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二甲双胍对肝癌荷瘤鼠抗肿瘤过程中AMPK、RAGE表达变化研究

高鹏翔  
【摘要】:目的:运用动物实验探讨二甲双胍对肝癌荷瘤鼠的抗肿瘤机制,并对传统观点的AMPK(adenosine monphosphate activated protein Kinase腺苷酸活化蛋白激酶)表达进行检测,同时检测AGEs/RAGE(advanced glycation end products/Receptor for advanced glycation end products糖基化终末产物/糖基化终末产物受体)通路的相关指标,研究两者之间可能的联系。方法:1、利用BALB/C裸鼠左侧腋下进行皮下HepG2肝癌细胞接种,制作裸鼠荷瘤模型,造模成功后随机分组进行空白对照,BSA,二甲双胍,AGEs-BSA,二甲双胍及AGEs-BSA两者联合等干预。2、定期测定裸鼠体重变化,测定空腹血糖,测量肿瘤体积的长短径a,b数值。3、经过4周的干预,取静脉血样本,静置过夜,离心1000转,20分钟后,取上清液-80℃保存,取血样本后,处死裸鼠,取肝细胞癌组织,正常肝组织,瘤旁组织于-80℃保存。4、运用ELISA法测定裸鼠血清中AGEs浓度,免疫组化法测定各组织中AMPK,RAGE等表达。结果:1、二甲双胍具有抑制肿瘤生长作用,能够减少荷瘤鼠体重(P0.05),对荷瘤鼠的空腹血糖无明显影响(P0.05)。2、ELISA测得注射AGEs的裸鼠,注射AGEs并联用二甲双胍的裸鼠血清中可测得含量较低的AGEs,其他组低于检测值下限。3、运用免疫组化法进行AMPK,RAGE检测,可发现二甲双胍可升高AMPK表达,降低RAGE表达。AGEs对于RAGE存在影响。结论:二甲双胍对于肝癌裸鼠荷瘤模型有抗肿瘤作用,可减轻裸鼠体重,对于空腹血糖无明显影响。可能通过激活AMPK途径,下调RAGE得以发挥抗肿瘤作用,长时间的干预下,AGEs可能存在降低RAGE表达,提高AMPK表达的作用,AMPK与RAGE可能存在一定联系,为二甲双胍抗肿瘤机制提供了新的思路。


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