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《江西医学院》 2005年
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Hsp70-肽复合物致敏的树突状细胞抗肿瘤效果的实验研究

刘学政  
【摘要】:目的:探讨从胃癌组织中分离Hsp70-肽复合物,并致敏树突状细胞(DC),观察其在体外的抗肿瘤作用,为DC 介导的肿瘤免疫治疗提供理论实验依据。 方法:采用GM-CSF、IL-4 刺激,培养胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC),增殖产生大量DC,用SephadexG-100 凝胶层析法从临床胃癌组织中提取Hsp70-肽复合物,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量并行western-bolt鉴定。用此复合物修饰DC,通过ELISA 法对修饰DC 和未被Hsp70-肽复合物修饰DC 上清液的IL-12、TNF-α、IL-1β含量进行检测,用DC 激活自体混合T 淋巴细胞,观察其在体外对胃癌细胞的杀伤作用,用未被Hsp70-肽复合物修饰DC 作对照。 结果:用SephadexG-100 凝胶层析法从临床胃癌组织中提取的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和western-bolt 鉴定为Hsp70,从胃癌患者外周血获得的PBMC 经GM-CSF、IL-4 刺激培养7d 后电镜观察细胞不规则形,细胞表面粗糙突起明显,细胞核呈肾形和马蹄形,可确定为DC。Hsp70 修饰DC 后分泌IL-12、TNF-α、IL-1β等细胞因子的含量为(305.02±20.70)pg/ml 、(480.61±32.52)pg/ml、(519.60±39.12)pg/ml,而未被Hsp70 修饰DC 分泌的细胞因子IL-12 、TNF-α、IL-1β的含量为(3.81±0.84)pg/ml、(3.50±0.21)pg/ml、(50.11±2.86)pg/ml.两者比较具有明显的差异(P﹤0.01)。Hsp70 修饰DC 激活的T 淋巴细胞后对胃癌细胞的杀伤力为(93.5±8.2)%,与对照组的杀伤力(6.2±0.3%)比较具有显著差异(P﹤0.01)。 结论:从胃癌组织中提取蛋白为Hsp70,该蛋白保留了Hsp70 蛋白的原有生物活性,具有肿瘤的抗原信息。Hsp70 修饰DC 后,产生IL-12 、TNF-α、IL-1β等细胞因子的水平明显增加,修饰的DC 激活T 淋巴细胞后对肿瘤细胞具有很强的杀伤作用。
【学位授予单位】:江西医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R73-36

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【参考文献】
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