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《山东大学》 2005年
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卵巢癌顺铂耐药靶向逆转的初步研究

张珂  
【摘要】:目的:研究顺铂耐药卵巢癌细胞系COC1/DDP中多药耐药相关蛋白2(MRP2)基因以及谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)基因的表达,探讨两种基因的反义寡核苷酸对COC1/DDP细胞铂类耐药的逆转作用。 方法:将人工合成的反义、错义硫代脱氧寡核苷酸经脂质体包裹转染COC1/DDP细胞后,用MTT体外药敏检测法观察COC1/DDP细胞耐药性的变化,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测多药耐药相关蛋白基因(MRP2)以及谷胱甘肽转移酶基因(GSTπ)mRNA水平表达的改变,同时通过Western blotting的方法检测两种基因蛋白表达的变化。 结果:(1)COC1/DDP细胞中,MRP2与GSTπ基因均有表达,其mRNA相对表达值分别为0.42±0.05和0.78±0.13。而亲代COC1细胞中两种基因均无表达。(2)将GSTπ反义寡核苷酸转染COC1/DDP细胞后,GSTπ的mRNA水平降低(P0.05),其蛋白表达明显降低,顺铂对COC1/DDP细胞的抑制率明显提高,具有显著性差异(P0.05)。(3)将MRP2反义寡核苷酸转染COC1/DDP细胞后,MRP2基因在mRNA水平(P0.05)及蛋白水平的表达均明显下降,耐药细胞的耐药性降低(耐药指数)具有显著差异。(4)转染错义寡核苷酸组,MRP2、GSTπ表达改变差异无显著性。体外耐药试验显示,转染错义寡核苷酸组与未转染组COC1/DDP耐药性无显著性差异。 结论:(1)GSTπ和MRP2基因高表达与卵巢癌COC1细胞获得顺铂耐药性有密切关系。(2)GST-ASODN及MRP2-ASODN均能特异并有效地逆转COC1/DDP细胞系对顺铂的耐药性,提高其化疗敏感性。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R737.31

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