收藏本站
《山东大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组内皮抑素及重组α-干扰素在抑制角膜新生血管生成及肿瘤中的应用研究

王晓燕  
【摘要】:目的 内皮抑素(endostatin)是近几年发现的一种内源性血管内皮细胞增殖的强效抑制剂。研究发现内皮抑素能特异性抑制处于增殖状态的新生血管内皮细胞,并伴有诱导凋亡的作用。近年来,国内外学者对内皮抑素的研究主要集中在它对肿瘤的治疗作用,而在其它血管增生相关性疾病中的研究较少。角膜新生血管化(CNV)是临床上致盲的主要原因之一,也是角膜移植捧斥反应发生的高危因素,但目前尚无特效的治疗方法。本部分研究的目的是探讨毕赤酵母菌表达的重组分泌型内皮抑素对角膜新生血管的抑制作用。 材料与方法 1.利用RT-PCR技术从人胎肝中获得人endostatin cDNA,经T-A克隆制备含有人endostatin基因的克隆质粒(pGEM-En); 2.利用酵母分泌型表达载体pGAPZ_aA构建含有人endostatin基因的重组质粒(pGAPZ_(?)A-En),经电转化导入毕赤酵母菌GS115株; 3.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选阳性重组子,经Western Blot鉴定;利用Heparin亲和层析柱进行纯化后,在体外利用MTT法检测重组内皮抑素对人脐静脉内皮细胞ECV-304的生长抑制作用; 4.利用角膜缝线法和碱烧伤法制备兔角膜新生血管动物模型,分别在角膜缝线后和碱烧伤后第一天给予球结膜下注射重组内皮抑素0.2ml,隔日一次,共8次。治疗后分别在术后第4、7、10、13天用双脚规测量新生血管长度,用数码相机定位拍摄照片,输入计算机进行图象分析。并于第16天,处死上述兔,取眼球及全身重要脏器(心、肝、肾、脾、肺)送病理检测。在用药后同时观察球结膜是否充血、水肿,角膜有无混浊水肿及全身状况。并利用免疫组化法检测VEGF的表达,在显微镜下观察微血管的数量。 结果 1.经PCR扩增成功构建的克隆载体(pGEM-En)及表达载体(pGAPZ_aA-En),
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R73-3

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 樊莹;张文芳;刘永民;王玉萍;;维替泊芬介导的光动力疗法治疗兔眼角膜新生血管[J];国际眼科杂志;2011年07期
2 闫长青;刘三光;戚诚;张建生;王文斌;;胰腺癌患者外周血VEGF和endostatin表达及意义[J];中国肿瘤临床与康复;2011年04期
3 刘福国;冀玉苓;潘新亭;路艳艳;孙学国;高艳景;陈建;江月萍;;大肠癌患者VEGF和Endostatin的表达及其与临床病理特征的关系[J];中国现代普通外科进展;2011年08期
4 骆非;接英;郭旭明;孙亚杰;徐庆;王立;吕岚;;小牛血红细胞提取物眼用凝胶治疗兔角膜损伤的实验研究[J];中国临床药理学杂志;2011年08期
5 谯雁彬;易虹;赵敏;;羊膜移植治疗严重眼表疾病的临床研究[J];重庆医科大学学报;2011年08期
6 林翎;梁纳;马胜生;;羊膜移植治疗眼部化学伤及热烧伤临床观察[J];中国职业医学;2011年03期
7 熊洁;邓应平;王语诗;李玉宝;许凤兰;;纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜在兔角膜的生物学反应[J];眼科;2011年03期
8 屈昕;;综合治疗眼部碱烧伤的临床分析[J];医学信息(中旬刊);2011年06期
9 奉海军;陈登;;细胞生长因子促进角膜内皮细胞增殖的实验研究进展[J];四川解剖学杂志;2011年02期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 金霞;曹嘉英;余滕;;氩激光封闭角膜新生血管联合抗病毒治疗基质型单疱病毒性角膜炎的对比研究[A];2011年浙江省眼科学术会议论文集[C];2011年
2 李克坚;杨化新;徐康森;;血管内皮抑素(endostatin)国内外研究进展[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
3 王晓燕;孙汶生;马春红;张利宁;李欣;曹英林;刘素侠;宋静;韩丽辉;;重组人分泌型endostatin的纯化及其抑癌活性研究[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
4 王小翠;杨洋;邓礼娟;陈刚;徐晓玉;;内异消抑制子宫内膜异位症大鼠血管生成以及对VEGF和endostatin表达的研究[A];全国第3届临床中药学学术研讨会论文集[C];2010年
5 陈嘉宁;黄巧玲;姜文浩;;血管内皮生长因子在碱烧伤角膜新生血管中表达的研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
6 赵亮;;肝癌患者血清中tumstatin与endostatin含量联合检测的临床价值[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
7 张峰;李长优;任胜卫;王宜强;;小鼠Mxra7基因在角膜血管新生过程中功能的初步研究[A];山东生物化学与分子生物学会2009年学术会议论文汇编[C];2009年
8 冯怡;崔立斌;刘传喧;马清钧;;Endostatin在毕赤酵母中的表达纯化及其生物功能研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
9 李修义;杨巍;刘林林;田梅;朴春姬;潘艳;;电离辐射调控的IFNγ和Endostatin双基因-放射治疗抗肿瘤作用及其机制的研究[A];全国医用辐射防护与安全学术研讨会论文汇编[C];2004年
10 李馨;张灵;梁作文;贾慧婕;徐德启;李扬;赵雪俭;;siRNA-Stat3联合endostatin共表达质粒治疗前列腺癌的实验研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 秦建成;恩度:诞生世界首例饿死肿瘤新药[N];中国国门时报;2009年
2 王梅;信息时代挑战眼睛健康[N];健康报;2002年
3 文执 编译;抗癌新靶标 肿瘤内的血管[N];科技日报;2002年
4 李凌松;角膜干细胞及其临床应用[N];科技日报;2002年
5 本报特约记者 洛频;血管发生,新的药物靶点[N];中国高新技术产业导报;2002年
6 游向东;羊膜移植治严重眼部烧伤[N];健康报;2005年
7 ;FK506眼液防治同种异体角膜缘移植免疫排斥反应的实验研究[N];中国医药报;2003年
8 林琳;肿瘤抑素有望成为抗肿瘤药物[N];中国医药报;2003年
9 印高乐;台湾医生发现羊膜具有抑制血管增生功能[N];中国高新技术产业导报;2002年
10 ;重组人内抑素对大鼠佐剂性关节炎继发性炎症的抑制作用[N];中国医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王晓燕;重组内皮抑素及重组α-干扰素在抑制角膜新生血管生成及肿瘤中的应用研究[D];山东大学;2004年
2 杨志广;短双歧杆菌携带Endostatin和IFNγ的特性及其抗小鼠肺癌的作用[D];吉林大学;2010年
3 张妍霞;激光温热效应治疗角膜新生血管的实验研究[D];复旦大学;2003年
4 贾慧婕;减毒沙门氏菌运载共表达质粒Stat3-siRNA与Endostatin对小鼠肝细胞原位癌模型的治疗作用及机理探讨[D];吉林大学;2012年
5 李长优;S100A蛋白在角膜新生血管中的实验研究[D];青岛大学;2011年
6 周进;基因沉默EGFL7联合重组Endostatin治疗胰腺癌的实验研究[D];苏州大学;2011年
7 卢炳新;基因重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗膀胱癌的实验研究[D];天津医科大学;2004年
8 尚庆丽;内皮抑素抑制脉络膜新生血管的实验研究[D];河北医科大学;2004年
9 商旭敏;来氟米特活性代谢物A771726缓释给药系统抑制角膜新生血管和角膜移植免疫排斥反应的实验研究[D];华中科技大学;2010年
10 王冰;脂质体介导重组人血管内皮细胞生长抑制因子基因转染抑制角膜新生血管的实验研究[D];青岛大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钟敏;重组人血管内皮抑素(恩度)抑制角膜新生血管的实验研究[D];南方医科大学;2012年
2 王军花;阿瓦斯汀不同的给药途径对兔角膜新生血管及角膜超微结构的影响[D];南昌大学;2011年
3 荆国利;贝伐单抗对大鼠角膜新生血管的抑制作用[D];石河子大学;2009年
4 诸凤娇;结膜下注射贝伐单抗对兔角膜新生血管的抑制作用[D];暨南大学;2010年
5 屈延;小鼠Endostatin基因的克隆、表达、纯化及其生物学活性的初步研究[D];第四军医大学;2000年
6 刘子彬;血管抑素溶液在大鼠角膜新生血管中的作用研究[D];南方医科大学;2012年
7 林芳;Bevacizumab对大鼠角膜新生血管抑制及其超微结构影响的实验研究[D];石河子大学;2009年
8 常岩;Avastin滴眼对角膜新生血管抑制作用的实验及临床研究[D];第四军医大学;2010年
9 赵燕;贝伐单抗(Bevacizumab)对兔角膜新生血管作用及药物浓度与作用的相关性[D];滨州医学院;2010年
10 胡慧丽;不同浓度Avastin对角膜新生血管抑制作用的实验研究[D];暨南大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026