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药用植物新疆紫草离体繁育研究

江波  
【摘要】:本文以药用植物新疆紫草为实验材料,通过间接器官发生与直接器官发生两条途径,建立了新疆紫草高效的离体再生系统。 在间接器官发生再生途径的实验中,按照外植体——愈伤组织的诱导——愈伤组织继代——愈伤组织再分化——不定芽的扶壮与快繁——根的诱导与移栽的过程进行一系列的优化试验。 在愈伤组织诱导过程中,比较了不同基本培养基、不同浓度的激素组合、不同外植体的影响。结果表明愈伤组织的最佳诱导条件为:以茎段为外植体,在改良LS基本培养基上添加1.0mg/L2,4-D和1.0mg/L KT。 愈伤组织在继代筛选过程中,形态上呈现出两种不同类型:一种为白色紧密的块状结构,可实现再分化;另一种为半透明的松散型愈伤组织,没有能诱导其再分化,却是进行细胞培养生产次生代谢产物的优良材料。 对于紧密型愈伤组织进行再分化实验,比较了不同细胞分裂素(KT,BA,TDZ)、不同浓度的ABA、不同种类与浓度的渗透调节剂(PEG4000与甘露醇)、乙烯抑制剂AgNO_3、不同愈伤组织继代次数,对于再分化的影响。结果表明,KT的诱导效果比BA和TDZ好,其中1.5mg/L KT具有最大的分化率,分化频率达到87%,平均每块愈伤组织可以产生7.4棵苗;低浓度的ABA对于愈伤组织分化有一定的促进作用;渗透剂PEG4000要比甘露醇更利于再生苗的后期发育;2.0mg/L AgNO_3可以使愈伤组织的分化频率达到87%,每块愈伤组织可以诱导产生9.2棵苗;继代次数对愈伤组织的分化影响较大,继代次数越高,分化频率越低。 在不定芽扶壮过程中,100mg/L PVP能够很好的抑制芽基部的褐化现象,并且促进不定芽的生长发育。KT对于不定芽的快繁效果要比BA好,1.0mg/L KT可以诱导平均每棵不定芽产生6.5棵新的不定芽。在根的诱导过程中,不同量的基本培养基和不同种类与浓度的生长素都有一定的影响,在1/2的改良LS培养基上添加1.0 mg/L的IBA具有最佳的诱导效果,诱导频率为65%。 在直接器官发生途经中,主要研究了TDZ的作用效果。1.0mg/L TDZ具有最佳的诱导效果,单独使用TDZ比与其它激素结合使用效果更好。此外,TDZ对子叶外植体的诱导效果比胚轴外植体好,不同的TDZ处理时间对诱导频率也有影


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