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《山东大学》 2003年
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扫描电化学显微镜测定单细胞内的过氧化物酶和纳米电极的应用

王晓蕾  
【摘要】:第一章首先对扫描电化学显微镜(SECM)的实验装置,工作模式和工作原理进行了简要的介绍。然后就SECM的下述几个方面进行了较详细的介绍。1.介绍了SECM探头的发展,包括微米和纳米电极,化学修饰电极和生物传感器,微米和纳米管在SECM中的应用情况。2.介绍了获得SECM图像的两种模式(等高模式和等电流模式)的发展状况。3.介绍了SECM在生物分析方面的应用,包括SECM对酶,抗原抗体复合物,DNA以及细胞的研究。本章共引用文献121篇。 第二章利用β-CD与环氧氯丙烷交联聚合物(β-CDP)在酸性条件下与戊二醛发生缩聚而形成的不溶于水聚合物,把辣根过氧化物酶(HRP)固定在绝缘体基底上。利用SECM的反馈模式研究固态HRP酶点上发生的异相催化反应的一级酶催化反应动力学。在缓冲溶液中1,4-苯醌(BQ)在Pt微盘电极(SECM的探头)上发生可逆电极反应,生成氢醌(HQ)。当探头逼近酶点时,探头上产生的HQ就会与溶液中的H_2O_2在HRP的催化下反应生成BQ和水。这样探头电流就会增加,即产生正反馈电流。由于探头上BQ的反应很快,探头电流主要受酶异相催化反应的控制。通过对SECM在酶点上的反馈曲线与理论曲线进行比较,测得了一级酶异相催化反应速率常数。证明SECM是研究固态酶点上的异相催化反应动力学的一种简便、有效的方法。并用此方法测定不同pH值下酶催化反应的表观速率常数,来研究溶液的pH值对HRP活性的影响。实验结果表明,HRP在pH7.0时活性最高。 第三章建立了用SECM测定单个中性粒细胞中的髓过氧化物酶(MPO)活性水平的方法。用推片法把细胞固定在载玻片上,形成细胞单层。在充分晾干后,细胞膜的通透性发生改变。当溶液中加入MPO的底物(HQ和H_2O_2)后,它们可以扩散细胞内MPO的表面,并在MPO的催化下发生反应生成BQ和水。酶的催化反应速度非常快。生成的BQ就会向溶液中扩散。当探头的电位恒定于BQ发生还原反应的电位时,BQ在探头上发生电极反应,生成HQ。当探头距离细胞较远时,由于溶液中BQ极少,所以电流很小。而当探头移动到细胞附近时,由于BQ浓度很高,在探头上检测到较大的还原电流。因此可以通过检测MPO催化反应所产生BQ的量来测定单个中性粒细胞中MPO的水平。在含有3.00x10~(-3)mol/L HQ,3.00x10~(-3)mol/L H_2O_2的生理盐水中,测定了四个中性粒细胞MPO产生的峰,峰电流在4.2-7.0x10~(-10)A范
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q27

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6 涂新满;聚合物修饰电极的压电电化学研究及其在生物分析中的应用[D];湖南师范大学;2007年
7 李雪梅;扫描电化学显微术构建金和辣根过氧化物酶微图形[D];山东大学;2007年
8 张力;用于半导体和金属表面三维微/纳结构制备的新型电化学加工方法及其应用[D];厦门大学;2008年
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2 宋琼,金葆康;去甲肾上腺素在碳纤维修饰电极上的电化学行为研究[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年05期
3 姜泽春,章振根,莫德明,陈大梅;纳米金的迁移富集与黄铁矿富金关系[J];矿产与地质;1998年06期
4 陈启凡;孙世安;王岩;张福辰;;金纳米探针瑞利共振散射法测定溶菌酶[J];激光生物学报;2008年05期
5 钟霞,袁若,柴雅琴,赵勤,刘颜,唐点平,戴建远;超灵敏葡萄糖生物传感基于自组装纳米金和(3-巯基丙基)-三甲氧基硅烷凝胶溶胶(英文)[J];西南师范大学学报(自然科学版);2004年06期
6 赵立凡;李柏生;黑笑涵;李晓波;李媛媛;徐顺清;;银染增强的纳米金探针技术检测微量核酸[J];中国生物化学与分子生物学报;2006年11期
7 覃柳;刘仲明;邹小勇;;纳米金固定酶标抗体的免疫传感器[J];医疗卫生装备;2007年06期
8 曹淑瑞;袁若;柴雅琴;张凌燕;黎雪莲;王福昌;;基于聚氨基吡啶膜固定纳米金/硫堇/纳米金的过氧化氢生物传感器(英文)[J];西南师范大学学报(自然科学版);2006年05期
9 傅小红;袁若;柴雅琴;甘贤雪;王丽;程晓丹;;高灵敏电位型风疹疫苗免疫传感器的研究(英文)[J];西南师范大学学报(自然科学版);2008年02期
10 任洪波;万小波;张林;杜爱明;修鹏;;种子法制备金掺杂二氧化硅气凝胶[J];强激光与粒子束;2006年05期
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2 张现峰;杜学忠;;亚胺二乙酸功能化纳米金检测肌红蛋白[A];中国化学会第十三届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2011年
3 谢微;沈爱国;胡继明;;金纳米花生的制备及其SERS效应研究[A];第十五届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2009年
4 鲁闻生;李津如;苏延磊;江龙;;空心纳米金微球的制备[A];中国化学会第十届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2004年
5 朱亚琦;马洁;;以纳米金提高固定蛋白A的稳定性研究[A];第十三次全国电化学会议论文摘要集(下集)[C];2005年
6 李雪礼;周瀚成;郭术;邓友全;;室温离子液体中纳米金的可控合成[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
7 强金凤;王瑞娟;张金贵;沈明;;反相微乳液中CTAB包裹的纳米金的原位还原法合成[A];中国化学会第十二届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2009年
8 杨维英;周霞;贺剑锋;李向军;袁倬斌;;基于磁性纳米材料和纳米金组装的电化学传感器对砷的研究[A];中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集[C];2009年
9 张毅;漆红兰;张成孝;;纳米金组装界面上N-(4-氨基丁基)-N-乙基-异鲁米诺-过氧化氢体系电致化学发光行为研究[A];中国化学会第十届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2004年
10 袁敏;刘燕;郭荣;;基于纳米金的尿酸生物传感器[A];中国化学会第28届学术年会第12分会场摘要集[C];2012年
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1 本报记者 刘俊;“纳米食品”安全存疑[N];广州日报;2010年
2 本报记者 童岱;刘扬:发现“神水”之毒[N];北京科技报;2009年
3 记者 任荃;纳米金球让基因拷贝不走样[N];文汇报;2006年
4 何屹;纳米金晶簇的催化活性与大小有关[N];科技日报;2008年
5 王德禧;纳米塑材进军生物医学领域[N];中国化工报;2006年
6 ;金价走高难挡“金书”收藏热潮[N];深圳商报;2005年
7 雯心;无创检查早期转移肿瘤[N];健康报;2007年
8 胡唯元;“纳米试纸”:致命疾病早知道[N];科技日报;2004年
9 吕反修 唐伟忠;纳米金刚石膜及其高技术应用[N];中国高新技术产业导报;2002年
10 《经济参考》报记者 王一娟;中国科学家多年少[N];新华每日电讯;2000年
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1 吴萍;新型纳米催化剂的设计及用于特定细胞与细胞中重要小分子的检测[D];南京师范大学;2013年
2 刘雪平;基于纳米金信号转换和信号放大的新型生物传感技术研究[D];湖南大学;2009年
3 李文清;纳米金在雄性生殖毒理和雄性避孕中的功能研究[D];中国科学技术大学;2014年
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5 夏玮;纳米金电化学生物传感技术研究[D];华中科技大学;2011年
6 李文静;纳米金薄膜电极和纳米多孔钯电极的制备、修饰与电催化研究[D];山东大学;2011年
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8 王康林;纳米金共振散射相关光谱及其应用[D];上海交通大学;2008年
9 曲文刚;金属纳米粒子表面等离子体共振效应的调控及相关应用[D];中国科学技术大学;2013年
10 Damra Elhaj Mustafa Abbass;金纳米的制备、性能、标记和催化应用研究[D];华中师范大学;2011年
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1 邓文歆;光子晶体与纳米Au耦合效应及其对染料电池改性的研究[D];上海交通大学;2010年
2 鲁理平;纳米金修饰电极在生物电化学中的应用[D];安徽大学;2001年
3 鲁卫平;以纳米金为报告系统的病原体快速检测基因芯片的研制[D];第三军医大学;2003年
4 邱思远;纳米金阻止VEGF165与VEGFR2结合的原子力显微镜研究[D];暨南大学;2010年
5 范保林;ATRP法在纳米SiO_2表面接枝聚合物及其应用研究[D];合肥工业大学;2010年
6 丁收年;纳米金修饰巯基化合物自组装膜的界面电化学及其应用[D];安徽大学;2003年
7 李辉;纳米金对聚合酶链式反应的影响及其机制研究[D];厦门大学;2008年
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