Th17/Treg平衡与正常妊娠及子痫前期关系的研究

【摘要】：研究背景及目的 子痫前期是严重影响母胎健康的妊娠晚期常见并发症,其病因与发病机制尚不明确。目前得到公认的主要有两种假说,包括免疫学假说及胎盘局部缺血假说,其中CD4+T淋巴细胞各亚群及其相关细胞因子介导的免疫平衡失调是近年来研究的热点。以往的研究认为Th (T helper)1及Th2细胞之前的免疫平衡是维持正常妊娠时母胎之间免疫平衡的重要机制。正常妊娠时母体趋向于Th2细胞介导的体液免疫状态,Th1/Th2细胞间的免疫平衡失调时可能导致流产、早产、子痫前期等疾病的发生。Th17、CD4+CD25+Foxp3+调节性T(regulatory T,Treg)细胞是近年来研究较多的不同于Th1、Th2细胞的两个CD4+T淋巴细胞亚群,在维持机体的免疫平衡中也起到重要作用。Th17与Treg细胞之间的关系目前尚无定论,但研究发现,Th17细胞与Treg细胞具有相反的分化发育调节机制和生物学功能,Th17/Treg间的平衡状态失调参与了许多炎症反应及自身免疫性疾病的发生和发展。因此,妊娠时调节母体免疫平衡及母胎之间双向免疫平衡的机制似乎不再局限于单纯的Th1/Th2模式,而是演变为新的Th1/Th2/Th17/Treg模式。目前,有关两类细胞在妊娠期的研究多局限于其在复发性自然流产中的作用,而阐述Th17/Treg平衡与子痫前期关系的资料较少。本文通过对比研究Th17、Treg细胞及其相关细胞因子在子痫前期患者、正常晚孕期妇女及孕龄期健康未孕妇女外周血中的表达,以期探讨Th17及Treg细胞介导的免疫反应在子痫前期发病中的作用,为进一步探索子痫前期的发病机制提供线索。 方法 选取在山东大学齐鲁医院进行常规产前检查的子痫前期患者25例,正常晚孕期妇女27例及孕龄期健康未孕妇女20例。于治疗前抽取肘正中静脉血并用肝素钠抗凝,分别标记为子痫前期组、正常妊娠组和正常未孕组。利用流式细胞技术分别检测三组研究对象血样中分泌IL-17的Th17、CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞亚群占CD4+T淋巴细胞的百分比,并计算Th17/Treg比率,比较其在子痫前期患者、正常妊娠妇女及正常未孕妇女体内的变化,再用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中IL-17、IL-10、TGF-β]等细胞因子的表达并进行比较。 结果 (1)与正常未孕组及正常妊娠组相比,子痫前期患者外周血中分泌IL-17的Thl7细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显升高(2.20±0.55% vs 1.46±1.00%,P0.01；2.20±0.55% vs 0.95±0.48%,P0.01)；正常妊娠组Th17细胞的比例较未孕组明显降低(0.95±0.48% vs 1.46±1.00%,P0.01)。 (2)与正常未孕组及子痫前期组相比,正常妊娠组妇女外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显增加(5.49±0.17%vs 4.80±0.13%,P0.05；5.49±0.17% vs 3.90±0.56%,P0.01)；与未孕期健康妇女相比,子痫前期患者外周血中Treg占CD4+T淋巴细胞的比例明显下降(3.90±0.56%±%vs 4.80±0.13%,P0.01) (3)与正常未孕组及正常妊娠组相比,子痫前期患者外周血中Th17/Treg比率明显增加(0.57±0.10 vs 0.31±0.10,P0.01；0.57±0.10 vs 0.18±0.73,P0.01)；正常妊娠组外周血中Th17/Treg比率与健康未孕组相比明显降低(0.18±0.73 vs 0.31±0.10,P0.01)。 (4)与正常未孕组及正常妊娠组相比,子痫前期患者外周血中IL-17及TGF-β1的TGF-β1表达明显升高(P0.05),而IL-10的表达虽有升高,但未见明显差异(P0.05)；而与正常未孕组相比,正常妊娠组外周血中IL-17、IL-10及TGF-β1的水平均未见明显变化(P0.05)。 结论 正常妊娠可能依赖于Treg细胞介导的免疫耐受状态。子痫前期患者外周血中Th17/Treg之间的平衡失调而倾向于Th17介导的促炎状态,这一机制可能参与了子痫前期的发生发展。