收藏本站
《山东大学》 2014年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

原发性肝癌患者血清中CDO1基因启动子甲基化状态研究

杨阳  
【摘要】:研究背景与目的 原发性肝癌(Primary liver cancer, PLC)是世界上常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均很高。甲胎蛋白虽为诊断原发性肝癌较为特异性的肿瘤标记物,但其存在着假阳性和假阴性的不足,为了提高肝癌的早期诊断率,寻找甲胎蛋白之外的肿瘤标记物成为研究的热点。半胱氨酸加双氧酶-1(cysteine dioxygenase1CD01)能够催化半胱氨酸(Cys)氧化反应生成半胱亚磺酸,是合成牛磺酸的关键酶。CD01作为一种新发现的抑癌基因,因其基因启动子甲基化导致的基因失活在人类多种肿瘤的发生、发展中起重要作用。本研究旨在通过检测原发性肝癌患者血清中CD01启动子区域CpG岛的甲基化情况,评价CD01启动子甲基化状态作为诊断肝癌的新型血清学生物标志物的可行性。 研究方法 原发性肝癌患者123例,肝硬化(liver cirrhosis, LC))患者28例,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者29例,均为2011年7月到2012年12月期间山东大学齐鲁医院住院患者。肝癌患者均为乙型肝炎相关性肝癌并符合美国肝脏疾病研究学会(American Association for the Study of Liver Diseases, AASLD)关于肝癌管理实践指南(2010年更新版)的诊断标准。CHB及LC患者均符合AASLD关于慢性乙型肝炎管理实践指南(2009年更新版)的诊断标准。20例健康志愿者为正常对照。所有样本均来自早晨8时采取的空腹静脉血。分离血清后,利用DNA提取试剂盒,严格按照说明书具体操作步骤提取血清中DNA.DNA通过重亚硫酸盐处理后,进行甲基化修饰,应用甲基化特异性引物进行甲基化特异性PCR(methylation specific pplymerase chain reaction, MSP)扩增,评价患者CD01启动子区域甲基化情况。 研究结果 1、肝癌患者血清中CD01启动子区域的甲基化率显著高于肝硬化患者、慢性乙型肝炎患者及正常对照(肝癌患者42.3%vs.肝硬化患者14.3%,P=0.006;肝癌患者42.3%vs.慢性乙型肝炎患者6.9%,P0.0001;肝癌患者42.3%vs.正常对照0%,P0.0001)。CD01启动子区域的甲基化率在肝硬化患者、慢性乙型肝炎患者和正常对照三者之间差异均无统计学意义(肝硬化患者14.3%vs.健康对照0%,P=0.130;慢性乙型肝炎患者6.9%vs.健康对照0%,P=0.507;肝硬化患者14.3%vs.慢性乙型肝炎患者6.9%,P=0.363)。 2.TNM Ⅲ-Ⅳ患者CD01启动子区域的甲基化率显著高于TNM Ⅰ-Ⅱ患者(TNM Ⅲ-Ⅳ患者53.0%vs. TNM Ⅰ-Ⅱ患者20.0%,P=0.001)。CD01启动子区域的甲基化状态与肝癌的肿瘤生物学特征显著相关。肿瘤直径5cm的肝癌患者、多发性肿瘤患者、门静脉或肝静脉侵袭患者表现出更高的CD01启动子区域的甲基化水平(OR=3.834,P=0.001;OR=3.183,P=0.004;OR=4.04, P0.0001). 3、CD01启动子区域的甲基化状态联合血清甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)可以显著提高原发性肝癌的检出率。在AFP截断值为20ng/m1时,单独AFP区分肝癌患者与肝硬化患者、慢性乙型肝炎患者的灵敏性为64.2%,特异性为84.2%。CD01启动子区域的甲基化状态联合血清AFP水平,其灵敏性为82.9%,特异性为75.4%。 研究结论 本研究首次证实原发性肝癌患者血清中存在C001启动子区域的异常甲基化。TNM Ⅲ-Ⅳ患者CD01启动子区域的甲基化率显著高于TNM Ⅰ-Ⅱ,CD01启动子区域的甲基化状态与肝癌的肿瘤生物学特征显著相关,提示CD01启动子区域的异常甲基化状态有可能可以用来区分肝癌的分期。CD01启动子区域的甲基化状态联合血清AFP水平可以显著提高原发性肝癌的检出率,提示CD01启动子区域的异常甲基化状态有可能可以成为一种非侵入性的诊断肝癌的新型生物学标志物。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R735.7

免费申请
【相似文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 孟凡龙;5种miRNA在肝癌患者血清中的表达变化情况及其诊断价值研究[D];安徽医科大学;2014年
2 杨阳;原发性肝癌患者血清中CDO1基因启动子甲基化状态研究[D];山东大学;2014年
中国知网广告投放
相关机构
>安徽医科大学
>山东大学
相关作者
>孟凡龙 >杨阳
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026