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《山东大学》 2005年
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沾化冬枣基因工程改良的基础研究

孟辉  
【摘要】:沾化冬枣(Ziziphus jujuba Mill.)是鲜食枣果中的珍品,作为我国特有的晚熟鲜食果品,具有很高的营养价值和市场开发前景。然而,沾化冬枣成熟期集中,贮藏期短,常温下仅能保存6-7天;利用常规储藏方法,果实出库后品质不佳,货架期也只有3-5天。因此,如何在保持果实鲜食品质的前提下延长贮藏期,成为果树遗传改良中亟待解决的问题之一。冬枣属于高呼吸强度的非跃变型果实,ABA对其后熟及贮期衰老起着非常重要的作用,影响枣果后熟过程中各类酶活性和果实贮藏物质的降解速率及硬度,是导致枣果变软衰老的启动因素。因此,通过反义基因技术组织特异性的降低ABA合成强度有可能延长枣果采收期和贮藏保鲜期。然而,有关沾化冬枣遗传工程的研究未见报道。本工作主要研究内容有二,一是将ABA合成途径中关键酶基因重组到植物表达载体,二是建立沾化冬枣遗传转化体系,为利用反义基因技术延长枣果采收期和贮藏保鲜期的工作奠定基础。 ZEP基因和NCED基因是ABA合成途径中的关键酶基因。在第一部分工作中,将本实验室克隆的来自盐芥(Thellungiella halophila)的ZEP基因和NCED基因分别重组到质粒pCAMBIA1300-als的KpnI位点,并分别获得了含有目基因正、反向插入的植物表达载体pCAMBIA1300-ZEP(+)-als、pCAMBIA1300-ZEP(-)-als、pCAMBIA1300-NCED(+)-als和pCAMBIA1300-NCED(-)-als,并转入根癌农杆菌LBA4404中。用携带上述质粒的农杆菌转化了烟草叶盘,在加有选择剂的培养基上获得转化植株。对转化植株进行PCR检测和Southern杂交鉴定,证明外源基因已整合到烟草基因组。并为鉴定盐芥ZEP基因和NCED基因的功能准备了材料。 建立遗传转化体系是利用基因工程改良作物的基础,本工作以沾化冬枣组织培养苗茎尖为受体,通过农杆菌介导法,将来自大肠杆菌的胆碱脱氢酶基因betA和来自拟南芥的乙酰乳酸脱氢酶突变基因als导入冬枣细胞,获得了转化小苗。在此基础上,研究了农杆菌悬浮液浓度、浸染时间、共培养时间和真空渗入处理
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S665.1

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【引证文献】
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1 白瑞霞;彭建营;;我国枣生物技术研究进展[J];植物遗传资源学报;2006年03期
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1 李莉;刘新云;彭建营;;枣品种选育研究进展[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
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1 白瑞霞;枣种质资源遗传多样性的分子评价及其核心种质的构建[D];河北农业大学;2008年
【参考文献】
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【共引文献】
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9 杨小亮;李瑞珍;徐碧玉;金志强;;香蕉1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶反义基因转化香蕉的研究[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
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10 李瑞珍;香蕉1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS)反义基因植物表达载体的构建及转化香蕉的研究[D];华南热带农业大学;2001年
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3 蔡雪,孙德兰,关雪莲,王红;花椒珠心胚及胚乳的发生和发育[J];西北植物学报;2000年04期
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