在距离作用。猝灭反应是以形成基态复合物为主的静态猝灭,且红/绿茶TP猝灭效果相同。红/绿茶TP对PPA的荧光猝灭反应引起了PPA的分子构象发生改变。
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R78

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 卞伟;卫艳丽;王亚萍;董川;;荧光法研究咖啡因和茶碱与牛血清白蛋白相互作用[J];光谱学与光谱分析;2006年03期
2 张红梅;王彦卿;张根成;;荧光光谱法研究茶碱与牛血清白蛋白的相互作用[J];应用化学;2006年08期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜娜娜;张坤;谢跃勤;杨松;盛良全;;异烟肼与牛血清蛋白相互作用的光谱研究[J];安徽大学学报(自然科学版);2008年04期
2 尹红娜;伍季;刘红伟;;动物血液中SAL残留快速检测新方法[J];安徽农业科学;2007年36期
3 崔香;李海青;邓晓梅;;中药大黄水浸液的三维荧光光谱分析[J];安徽农业科学;2009年22期
4 崔香;郭幼敬;常敏;;基于三维荧光光谱法的水样中苯酚和对苯二酚含量测定[J];安徽农业科学;2009年24期
5 赵霞;范阔海;;荧光探针法研究铅离子对小牛胸腺DNA构象的影响[J];安徽农业科学;2009年34期
6 李俊辉;王忠维;杜晓东;王庆恒;;重金属离子对裸体方格星虫的急性毒性试验[J];安徽农业科学;2011年03期
7 汪祺;朱昌青;;基于水溶性CdTe量子点的荧光猝灭选择性测定对苯二酚[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2012年03期
8 廖圣恺;葛淑芬;承泽农;;涎腺黏液表皮样癌中5-脂氧合酶的表达及临床意义[J];蚌埠医学院学报;2009年08期
9 马福昌;吕迎春;;金属支架对BLM的K~+离子敏感特性的影响[J];微纳电子技术;2007年Z1期
10 李静远;刘晓勇;孙涛;祁森荣;王昊;杨大海;王松灵;;牙骨质—骨化纤维瘤的X线表现及其病理学分析[J];北京口腔医学;2006年04期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 臧合英;李华岑;韩立;徐银凤;周红霞;班付国;;烟酸诺氟沙星和乳酸诺氟沙星的荧光特性研究及应用[A];中国畜牧兽医学会动物药品学分会第四届全国会员代表大会暨2011学术年会论文集[C];2011年
2 马福昌;吕迎春;;金属支架对BLM的K~+离子敏感特性的影响[A];第十届全国敏感元件与传感器学术会议论文集[C];2007年
3 夏庆春;何其庄;李兴玉;彭子飞;孙大志;;稀土、钼酸、1,3-二苯基-4-吡唑甲醛缩异烟肼三元配合物的合成,表征及抗癌活性的研究[A];第六届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
4 吴锦绣;李梅;宋玉民;柳召刚;胡艳宏;;芦丁铕配合物与人血清白蛋白的相互作用[A];第十三届(2009年)冶金反应工程学会议论文集[C];2009年
5 张国文;陈秀霞;;牛蒡苷与人血清白蛋白的相互作用[A];2009年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会论文集[C];2009年
6 领小;博日吉汗格日勒图;麻春杰;娜日苏;;荜茇宁与牛血清白蛋白相互作用的研究[A];药用植物化学与中药有效成分分析研讨会论文集(上)[C];2008年
7 王丽;陈新明;;口腔病理实验教学中学生临床素质能力培养[A];第八届全国口腔医学教育学术研讨会论文集[C];2012年
8 吴文玉;杨利峰;;犬齿龈肿物报告[A];2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 魏洪源;原子分子在δ-Pu上的吸附、离解与扩散过程研究[D];中国工程物理研究院;2010年
2 杨爱玲;单个油气包裹体检测技术及应用[D];中国海洋大学;2010年
3 陈向东;有机太阳能电池中的光物理过程研究[D];合肥工业大学;2010年
4 周灵初;红柱石的浮选分离技术及机理研究[D];武汉科技大学;2010年
5 冯燕;芴类双光子吸收功能材料的合成及性能研究[D];安徽大学;2010年
6 陈国庆;荧光光谱技术在食品安全监控中的应用研究[D];江南大学;2010年
7 张先增;脉冲激光诱导生物硬组织消融及其医疗新技术[D];福建师范大学;2010年
8 黄林勇;锌基氧(硫)化锌微纳米结构的合成、表征、光电性质及生长机理研究[D];山东大学;2010年
9 赵宁;有机双光子材料的合成及其在生物荧光探针和光聚合中的应用[D];山东大学;2010年
10 鲍成满;高压在线荧光检测研究[D];浙江大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 段雅庆;芦笋中黄酮和多糖的复合提取及其抗氧化活性研究[D];华中农业大学;2010年
2 杨卫海;分子印迹聚合物、量子点及其复合微球的制备[D];华中农业大学;2010年
3 胡申琳;第三磨牙解剖形态学研究[D];南京医科大学;2010年
4 林良缘;表皮生长因子受体与口腔白斑癌变关系的初步研究[D];南京医科大学;2010年
5 刘勇;芳香炔醇的合成及其与硝基爆炸物的荧光猝灭效应研究[D];中国工程物理研究院;2010年
6 陈晓英;喜树碱与生物大分子相互作用的光谱研究[D];郑州大学;2010年
7 牛方;磷酸酯粘结剂诱导生成羟基磷灰石晶体的实验研究[D];郑州大学;2010年
8 张颖;四种药物的毛细管电泳电化学发光法分析[D];郑州大学;2010年
9 张伟;分子光谱法研究蛋白质与小分子的相互作用及其分析方法研究[D];郑州大学;2010年
10 徐少华;香豆素磷酰化衍生物的合成及与牛血清蛋白的弱相互作用研究[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 冯喜增,金瑞祥,曲芸,何锡文;各种离子对血卟啉与牛血清白蛋白相互结合反应的影响研究[J];高等学校化学学报;1996年06期
2 卫艳丽,姚建国,杨频,董川;黄嘌呤甲基衍生物的发光特性研究[J];光谱实验室;2003年05期
3 易平贵,刘俊峰,商志才,俞庆森;荧光光谱法研究亚甲基蓝与蛋白质的结合反应[J];光谱学与光谱分析;2001年06期
4 赵长春,郑维发,李梦秋;小檗碱与人血清白蛋白的相互作用[J];光谱学与光谱分析;2004年01期
5 刘雪锋,夏咏梅,方云,邹鲁,刘玲玲;三种香豆素类中药小分子与牛血清白蛋白的相互作用[J];化学学报;2004年16期
6 颜承农,张华新,刘义,梅平,李克华,童金强;百草枯与牛血清白蛋白结合作用的荧光光谱[J];化学学报;2005年18期
7 李丙阳,童路,邹本田;血浆中茶碱的薄层色谱测定[J];药学学报;1985年05期
8 易平贵,俞庆森,商志才,宗汉兴;氧氟沙星与牛血清白蛋白相互作用机制[J];药学学报;2000年10期
9 刘永明,李桂芝;荧光猝灭法研究依诺沙星和蛋白质的相互作用[J];应用化学;2004年06期
10 冯玉英,吴晓红,周家宏,顾晓天,陆天虹,王雪松,张宝文;竹红菌甲素与血红蛋白相互作用光谱[J];应用化学;2005年08期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑景雄;科学饮茶[J];家庭医学;1995年06期
2 黄文景,蒋贵发,黄明立,阮冲;广西市售茶叶含氟量的调查[J];广西预防医学;2005年04期
3 胡婷;江晓玲;;饮茶习惯对非酒精性脂肪性肝病的保护作用研究[J];中国全科医学;2011年20期
4 王文君;姚江武;陶涛;;红茶和绿茶多酚对猪胰腺α-淀粉酶抑制效果的动力学研究[J];口腔医学研究;2009年04期
5 田芳;品茗与健康[J];健康大视野;1997年02期
6 侯冬岩;回瑞华;刘晓媛;唐蕊;朱永强;;绿茶、红茶和乌龙茶抗氧化性能的比较[J];食品科学;2006年03期
7 陈宗懋;红茶和绿茶同样可以减少妇女的癌症发病率[J];中国茶叶;1997年06期
8 ;论病选茶[J];新疆林业;1993年06期
9 辛存芳;品女人如品茶[J];家庭医学.新健康;2004年06期
10 齐义军;茶叶与肿瘤[J];河南医学研究;2000年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王春华;;四季变化与饮茶健康[A];上海市茶叶学会2009-2010年度论文集[C];2010年
2 王云;李春华;;四川茶叶出口的思路及措施[A];中国茶叶学会成立四十周年庆祝大会暨2004年学术年会论文集[C];2004年
3 杜亚涛;田维熙;;红茶中脂肪酸合酶抑制剂的研究[A];第七届全国酶学学术讨论会论文摘要集[C];2004年
4 田维熙;马晓丰;;广泛存在于药用植物中的脂肪酸合酶抑制剂[A];药用植物化学与中药资源可持续发展学术研讨会论文集(上)[C];2009年
5 田维熙;马晓丰;;广泛存在于药用植物中的脂肪酸合酶抑制剂[A];第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用研讨会论文集[C];2009年
6 张乐尔;王金贤;;当前外销绿茶形势分析及建议[A];中国茶叶学会成立四十周年庆祝大会暨2004年学术年会论文集[C];2004年
7 姜振坤;;防衰抗癌话绿茶[A];茶与健康生活主题征文选[C];2004年
8 辛崇恒;;打造日照绿茶品牌 建造北方第一绿茶生产基地[A];山东省老科技工作者为实施“十一五”规划和建设创新型省份建言献策研讨会论文选[C];2007年
9 刘媛;王健;;茶氨酸的最新研究进展[A];全国茶业科技学术研讨会论文集[C];2007年
10 徐艳文;;夏季饮茶有讲究[A];上海市茶叶学会2009-2010年度论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 安明霞;中国茶·礼天下[N];中华合作时报;2010年
2 夏国嘉;茶保健 有讲究[N];医药养生保健报;2008年
3 苏锦;四季喝茶各不同[N];医药养生保健报;2008年
4 李魁寿 记者 郑德忠;275克“湄潭翠芽”拍出28.6万元高价[N];经济信息时报;2010年
5 冯新生;红茶:何日墙内也斑斓[N];中国旅游报;2003年
6 记者 赵国庆;信阳红 红天下[N];云南经济日报;2011年
7 叶鹏;茶之色[N];中华合作时报;2002年
8 中国农业大学食品科学与营养工程学院教授 范志红;红茶不该不招待见[N];保健时报;2007年
9 本报记者 刘维维;弘扬“正清和雅”的禅茶养生理念[N];中国社会科学报;2011年
10 山起森;晚上宜饮红茶[N];医药养生保健报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张巍;calpain及calpastatin在小鼠皮肤切创愈合过程中作用的研究[D];中国医科大学;2009年
2 魏华;氧化应激诱导间充质干细胞凋亡及磷脂类分子调节血管内皮生长因子分泌研究[D];中国协和医科大学;2010年
3 黄大卫;组蛋白去乙酰化酶抑制剂的分子设计、合成与作用方式[D];大连理工大学;2012年
4 宿莉;脲基类肽氨肽酶N抑制剂的设计、合成及其抗肿瘤活性研究[D];山东大学;2011年
5 尹玲;新型肽脱甲酰基酶抑制剂的设计、合成与生物活性研究[D];山东大学;2010年
6 陈轶;水溶性共轭聚合物荧光传感材料的合成、表征以及荧光猝灭的研究[D];复旦大学;2007年
7 吴桂叶;新苊并杂环类Mcl-1/Bcl-2蛋白双抑制剂的研究[D];大连理工大学;2011年
8 方勇;高通量筛选mTORC2复合体特异性小分子抑制剂[D];华中科技大学;2010年
9 王宏亮;EV71 VP1抑制剂的设计、合成与活性评价[D];沈阳药科大学;2011年
10 伊长虹;生物大分子的量子和经典的理论计算研究[D];山东师范大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王文君;红茶和绿茶多酚与猪胰腺α-淀粉酶相互作用的酶催化动力学和荧光猝灭研究[D];福建医科大学;2009年
2 陈静坤;红茶和绿茶多酚与人唾液α-淀粉酶相互作用的酶促动力学和荧光猝灭研究[D];福建医科大学;2010年
3 王玲玲;半枝莲治疗湿热内蕴型肝癌的机制研究[D];吉林大学;2008年
4 李赟;大鼠慢性阻塞性肺疾病中磷酸二酯酶4活性的变化及其选择性抑制剂的作用[D];浙江大学;2006年
5 姜波;四川边茶对脂肪酸合酶抑制作用的研究[D];四川农业大学;2007年
6 葛蔚;糊化淀粉包被脲酶抑制剂的研究[D];东北农业大学;2002年
7 王岩;人PTP1B催化结构域的克隆表达及其抑制剂的筛选[D];吉林大学;2005年
8 王树青;基于生物信息学的SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的设计[D];天津师范大学;2005年
9 柏冰;基于结构分枝杆菌异柠檬酸裂合酶的高通量药物筛选模型的构建与应用[D];西南大学;2006年
10 周洪彬;卵母细胞成熟抑制剂对猪卵母细胞成熟的影响[D];西南大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026