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四株内生真菌和一种植物的化学成分及其生物活性研究

解斐  
【摘要】:植物内生真菌(Endophytic fungi)是指一类在一定阶段或全部阶段均生活在健康的组织和器官内部,而不使宿主表现出明显病害症状的真菌。并且在与宿主长期协同进化的过程中,它们产生了许多活性优异和结构新颖的次生代谢产物,受到了天然产物化学家们的关注。植物内生真菌作为丰富的真菌基因多样性宝库,为人们发现可持续的、结构新颖和活性多样的先导化合物提供了重要来源。所以针对一些特殊群体(如以苔藓和地衣为宿主)内生真菌的次生代谢产物研究具有重大的意义。本文对四株植物内生真菌(包括一株苔藓内生真菌和三株地衣内生真菌)和一种传统药物植物向天果的化学成分进行了系统研究。根据前期活性筛选的结果选择 了 Aspergillus fumigatus、Phialocephala fortinii、Phaeosphaeria avenariaf sp.和Ulospwra bilgamii这四株内生真菌使用大米培养基进行放大发酵。分别使用乙酸乙酯和甲醇对菌株发酵产物和向天果进行提取,采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱以及高效液相柱色谱等多种分离纯化技术,从四株内生真菌和一种植物中共分离得到78个化合物,其中包括32个新化合物。综合采用质谱、核磁共振、单晶衍射和圆二色谱等方法确定了化合物的平面结构和立体构型。对分得的化合物进行细胞毒、抗真菌和α-葡萄糖苷酶抑制等活性评价,结果显示部分化合物具有显著的活性,其中化合物25和30与氟康唑联用具有很好的逆转耐药活性。进一步活性机制研究表明,化合物25和30通过抑制基因MDR1的表达来抑制外排泵的活性,进而实现逆转耐药。


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