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《福建师范大学》 2016年
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抗弧菌芽孢杆菌益生菌的筛选、鉴定及发酵工艺条件优化

温金花  
【摘要】:建立了明虾致病性弧菌筛选和检验程序,以福州地区(福清、连江、长乐)养殖区域的明虾作为样本,进行致病性弧菌的分离与鉴定。经分离获得20株,3种弧菌,分别是:2株霍利斯弧菌,4株温和气单胞菌以及14株弗尼斯弧菌,检出率为13.33%。实验结果在一定程度上说明了福州地区明虾弗尼斯弧菌污染较为严重。选择分离得到的弗尼斯弧菌Vf-6作为致病性弧菌抑制菌筛选的指示菌。根据致病性弧菌的特性选择四种保藏方式进行保藏效果的比较,确定致病性弧菌的保藏方式。实验结果表明保藏的时间由长到短为:室温液体石蜡保藏法室温斜面保藏法4℃液体石蜡保藏法4℃斜面保藏法。其中室温液体石蜡保藏法保藏的弧菌操作简便,弧菌保藏的生物学特性保持稳定,因此可采用室温液体石蜡保藏法对弧菌进行短期保藏。通过抑菌圈指示法进行平板初筛、摇瓶复筛,从实验室保藏的20株芽孢杆菌中筛选出一株Bs-5对弗尼斯弧菌Vf-6有很好的抑菌效果。通过形态学的特征、生理生化试验和16SrDNA分子鉴定的方法对Bs-5菌株进行分类地位的确定,结果表明Bs-5菌株属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis。枯草芽孢杆菌Bs-5抑菌谱研究表明,其发酵液抑菌代谢物对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和弗尼斯弧菌Vf-6都有较强的抑制作用,对木霉和稻瘟霉也有一定的抑制作用,对大肠埃希氏菌没有抑菌作用。枯草芽孢杆菌Bs-5的抑菌代谢物理化性质研究结果表明:其抑菌代谢物具有较好的热稳定性,最适作用的pH为7.0,具有较好的蛋白酶稳定性和较好的有机溶剂稳定性,不同的金属离子对该抑菌代谢物的抑菌活性有不同的影响。对枯草芽孢杆菌Bs-5抑菌代谢物发酵进行优化,通过单因素优化、正交设计实验和BP神经网络寻优,得到发酵培养基最佳组合:蔗糖浓度5.4g/L,豆粉浓度25.5g/L,氯化铵浓度0.68g/L,ZnSO4·7H2O浓度0.025g/L,发酵条件为:接种量2%,摇瓶温度35℃,摇瓶转速180r/min,初始pH6.5,装液量45mL(250mL),发酵培养时间12h。优化后抑菌圈直径为32.93mm与优化前抑菌圈直径16.50mm相比提高了 99.58%。
【学位授予单位】:福建师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S945.4;S942.3

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 罗同阳;郑翔;李宾;;产几丁质酶枯草芽孢杆菌对立枯丝核菌的抑制作用研究[J];现代农业科技;2014年22期
2 包华音;刘杨;;单因素考察和正交试验结合优选黄芪药材蛋白质提取工艺[J];辽宁中医杂志;2014年10期
3 邵方元;付腾飞;薛兴阳;周苏娟;陈宏远;孟江;王颖芳;;正交试验和BP人工神经网络模型优化胰蛋白酶提取鱼腥草多糖的工艺[J];中国实验方剂学杂志;2013年11期
4 高阳;周根宝;;基于T检验分析的SOM神经网络算法在癌症诊断中的应用[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2013年02期
5 刘淑蕊;薛兴阳;周苏娟;付腾飞;孟江;;基于BP神经网络对木瓜蛋白酶法提取鱼腥草多糖工艺的优化[J];广东药学院学报;2013年02期
6 李茂春;;单因素与正交实验结合优化氯沙坦钾片处方[J];医药导报;2013年02期
7 吴学贵;周永灿;欧阳吉隆;戴小连;王世锋;谢珍玉;;海南地区溶藻弧菌耐药性及其质粒多样性的研究[J];水产科学;2012年01期
8 李宝庆;鹿秀云;郭庆港;钱常娣;李社增;马平;;枯草芽孢杆菌BAB-1产脂肽类及挥发性物质的分离和鉴定[J];中国农业科学;2010年17期
9 叶计朋;邹世春;张干;徐维海;;典型抗生素类药物在珠江三角洲水体中的污染特征[J];生态环境;2007年02期
10 李卓佳;郭志勋;冯娟;张汉华;杨莺莺;;应用芽孢杆菌调控虾池微生态的初步研究[J];海洋科学;2006年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘晓晖;王炜亮;国晓春;卢少勇;;抗生素的水体赋存、毒性及风险[J];给水排水;2015年12期
2 陈庆安;陈兴都;翟丹云;董延虎;高晓辉;李赟;陈海龙;;正交设计-人工神经网络模型优化菊粉提取[J];食品研究与开发;2015年23期
3 梅冰;陆翔;王丽娜;王永乔;窦法楷;汪慧莲;李显秋;;溶藻弧菌的毒力因子与相关基因的研究进展[J];辽宁农业科学;2015年05期
4 周维;汤菊芬;甘桢;简纪常;吴灶和;丁燏;;溶藻弧菌耐药基因qnr的克隆及生物信息学分析[J];生物技术;2015年05期
5 章明奎;顾国平;徐秋桐;;农用地地表排水中抗生素的污染特征研究[J];江西农业学报;2015年10期
6 朱婷婷;宋战锋;尹魁浩;彭盛华;;南方某水库水体中抗生素生态与健康风险研究[J];生态毒理学报;2015年05期
7 秦楠;郝林;李鑫;;解淀粉芽胞杆菌HRH317抗菌蛋白的分离纯化及其抗菌作用[J];植物保护学报;2015年05期
8 胡珍珍;崔益斌;李梅;余静;;水体氮磷营养盐水平与氯霉素浓度复合水体对苦草的生理生化影响[J];环境科学;2015年09期
9 潘进;;蒙脱石吸附处理抗生素的研究进展[J];环境工程;2015年S1期
10 王华章;王晨晨;唐俊;;HPLC-MS/MS法测定巢湖水产品中抗生素残留量[J];安徽农业科学;2015年22期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑梅霞;陈峥;刘波;刘程程;车建美;蓝江林;潘志针;朱育菁;唐建阳;;解几丁质类芽胞杆菌几丁质酶活性及其次生代谢物的测定[J];福建农业学报;2014年05期
2 章培军;郭敏芳;张丽红;杨德兵;孟健;李加善;马存根;;黄芪糖蛋白抑制小鼠EAE的作用研究[J];山西大同大学学报(自然科学版);2012年05期
3 李晓杰;范圣此;;黄芪研究与开发利用综述[J];安徽农业科学;2012年11期
4 黄秀香;赖红芳;罗丽程;;超声波协同复合酶法提取半边莲多糖工艺优选[J];中国实验方剂学杂志;2012年05期
5 陈瑞平;陈瑞战;张敏;董航;李元;刘志强;;复合酶法提取大蒜多糖及其抗氧化活性研究[J];分子科学学报;2012年01期
6 展学孔;周海妹;马小花;刘全胜;;海参多糖提取新工艺[J];中国实验方剂学杂志;2011年15期
7 李丽;杨雪松;刘红全;;微生物几丁质酶的特性及其应用的研究进展[J];广西民族大学学报(自然科学版);2011年01期
8 宿玮;常耀光;薛长湖;武晓琳;;海地瓜多糖中蛋白含量测定方法比较[J];食品科学;2011年02期
9 张楷正;;立枯丝核菌拮抗菌的分离鉴定及其生理特性研究[J];北方园艺;2010年21期
10 梁慧;陈还珍;刘锦秀;郎晓青;;氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠主动脉内皮舒张功能的影响[J];中西医结合心脑血管病杂志;2010年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 单锦春,程如华,王明珠,于志宏,尹振田;从外环境中检出两株弗尼斯弧菌[J];解放军预防医学杂志;1994年04期
2 周登仁,王艳燕,黄桂花;海南省首次从餐饮业人员分离出产色素弗尼斯弧菌[J];中国热带医学;2001年04期
3 王海波,李健,冯桂林;从一起食物中毒的标本中检出弗尼斯弧菌[J];预防医学文献信息;2003年01期
4 于志华;文蛤增养殖技术讲座 第七讲 文蛤弗尼斯弧菌病的研究与防治技术[J];水产养殖;1998年01期
5 ;从腹泻病人粪便中分离到弗尼斯弧菌一例报告[J];交通医学;1992年03期
6 郭振坤,张晓兵,韩明琳,祁卓;本溪地区首次从食物中毒标本中检出弗尼斯弧菌(V-Furnissii)[J];中国卫生检验杂志;2000年04期
7 李天道,于佳,俞开康;四种弧菌对中国对虾的致病性研究[J];海洋湖沼通报;1998年01期
8 张彬;黄婷;熊建华;陈晓汉;王大鹏;杨彦豪;谢达祥;;文蛤主要弧菌性病害研究进展[J];广东农业科学;2012年17期
9 张强;;某市致病性弧菌及肠毒素检测研究[J];中国医药指南;2012年07期
10 杨正时,胡爱荣,陈拱立,徐卫健,林成水,陈亢川,权太淑,李乐民;河弧菌血清型的进一步研究[J];中国人兽共患病杂志;1991年01期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 王琨;孙云章;李富东;叶继丹;;饲料中添加两种寡糖和一种芽孢杆菌对牙鲆肠道菌群的影响[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
2 郭微微;邱军强;杨先乐;胡鲲;李忠云;王亭亭;;黄金鲹的一种细菌性疾病初步研究[A];2013年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 温金花;抗弧菌芽孢杆菌益生菌的筛选、鉴定及发酵工艺条件优化[D];福建师范大学;2016年
2 陈洁;3种致病性弧菌选择性鉴别培养基的研制[D];浙江工商大学;2012年
3 李富东;果寡糖、甘露寡糖和芽孢杆菌对牙鲆免疫功能和肠道微生态的影响[D];集美大学;2010年
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