收藏本站
《南昌大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

剪切力敏感型脂质体的制备及血栓诊断效果的评价

柯琴  
【摘要】:血栓是一种常见的慢性疾病,它与多种心血管疾病相关,已经成为全球致死致残的首因。当前血管造影剂常采用碘造影剂、钆类造影剂等,但这类造影剂用量大,易出现过敏反应和肾毒性损伤,从而限制了造影剂的使用,也限制了血栓的诊断。若增强血管造影剂的靶向性,则可减少造影剂的使用量并增加血栓诊断效果。脂质体是由磷脂等双亲性脂质材料在水中有序排列形成的双层膜囊泡,常用作药物载体系统。通过一些化学修饰,不同的结构的磷脂可以形成一些特殊性质的脂质体,如pH敏感型脂质体、温度敏感型脂质体、酶敏感型脂质体、超声敏感型脂质体、光化学敏感型脂质体和氧化应激敏感型脂质体等。随着医学、分子生物学和材料学的发展,人们发现血小板为椭球形细胞结构,具备一定的剪切力敏感性,在高剪切力下发生形变被激活。人们发现采用合适的材料可制备出仿生型的剪切力敏感型药物载体系统,因其可有效提高药物特异性释放而备受关注。本课题全合成了一种功能性磷脂1,3-二棕榈酰胺磷脂酰胆碱(Pad-PCPad),以该功能性磷脂为膜材,设计构建了一种具备剪切力敏感性质的药物载体系统,其内包载具有钙黄绿素或Di I。该合成磷脂构建的载体系统利用其特殊的剪切力敏感性,在高剪切力部位特异性地释放其内含物从而发出荧光,为血栓诊断功能性载体系统的设计提供一定的参考。本研究第一章全合成了功能性磷脂Pad-PC-Pad,并对中间产物和目标产物进行薄层色谱、核磁和质谱的表征。首先,将Boc基团与乙醇胺共价连接,薄层色谱结果表明已经成功合成了Boc保护的乙醇胺。再将Boc保护的乙醇胺、1,3-丙二醇和三氯氧磷共价连接形成化合物3,TLC和1H核磁图表明成功合成化合物3。化合物3中氯原子用叠氮基团取代,氢化后产物与棕榈酰氯共价连接形成化合物6,经TLC、1H核磁图和MS图表征,化合物6已经成功合成了。化合物6脱去Boc基团保护,氨基结构被甲基化后形成目标产物Pad-PC-Pad,1H核磁图和MS图表明成功合成Pad-PC-Pad。本研究第二章以Pad-PC-Pad和天然磷脂PC-98T为膜材,薄膜水化法制备剪切力敏感型脂质体(SSSL)和传统脂质体(TL),对SSSL制备过程中薄膜水化温度和探头超声的时间和功率进行筛选,并对SSSL和TL进行理化性质的表征和稳定性的考察。SSSL制备条件筛选结果显示,水化温度60℃,探头超声(功率50W,工作2s,暂停2s)5次为最佳制备条件,制备的SSSL粒径分布均一且平均粒径较为稳定。TL和SSSL的粒径分别为(105.5±3.8)nm,(106.9±1.2)nm,粒径较为均一且呈单峰分布。Zeta电位分别为(-12.5±1.5)mV,(+14.6±2.1)mV。透射电镜下SSSL呈现椭球形,TL呈现球形结构,分布均较为均一。TL和SSSL常温下放置一周,两组制剂平均粒径无明显变化,未发生明显聚集,两组无显著性差异。TL和SSSL释放度随着放置时间延长,稍有增加,但均不超过5%,表明两组制剂均较为稳定。本研究第三章对各脂质体进行了剪切力敏感性的评价。首先以具有聚集淬灭特性的荧光染料-钙黄绿素为包载物,薄膜水化法制备TL和SSSL,以探头超声模拟剪切力作用,考察不同温度不同探头超声功率下两组脂质体的钙黄绿素的释放情况。实验结果表明,TL和SSSL不同功率下的释放度均与温度有关,随着温度升高,释放度显著增加。但两组制剂在相同条件下,SSSL的释放度远强于TL组。37℃时,TL组释放度约为20%,而SSSL组释放度达65%。脂质体剪切力敏感性还和Pad-PC-Pad的含量有关,Pad-PC-Pad含量越高,剪切力敏感性越强。利用局部狭窄的模拟装置,考察不同剪切力下的TL和SSSL在狭窄部位的释放情况。结果显示,随着剪切力增加,TL在狭窄部位的释放稍有增加,而SSSL在高剪切力下狭窄部位的释放显著增加,进一步证实SSSL具备剪切力敏感性。本研究第四章以HUVEC细胞为细胞模型,通过MTT实验考察制剂的细胞毒性,通过DiI荧光探针对脂质体的细胞摄取情况进行了研究。细胞毒性实验表明TL和SSSL对HUVEC细胞均无明显影响,表明TL和SSSL具备生物安全性。细胞摄取结果显示,剪切后SSSL组胞内的荧光强度明显高于其他组,表明HUVEC细胞对剪切后的SSSL的摄取能力明显强于其他三组制剂。本研究第五章以KM小鼠为动物模型,以氯化铁法对肠系膜动脉进行局部阻塞的造模,对TL和SSSL进行血栓诊断能力的评价。血栓模型造模成功后,在显微镜下观察TL和SSSL组血管狭窄部位的荧光强度。结果显示SSSL组在血栓部位的荧光显著强于TL组。表明构建的SSSL可以对血栓部位进行有效地诊断。综上所述,本研究成功合成了功能性磷脂Pad-PC-Pad,该磷脂制备的椭球形脂质体具备一定的剪切力敏感性,可以有效地用于血栓诊断。
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R943

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 周文英;杜丽娜;金义光;;超声微泡造影剂:基因和药物传递的原理与应用[J];国际药学研究杂志;2008年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 刘莹莹;谢明星;徐金锋;王新房;吕清;张丽;覃小娟;项飞翔;张艳容;丁楠;杨畅;项光亚;;液态氟碳纳米脂质微粒与全氟丙烷纳米脂质微泡的物理特性及体外显影效果比较[J];中华核医学与分子影像杂志;2013年01期
2 阮晓博;杨芳;顾宁;;微纳气泡制备及其应用于医学超声影像增强与药物载运的发展[J];东南大学学报(医学版);2011年01期
3 王辰允;杜丽娜;周文英;程志刚;金义光;;载阿霉素超声敏感纳米泡的制备与性质[J];中国医院药学杂志;2010年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘瑶;霍美蓉;周建平;;还原敏感型药物递送系统的应用研究现状[J];药学进展;2013年07期
2 ;28例聋哑学生经络感传调查[J];针刺研究;1977年Z1期
3 袁园;张莉;;基于环糊精的环境敏感型水凝胶的研究进展[J];药学学报;2010年08期
4 张雪青;小儿自身诱发敏感型癫痫[J];国外医学(儿科学分册);1991年03期
5 刘佳;许建国;张灿;;pH敏感型紫杉醇胶束的工艺优化[J];中国医院药学杂志;2013年07期
6 王立明,刘永锋,袁雷;环孢素A治疗伴发窦道及激素不敏感型克隆病2例报告[J];中国实用外科杂志;1995年06期
7 夏苗芬;封玲;;眼用即型凝胶基质的成胶性研究[J];中国药师;2011年08期
8 戈升荣,裴元英;pH敏感型脂质体释药机制研究概况[J];中国医药工业杂志;1998年12期
9 阎秀霞;牟云云;;眼用即型凝胶的研究进展[J];中国医药指南;2013年24期
10 柳晨,戈升荣,陈御石,裴元英;pH-敏感型脂质小囊体外释放特性[J];上海医科大学学报;1999年01期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 刘瑶;霍美蓉;周建平;;还原敏感型壳聚糖胶束作为紫杉醇肿瘤递药载体的研究[A];2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集[C];2012年
2 王扬;王君莲;郝红;;葡萄糖敏感型水凝胶的制备[A];中国化学会第15届反应性高分子学术讨论会论文摘要预印集[C];2010年
3 刘泽金;;中国表面健康人群敏感型肌钙蛋白Ⅰ第99百分位值的建立[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
4 房玉宝;;口腔无痛苦治牙的探讨(附神经敏感型病人800例)[A];FDI、CSA临床口腔进展学术会议论文汇编[C];1999年
5 陈成军;赵志霞;王坚成;吕万良;张强;;基于氧化还原敏感型聚酰胺-胺和透明质酸的三元复合物用于siRNA的体外递送[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 李敏;敏感型肌肤应如何保养[N];市场报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 曹晓青;P4Hα1在不同剪切力诱导动脉粥样硬化中的作用及对平滑肌细胞胶原影响[D];山东大学;2017年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 柯琴;剪切力敏感型脂质体的制备及血栓诊断效果的评价[D];南昌大学;2017年
2 徐靖;含腙键生物可降解聚合物纳米载药胶束[D];河南大学;2015年
3 张英;还原敏感型米铂纳米胶束的制备及评价[D];青岛大学;2016年
4 朱涛;环境敏感型荧光染料合成及白蛋白识别研究[D];大连理工大学;2016年
5 周方;一种近红外激发活性氧敏感型高分子肿瘤联合治疗载体的构建[D];天津大学;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026