收藏本站
《福建师范大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达

陈晓峰  
【摘要】:DHA在人体中有许多重要的生理作用,对维持人体健康是不可或缺的,研究还发现其对改善高血压、关节炎、抑郁症等也有显著效果。DHA由于具有这些特殊生理作用,现今已成为高附加值、市场需求广泛的产品。现今对DHA研究主要集中于利用转基因手段在各种作物和微生物中大量、廉价生产DHA。 为利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22:6△4,7,10,13,16,19 n-3),本文通过基因重组的方法构建了同时含破囊壶菌Thraustochytrium sp. FJN-10△5脂肪酸延长酶(TFD5)基因、△4脂肪酸脱饱和酶(FAD4)基因的共表达质粒PYTFD5-FAD4.该质粒是通过基因重组的方法,使FTD5、FAD4基因置于各自启动子和终止子下获得的。该质粒转化酿酒酵母所构建的重组工程菌,在添加终浓度为2%的半乳糖、终浓度为1%的NP-40和0.3mmol/L的底物二十碳五烯酸(EPA,20:5△5,8,11,14,17 n-3)下进行诱导,可直接转化二十碳五烯酸(EPA,20:5△5,8,11,14,17 n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22:5△4,7,10,13,16 n-3)和DHA,从EPA到DHA的转化效率为12.47%。 为进一步提高转化率,通过基因重组的方法构建了同时含TFD5基因、FAD4基因和酿酒酵母细胞色素b5基因的共表达质粒pYTFD5-FAD4-B5,各基因拥有各自的启动子和终止子。该质粒转化酿酒酵母所构建的工程菌在上述诱导条件下,从DPA到DHA的转化效率未见明显提高,表明启动子是影响本实验转化率的主要因素。
【学位授予单位】:福建师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q78

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐芳,蔡昭铃,丛威,欧阳藩;微藻培养生产多不饱和脂肪酸的研究进展[J];重庆工学院学报;2005年01期
2 郝颖;汪之和;;EPA、DHA的营养功能及其产品安全性分析[J];现代食品科技;2006年03期
3 赵福永;曾宇明;田志宏;;湘油15号芥酸合成酶基因fae1的克隆与序列分析[J];湖北农业科学;2007年06期
4 尤丽菊;;DHA的药理作用[J];河南职工医学院学报;2008年06期
5 张羽航,彭世清,鲍时翔,姚汝华,黄自然,郑学勤;被孢霉△~9脂肪酸脱饱和酶基因保守区的cDNA克隆及结构分析[J];菌物系统;1999年02期
6 程胜利,姚军,梁春年,杨保平,郭健;ω—3PUFA强化蛋的调控研究进展[J];江西饲料;2005年01期
7 徐静,李姜溶,王健敏;多烯脂肪酸胶丸治疗高脂血症疗效观察[J];黑龙江医药科学;1998年04期
8 黄宝玺;王大为;王金凤;;多不饱和脂肪酸的研究进展[J];农业工程技术(农产品加工业);2009年08期
9 朱丽娜;张志国;张敏;生庆海;;DHA的生理功能及其在食品中的稳定性[J];中国乳品工业;2009年02期
10 林彬;吴力群;曹景玉;刘敬华;;DHA对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用观察[J];山东医药;2009年10期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周冉;王飞;常明;岳红坤;史兰香;刘司婕;;从微藻中提取分离EPA和DHA的方法[J];安徽农业科学;2012年14期
2 李金穗;汪苹;李奥搏;;藻粉中亚油酸GC测定的预处理方法研究[J];北京工商大学学报(自然科学版);2011年05期
3 郁校静;常玲玲;张亚琴;朱平华;李云龙;杨章平;毛永江;;中国荷斯坦牛原料乳脂肪酸组成及变化规律的研究[J];中国牛业科学;2011年05期
4 王景梓,徐贵发;ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸的药理作用[J];滨州医学院学报;2005年04期
5 徐芳,蔡昭铃,丛威,欧阳藩;微藻培养生产多不饱和脂肪酸的研究进展[J];重庆工学院学报;2005年01期
6 方富永;黄甫;邓陈茂;张强;黄海立;;企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪酸组成[J];水产科学;2007年07期
7 丁兆坤;刘亮;许友卿;;二十碳四烯酸研究[J];水产科学;2007年12期
8 张秀春;郭丽琼;吴坤鑫;林俊扬;林俊芳;;双T-DNA表达载体转化大豆的研究[J];大豆科学;2005年04期
9 宋丽雅;盖燕;何聪芬;;向大豆导入琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的初步研究[J];大豆科学;2012年02期
10 黄才国,李医明,贺祥,魏善建,姜华;玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响[J];第二军医大学学报;2004年08期
中国重要会议论文全文数据库 前6条
1 庞伟;蒋与刚;房恒通;房红芸;刘静;;老人认知功能衰退的社区营养干预研究[A];中国营养学会第十次全国营养学术会议公共营养分会论文集[C];2008年
2 杨正雄;达瓦;张坚;张松建;翟屹;满青青;冶秀敏;顿珠多吉;彭措次仁;赵文华;;藏族与汉族中老年人膳食模式的差异对血脂的影响[A];膳食营养、身体活动与健康——达能营养中心第十一次学术年会会议论文集[C];2008年
3 李坡;谷守琴;邢继红;董金皋;;玉米大斑病菌STK3基因克隆及生物信息学分析[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
4 白义春;康相涛;孙桂荣;陈其新;黄艳群;韩瑞丽;田亚东;樊博;;固始鸡△6-脂肪酸脱氢酶基因片段的克隆及序列分析[A];中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集[C];2007年
5 王启林;房敏峰;付志玲;郑晓晖;赵桂仿;;远志不同部位脂溶性成分的GC-MS分析[A];中华中医药学会第十届中药鉴定学术会议暨WHO中药材鉴定方法和技术研讨会论文集[C];2010年
6 曹玮娜;任战军;;肉兔机体组织中脂肪酸检测方法的选择与组成分析[A];第二届(2012)中国兔业发展大会专辑五[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 石从广;油菜EMS诱变群体的构建以及油脂代谢相关基因等位多态性与油脂品质关系的研究[D];浙江大学;2010年
2 张君萍;沙葱籽油和多糖的提取及其降血脂作用[D];南京农业大学;2011年
3 郑回勇;人乳铁蛋白基因在胡萝卜(Daucus carota L.)中的表达及其功能研究[D];福建农林大学;2002年
4 姜鹏;海带遗传转化模型的优化及目的基因的导入[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
5 郝彦玲;甘蓝型油菜与向日葵高γ-亚麻酸基因工程研究[D];中国农业大学;2004年
6 石明旺;油茶种子EST文库构建及油脂合成关键酶基因的分离鉴定[D];中南林学院;2004年
7 陆万香;黑茶藨子(Ribes nigrum L.)含Cytb_5结构域脱氢酶基因的克隆与功能研究[D];西南农业大学;2005年
8 张秀春;表达γ-亚麻酸的无标记转基因大豆的培育[D];华南热带农业大学;2005年
9 吴彩娥;猕猴桃籽油α-亚麻酸的富集及猕猴桃籽油微胶囊化技术研究[D];西北农林科技大学;2005年
10 杜冰;DHA的发酵生产及代谢调控研究[D];华南理工大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 潘瑾;温度和硅胁迫对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)生长和脂肪酸组成的初步研究[D];中国海洋大学;2010年
2 孙兆敏;酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油三酯的工艺[D];中国海洋大学;2010年
3 张晓萍;马油中生物活性成分的研究[D];新疆农业大学;2010年
4 陈丽;多拷贝毕赤酵母重组菌表达PIP生理特性和动力学研究[D];华东理工大学;2011年
5 毛若雨;毛霉Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因启动子的克隆和功能鉴定[D];福建师范大学;2010年
6 刘静;裂殖壶菌Schizochytrium sp. FJU-512在温度胁迫下的差异蛋白质组学研究[D];福建师范大学;2010年
7 龙洪旭;油桐油体蛋白等基因的克隆及生物信息学分析[D];中南林业科技大学;2010年
8 胡姣;油茶AACT基因和FAD6基因的全长cDNA克隆及原核表达[D];中南林业科技大学;2010年
9 沈国辉;DHA微胶囊稳定性及在婴幼儿奶粉中的应用研究[D];湖南农业大学;2010年
10 郭雪洁;衣藻FAB2基因分离和功能鉴定以及不同胁迫条件下表达模式研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜悦,陈峰,姜谦,李富兵,梁世中;高细胞密度微藻培养生产ω-3多不饱和脂肪酸[J];河北农业大学学报;1998年03期
2 王利华,霍贵成;ω-3不饱和脂肪酸的生物学作用[J];东北农业大学学报;2001年01期
3 黄建忠,江贤章,刘丽霞,吴松刚,Tsunehiro AKI;高产DHA海洋真菌Thraustochytrium sp.N4-103脂肪酸组成及其18SrRNA基因的克隆与序列分析[J];福建师范大学学报(自然科学版);2005年01期
4 陈亚亮,陆涛,马育平,景朋,高秀来,郭爱民;鱼油制剂中DHA对小鼠海马NOS阳性神经细胞表达的影响[J];解剖学研究;2001年01期
5 刘丽霞;江贤章;覃文新;姚根富;黄建忠;;海洋真菌Thraustochytrium sp.FJN-10 Δ~4脱饱和酶基因的cDNA克隆及结构分析[J];工业微生物;2006年01期
6 岳红,杨绍斌;DHA和EPA的加工现状及生理作用[J];广州食品工业科技;1998年01期
7 蒲定福,张进位,袁代斌,蒙大庆,李芝凡,胥岚;四川省工业专用型高芥酸油菜产业化生产[J];亚热带农业研究;2005年02期
8 胡艳,戴求仲,蒋桂韬,周孟清;日粮添加CLA对蛋鸡生产性能及蛋黄脂肪酸组成的影响[J];湖南畜牧兽医;2005年02期
9 张羽航,林炜铁,姚汝华,黄惠琴,鲍时翔;海洋微生物发酵生产廿二碳六烯酸(综述)[J];海洋通报;1999年01期
10 周光正,王远隆,王淑君;海水仔稚鱼对于n-3高度不饱和脂肪酸需求量的研究现状[J];海洋湖沼通报;1996年03期
【相似文献】
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 江贤章;陈金卿;田宝玉;高媛媛;舒正玉;李欣;蓝灿华;黄建忠;;破囊壶菌△4-脂肪酸脱饱和酶基因5′端侧翼区域的克隆与鉴定[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
2 江贤章;陈金卿;柯崇榕;田宝玉;舒正玉;高嫒媛;黄建忠;;海洋破囊壶菌△5-延长酶与△4-脱饱和酶在酿酒酵母中的共表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
3 于爱群;夏晓峰;江贤章;黄建忠;;卷枝毛霉Mucor circinelloides△6-脂肪酸脱饱和酶在酿酒酵母中的表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 卿人韦;麻疯树(Jatropha curcas L.)脂质合成的酶基因克隆及功能研究[D];四川大学;2005年
2 于长青;深黄被孢霉高产花生四烯酸的制备及其调控机制[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 叶华勋;播娘蒿硬脂酸脱饱和酶的基因克隆及其功能研究[D];四川大学;2007年
中国知网广告投放
相关机构
>吉林大学
>四川大学
相关作者
>于长青 >卿人韦
>叶华勋
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026