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《福建师范大学》 2012年
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经典WNT信号通路关键基因在人胎肺中的表达

施珏平  
【摘要】:已知经典WNT信号通路通过参与细胞的增殖、凋亡和分化过程,对小鼠肺器官发育起着重要的调控作用,但经典WNT信号通路在人胎肺发育时期的表达模式及调控功能目前未见相关报道。为此,本论文选取假腺肺(7W、12W、17W)和微管肺(21W)时期的人胎肺组织,通过Real-time PCR和原位杂交技术,检测经典WNT信号通路关键基因,包括WNT配体(WNT2、WNT7B),WNT受体(FZD4、FZD7、LRP5、LRP6),WNT信号通路调控器(DVL2、DVL3、GSK-3β, β-CATENIN、APC,AXIN2),WNT信号通路下游转录因子(TCF4、LEF1)以及WNT信号通路拮抗物(SOSTDC1)的表达模式,为阐明经典WNT信号通路调控人肺器官发育机制奠定基础。首先Real-time PCR结果显示,经典WNT信号通路关键基因在人胎肺发育4个时期(7W、12W、17W和21W)均有表达,其中WNT2.D VL2、GSK-3β,β-CATENIN,APC、TCF4及LEF1从7W到12W表达量逐渐下调,从12W到17W开始升高,但在21W又显著下调;LRP5、LRP6、DVL3、AXIN2和SOSTDC1从7W、12W到17W表达量逐渐升高,但到21W又显著下调;WNT7B和FZD7从7W到12W表达量升高,但从12W到21W又逐渐下降。其次原位杂交结果显示,除了经典WNT信号通路调控器DVL3、β-CATENIN, AXIN2及下游转录因子TCF4在胎肺近端气管及远端肺泡上皮和间充质中均有表达外,其余经典WNT信号通路调控器仅在胎月市气管分支及远端肺泡上皮表达。此外,我们利用小分子化合物CHIR-99021刺激15周的人胎肺组织以激活经典WNT信号通路,Western Blot、Real-time PCR及组织病理检测证实经典WNT信号通路被激活,并且过度激活的WNT信号致使人胎肺近远端肺部上皮细胞由矮柱状向高柱状的早期细胞状态退化。总之,我们的研究表明,经典WNT信号通路对人胎肺气管的分支形态及上皮细胞的分化均起着重要的调控作用,这将为研究经典WNT信号通路调控人胎肺发育的分子机制及相关肺部疾病的诊疗奠定基础。
【学位授予单位】:福建师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R321

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【参考文献】
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