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《福建中医药大学》 2013年
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麝香保心丸对缺氧复氧心肌细胞的保护及作用机制研究

李敏  
【摘要】:麝香保心丸主治心肌缺血引起的心绞痛、胸闷及心肌梗死,是目前国内临床上广泛应用于治疗冠心病的特效复方药物。虽然该复方基于整体动物和组织器官水平的药理研究已经取得了一定的进展,但远不足以阐明复方作用机制。为了进一步阐明中药复方的分子作用机制及其可能作用靶点和通路,本论文在已有工作的基础上,初步探讨麝香保心丸及其主要药效物质对缺氧心肌细胞的保护作用,并采用基因组学技术解释麝香保心丸治疗冠心病的分子作用机制。 为了研究麝香保心丸对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用,本课题用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R的损伤模型,采用MTT法测定细胞的存活率以评价麝香保心丸的药效。实验结果表明,麝香保心丸在30、50、100、150μg/ml剂量时,对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤有保护作用。同时,采用MTT法研究了麝香保心丸复方中的20个主要活性成分对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用。实验结果表明,人参皂苷Rbl、Rb2、蟾毒灵和麝香酮在10μM时表现出较好活性(P<0.05)。为了进一步研究麝香保心丸对心肌细胞H/R损伤保护的作用机制,本研究对活性成分人参皂苷Rbl干预后的缺氧/复氧(H/R)心肌细胞进行了基因芯片研究,差异基因表达谱结果显示,H/R组与正常组比较有38个差异基因,16个上调,22个下调;给药组与H/R组比较有8个差异基因,6个上调,2个下调;其中由人参皂苷Rbl调控的基因有5个,分别是Sec11c、Ankrd11、Zfp7091、Scol和ND6。通过生物信息学的分析将这些基因归到所调控的通路上,两两对比之后推测出人参皂苷Rbl保护缺氧复氧心肌的可能途径主要有以下几条:通过代谢、氧化磷酸化或是帕金森疾病通路对缺氧复氧中造成的ND6低表达进行了逆转;通过蛋白输出通路对缺氧复氧中造成的Sec11c低表达进行了逆转;对缺氧复氧中造成的Ankrd11、Zfp70911和Scol的低表达进行逆转,或是这些途径共同调节的结果。研究结果有待进一步实验验证。 本课题探讨了麝香保心丸对心肌细胞在H/R损伤中的保护作用,并初步探讨了其作用靶基因,为全面了解麝香保心丸的药效物质基础具有一定意义,并为复杂的中药体系的活性物质筛选提供一种思路。
【学位授予单位】:福建中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R285.5

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【参考文献】
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